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Trabajo de investigación
presentado como requisito
para
aprobar la asignatura por:
TM. Daniela Zárraga
Maracay, noviembre 2023
UNIVERSIDAD DE CARABOBO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD.
ESCUELA DE BIOANÁLISIS
“PROFA. OMAIRA FIGUEROA”
SEDE ARAGUA
Trabajo de investigación
presentado como requisito para
aprobar la asignatura por:
TM. Daniela Zárraga
Tutora Científica: Dra. Marleny Chavarri
Tutor Metodológico: Prof. José Romero
Maracay, noviembre 2023
UNIVERSIDAD DE CARABOBO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD.
ESCUELA DE BIOANÁLISIS
“PROFA. OMAIRA FIGUEROA”
DEPARTAMENTO CLÍNICO INTEGRAL
PROYECTO DE INVESTIGACIÓN
Atentamente;
Nombre y Apellido:
C.I.
Firma
ÍNDICE GENERAL
PP
RESUMEN......................................................................................................vi
CAPITULO I: EL PROBLEMA
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.............................................................30
UNIVERSIDAD DE CARABOBO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD.
ESCUELA DE BIOANÁLISIS
“PROFA. OMAIRA FIGUEROA”
SEDE ARAGUA
Daniela Zárraga
Tutora Científica: Dra. Marleny Chavarri
Tutor Metodológico: Prof. José Romero
Maracay, 24 de noviembre de 2023
RESUMEN
La calidad del agua potable es un pilar fundamental para la
preservación de la salud pública, mientras que la creciente escasez de agua
emerge como una preocupación global; Venezuela está exenta de esta
realidad, donde el acceso a agua potable segura constituye una problemática
en numerosas regiones. El presente proyecto se aboca a la evaluación
bacteriológica del agua proveniente de pozos profundos localizados en
Maracay, Estado Aragua, teniendo en cuenta la percepción general de que
las aguas subterráneas son inherentemente seguras por la ausencia de
organismos patógenos, podría existir la posibilidad de contaminación. La
presencia de bacterias en el agua subterránea representa una amenaza
significativa para la salud humana, especialmente para grupos vulnerables.
En particular, el proyecto se enfoca en indicadores bacteriológicos clave:
coliformes totales y fecales, bacterias mesófilas aerobias y Pseudomonas
aeruginosa. Los objetivos de la investigación comprenden la determinación
de coliformes totales y fecales en el agua proveniente de pozos profundos,
así como la cuantificación de bacterias mesófilas aerobias y Pseudomonas
aeruginosa. El estudio se enmarca en un enfoque descriptivo y de corte
transversal, y se llevará a cabo un muestreo sistemático en cuatro pozos en
Maracay, totalizando 12 muestras. Para lograr estos objetivos, se recurrirá a
técnicas de dilución en tubo (NMP) para los coliformes y al recuento en placa
para las bacterias mesófilas aerobias y Pseudomonas aeruginosa. La
relevancia de este estudio se manifiesta en un contexto donde la calidad del
agua y su acceso seguro se erigen como preocupaciones cruciales para la
salud pública.
Palabras Clave: Agua de Pozos Profundos, Calidad Bacteriológica,
Coliformes totales, Coliformes Fecales, Pseudomonas aeruginosa
CAPITULO I: EL PROBLEMA
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se definen como: huecos profundos en la tierra o perforaciones subterráneas,
cilíndricas, con el fin de interceptar mantos de aguas subterráneas”.
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bacterias como Salmonella spp., Shigella spp., coliformes totales y fecales,
los cuales han sido encontradas en abastecimientos de agua (Mejía y Cols.,
2021; Ministerio de Salud, 2015).
Del mismo modo, las bacterias mesófilas aerobias, que incluye una
gran variedad de géneros y especies, pueden ser utilizadas como
indicadores operativos de la eficacia de la desinfección y de la limpieza del
sistema de extracción, el agua subterránea debe ser objeto de monitoreo
permanente, tanto por parte de las entidades de gobierno como por los
particulares que hacen uso o impactan sobre dicho recurso (kaleb, 2013).
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pueden causar un sin número de enfermedades contagiosas al hombre,
siendo los más afectados recién nacidos y personas de la tercera edad, entre
ellas: salmonelosis, cólera, difteria, artritis reactiva, meningitis, neumonía
bacteriana, infecciones dérmicas, otitis externa, fibrosis quística, foliculitis,
infecciones oculares, entre otras; e incluyendo en algunos casos a los
patógenos oportunistas, causantes de numerosos casos de infección
nosocomial en individuos inmunocomprometidos, Mielko y Cols. (2019),
indican que Pseudomonas aeruginosa puede ser un factor patogénico
significativo de infecciones graves en humanos, especialmente en pacientes
con fibrosis quística. Debido a su resistencia natural a los antibióticos y la
capacidad de formar biopelículas, la infección con este patógeno puede
causar graves problemas terapéuticos.
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Finalmente, la presente investigación permitirá, determinar los
coliformes totales, coliformes fecales, bacterias mesófilas aerobias y
Pseudomona aeruginosa, y si están dentro del límite de tolerancia aceptada
y deseable en el agua de pozo profundo para su consumo; contar con una
información de diagnóstico, más reciente, de estos pozos para futuras
investigaciones.
1.2. Objetivos
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CAPITULO II: MARCO TEÓRICO
2.1.1. Agua
El agua es un recurso sumamente esencial para la vida y la sociedad
en general gracias a sus propiedades únicas. El agua es un regalo de la
naturaleza para los seres vivos y el fluido más importante para la
supervivencia de los organismos. Según una estimación, el 97% del agua
total del mundo es agua salada y el 3% restante es agua dulce. De este 3%,
solo el 0,01% está disponible para uso humano (Qureshi y Cols., 2021).
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poros y fisuras del terreno se encuentran saturados. Esta se aloja en los
acuíferos y son capaces de almacenar y trasmitir el agua desde la superficie
debajo de la tierra (Llamas y Cols., 2000; Ordoñez, 2011).
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El mayor caudal con un mínimo abatimiento, en concordancia con las
características del acuífero.
El agua extraída debe carecer de partículas sólidas en suspensión o
arenas.
La mayor vida útil para el pozo.
Costo de construcción y operación económicamente factible.
2.1.9. Bacterias
Las bacterias son microorganismos procariotas (sin núcleo definido)
que presenta dimensiones sumamente pequeñas, pero perfectamente
medible. La unidad de medida que se utiliza es el micrómetro (μm), el cual
equivale a 10-6 m = 10-3 mm. Aunque el tamaño de las bacterias es variable,
generalmente, su rango está entre 1-1,5 μm de diámetro por 3-10 μm de
longitud. Algunas formas filamentosas alcanzan 100 μm de longitud. El
promedio frecuente del tamaño de la célula bacteriana oscila entre 1x5 μm.
La forma de las bacterias no es siempre constante, al igual que sus
dimensiones. Presentan tres formas características: las esféricas o
redondeada se denominan cocos; formas alargadas, cilíndricas llamadas
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bacilos o bastones, y las que poseen formas curvas llamadas espiraladas u
onduladas (Chavarri y Rojas, 2019b). Ellas son los organismos más
abundantes del planeta. Son ubicuas, encontrándose en todo hábitat de la
tierra, creciendo en el suelo, en manantiales calientes y ácidos, en desechos
radioactivos (Fredrickson y cols., 2004).
12
(cristal violeta o violeta de genciana), después es tratada con una solución de
Lugol (yodo + yoduro de potasio), luego, con alcohol acetona y finalmente
con un colorante ácido (safranina ácida) que contrasta con el primer
colorante. Después de este tratamiento, algunas bacterias quedan
intensamente teñidas de violeta, debido al colorante básico y son llamadas
bacterias Gram positivas (Gram +), mientras que otras se decoloran con el
alcohol o alcohol – acetona, tomando el color rosado o rojo, según el
colorante de contraste usado, y a este grupo se les denomina bacterias
Gram negativas (Gram -) (Chavarri y Rojas, 2019a).
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demuestra con facilidad al eliminarlo o destruirlo. Un segundo componente
de la pared celular de las bacterias Gram- es un ácido teicoico. Estos
compuestos son polímeros ya sea de fosfato de glicerol o fosfato de ribitol,
con diversos azúcares, aminoazúcares y aminoácidos como sustituyentes.
De los ácidos teicoicos compuestos por fosfato de poliglicerol, gran parte no
están enlazados con la pared sino con un glucolípido en la membrana celular
subyacente. Este tipo de ácido teicoico se denomina ácido lipoteicoico y
parece representar una función de anclaje de la pared a la membrana celular
y como una adhesina en la célula epitelial (Ryan y Cols., 2009).
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Deben hallarse de forma constante en las heces y estar asociados a
aguas residuales; estar distribuidos al azar en las muestras y ser resistentes
a la inhibición de su crecimiento por otras especies.
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general, se hace hincapié en la importancia higiénica, para lo cual la
presencia en las heces es la más importante (Arcos y Cols., 2005).
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Gram-, con tamaño de 1 µm de longitud por 0,35 µm de ancho, aerobios o
anaerobios facultativos, que fermentan la lactosa con formación de gas. Es
un coliforme fecal termotolerantes y está constantemente presente en
grandes cantidades en las heces de los animales de sangre caliente, incluido
el hombre, donde es un habitante natural del intestino. E. coli se utiliza como
indicador de contaminación fecal de los sistemas de suministro de agua
potable, y se consideran el principal indicador de contaminación fecal del
agua de uso doméstico, industrial y otros. Forman parte del grupo coliforme
total, y son microorganismos que fermentan la lactosa con producción de gas
a 44º C ± 0.2 en un periodo de 24 a 48 horas (Prescott y Cols., 2000).
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Staphylococcus aureus. Los organismos de esta clase se multiplican por
debajo de los 25°C, pero más lentamente). Muchos organismos que se
crecen en las plantas y en el suelo son mesófilos (Prescott y Cols., 2000).
18
consumir agua con índice de coliformes cero, los cuales podrían estar
inhibidos por Pseudomonas (Soares y Cols., 1996; Vasconcelos y Cols.,
2010).
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para el consumo humano por pobladores de los repartos Las Coloradas y La
Playa (municipio de Moa-Cuba) cuando falla la distribución de agua potable a
través de la red hidrológica. Se emplearon las técnicas analíticas
convencionales, así como métodos gráficos. Los resultados reflejaron la
presencia de elementos no deseables, indicadores de contaminación, que
sobrepasan los índices establecidos para el consumo humano como agua
potable.
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Méndez (2015), en su investigación sobre la “Calidad microbiológica de
pozos de abastecimiento de agua potable en Yucatán, México”, evaluó la
calidad microbiológica 5 del agua subterránea de 106 pozos de
abastecimiento del sistema de agua potable, determinando la agrupación de
bacterias coliformes y enterococos, para identificar el principal origen de la
contaminación era por heces humanas o animales. Las principales
amenazas para el acuífero se derivan del manejo inadecuado de los
desechos y el crecimiento poblacional, en las zonas rurales el 26,7% de
viviendas carece de sistema sanitario. Los sitios donde se tomaron las
muestras corresponden a cada una de las zonas de abastecimiento y fueron
colectadas directamente de los pozos de abastecimiento de las plantas
potabilizadoras. En cada pozo, se realizó los análisis bacteriológicos in situ,
utilizando incubadoras bacteriológicas de campo. Los resultados obtenidos,
evidencian la presencia de bacterias indicadores de contaminación en 93 de
los 106 pozos muestreados. Solamente 18 de los 106 pozos de
abastecimiento cumplen con los parámetros establecidos, de manera general
concluyeron que la mayoría de las zonas de abastecimiento de agua del
Estado de Yucatán existe contaminación bacteriológica tanto reciente como
no reciente, esto se debe a la falta de tratamiento de las aguas residuales
domésticas e industriales y por la filtración al acuífero.
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análisis bacteriológico se registraron 880 UFC/100 mL de Shigella, por lo que
se puede afirmar que en el pozo de agua existe la presencia en alta cantidad
de este patógeno. En el caso de Salmonella spp., alcanzó a 530 UFC/100 mL
de la misma manera se comprobó que el valor detectado en el agua de pozo
de la comunidad de Loma Alta fue alto según la comparación de los
parámetros de la calidad microbiológica del agua, así mismo se detectó E.
coli con un valor de 20 NMP/100 mL.
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bacterianas en tres pozos profundos ya que estos se encontraban expuestos
a contaminación por residuos. Los Coliformes termotolerantes y E. coli,
fueron consistentemente mostradas en época de lluvia y estiaje, evaluó las
aguas subterráneas, Río Viejo y tributarios más importantes, manantiales,
pozos perforados y algunos pozos excavados, realizó dos muestreos en 16
sitios a lo largo del Río Viejo, 7 manantiales, 10 pozos perforados y 3 pozos
excavados. En las Aguas Superficiales del Río Viejo, la concentración de
Coliformes termotolerantes, fluctuaron entre 1,10 x 10 1 y 7,90 x 104 NMP/100
mL. En todos los sitios estudiados durante la época seca y la época lluviosa,
también se observó la concentración de E. coli, constantemente en ambas
épocas oscilando entre < 1,8 y 7,90 x 10 4 NMP/100 mL; existe algunas cepas
de E. coli que pueden causar enfermedades, en los sitios estudiados aguas
superficiales, presentando contaminación para la salud humana, en casos
que la población entre en contacto con el agua contaminada. Los resultados
evidenciaron que las aguas superficiales y subterráneas estaban siendo
influenciadas por actividades realizadas por el ser humano y que existe una
contaminación de origen fecal, que representa un riesgo potencial a la salud
de la población.
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coliformes fecales se presentaron en dos de los ocho sectores muestreados
en el sector la Gloria superaron los 160 NMP /100 mL de coliformes fecales
de la muestra, mientras que en sector California solo un punto de muestreo
superó los 40 NMP/100 mL de coliformes fecales. Concluyó que el agua
subterránea de los pozos tubulares a tajo abierto del distrito de Virú, no son
aptas para el consumo humano, se puede utilizar para la agricultura y
actividades recreativas previa cloración.
24
permitido, así como la presencia de P. aeruginosa, Áscaris spp., Blastocystis
sp., Giardia sp. y Eimeria sp., a pesar de que los parámetros fisicoquímicos
estaban dentro de la norma. Es por ello por lo que resulta fundamental
conocer la situación del agua en las diferentes regiones a fin de plantear
medidas adecuadas de gestión, lo cual permite reducir el peligro potencial de
los recursos subterráneos como fuente de abastecimiento.
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CAPITULO III: MARCO METODOLÓGICO
Análisis Bacteriológicos
27
Se efectuará mediante dos pruebas: presuntiva y confirmativa
(COVENIN 3047-93, 1993)
28
en las muestras. Los resultados se expresan como NMP de bacterias
coliformes fecales / 100 de muestra de agua.
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Análisis de datos
Los datos obtenidos en el estudio serán ingresados a una base
de datos Excel, utilizando la hoja de cálculo como herramienta y se
analizarán mediante estadística descriptiva (medias aritméticas ±
desviación estándar y coeficiente de variación).
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CAPITULO IV: ASPECTOS ADMINISTRATIVOS
Mayo
Junio
Julio
Agosto
Septiembre
Octubre
Noviembre
Diciembre
Enero
Febrero
Marzo
Abril
Mayo
Junio
Actividad
Revisión
bibliográfica.
Selección de
Pozos
profundos.
Toma de las
muestras,
Procesamiento
e incubación
de las
muestras de
los pozos
profundos.
Análisis de los
resultados.
Redacción del
informe final.
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