FUENTE 1

Objetivo general
Estudiar el efecto de la temperatura y el tiempo de contacto sobre la actividad
antibacteriana de desinfectantes comerciales en la industria alimentaria, así como
diferenciar la actividad de dichos desinfectantes frente a microorganismos "salvajes"
comúnmente transmitidos por alimentos.
Objetivos específicos:
 Determinar cómo la temperatura afecta la actividad antibacteriana de los
desinfectantes.
 Evaluar cómo el tiempo de contacto influye en la eficacia de los desinfectantes.
 Comparar la eficacia de los desinfectantes frente a microorganismos
comúnmente presentes en alimentos.
 Definir el tipo de desinfectante más adecuado para diferentes
microorganismos.
 Establecer las concentraciones y temperaturas óptimas para la efectividad del
desinfectante.
 Determinar el tiempo de contacto más apropiado entre la superficie y el
desinfectante para una desinfección eficaz. (1)

Procedimiento
Basándose en lo establecido por la A.O.A.C. (8), los cultivos de los diferentes
microorganismos se mantuvieron en agar nutritivo a 5°C, lo que constituyó el
“stock” de cultivo. De cada “stock” se inocularon tubos de ensayo que contenían 10
mL de caldo nutritivo, que fueron incubados durante 24 h a 37°C.

 Realización de una inoculación en tres tubos de ensayo con asas de platino,

cada uno conteniendo caldo nutritivo e incubados a 37°C durante 24 h.
 Inmersión de cilindros de acero inoxidable esterilizados en los cultivos
durante 15 min, seguido de secado en una placa de Petri estéril.
 Lavado de los cilindros con NaOH 1,0 N, enjuague con agua desionizada y
colocación en matraces Erlenmeyer con solución de asparagina al 0,1%.
 Esterilización de los matraces y enfriamiento antes del uso de los cilindros.
 Recuento bacteriano del caldo nutritivo para determinar la población
bacteriana inicial.
 Preparación de diluciones del desinfectante con agua desionizada, con la
máxima concentración del ingrediente activo ensayada a 100 ppm y
diluciones decrecientes.
 Colocación de cilindros contaminados en tubos con las diluciones del
desinfectante y baño de agua a temperatura específica durante 15 min antes
del ensayo.
 Incubación de los cilindros en caldo tripticasa soya a 37°C durante 48 h para
verificar el crecimiento bacteriano.
 Verificación del punto crítico de desinfección donde se inhibió el crecimiento
bacteriano en los tres medios de subcultivo sembrados con los cilindros del
mismo tratamiento. (1)

Conclusiones. El aumento en la temperatura de los desinfectantes estudiados

incrementó la actividad antibacteriana de éstos. A medida que se incrementó el
tiempo de contacto del hipoclorito de sodio con las superficies contaminadas, se
incrementó la actividad antibacteriana del mismo. El incremento del tiempo de
contacto de las sales de amonio cuaternario con las superficies contaminadas, no
siempre favoreció la actividad antibacteriana del desinfectante. Staphylococcus
aureus fue el microorganismo más sensible a los dos desinfectantes estudiados. La
sensibilidad de los microorganismos Gram positivos estudiados, ante las sales de
amonio cuaternario, fue mucho mayor que la exhibida por Salmonella spp.
Staphylococcus aureus fue más sensible a las sales de amonio cuaternario y al
hipoclorito de sodio que Bacillus cereus. Bacillus cereus fue más resistente (1)
FUENTE 2
METODO
Técnica de dilución en tubo Se cultivaron las cepas jóvenes de 18 h en medio
TSA, se preparó una suspensión de 10 a 12 colonias en 15 ml de solución salina
hasta alcanzar al equivalente de 0.5 de la escala de McFarland (aproximadamente
1.5 x 108 UFC/ml), seguidamente se preparó tres juegos de 10 tubos, que
contenían 2 ml de TSB; cada juego de 10 tubos correspondían a los minutos 5, 10 y
15 respectivamente para cada desinfectante comercial, se autoclavó y se dejó
enfriar. Así mismo se preparó 10 tubos, enumerados del 1 al 10, de cada
desinfectante comercial por cada cepa de las dos bacterias estudiadas, conteniendo
1000 μl de agua destilada autoclavada, posteriormente se añadió 1000 μl del
desinfectante comercial al tubo N° 1, que fue diluido de forma seriada hasta el tubo
N° 10, del cual se descartó 1 ml, luego se agregó 1000 μl de la suspensión
bacteriana a cada tubo enumerado (agua + desinfectante + suspensión
bacteriana). Luego de transcurrir 5 minutos se procedió a transferir 0.2 μl de los
tubos enumerado, al primer juego de los 10 tubos correspondientes al minuto 5; se
dejó transcurrir 5 minutos más y se transfirió al juego de 10 tubos que
correspondían al minuto 10 y finalmente pasado otros 5 minutos se transfirió al
juego de 10 tubos correspondientes al del minuto 15. Se realizó la lectura después
de 24 horas de incubación. (2)
CONCLUSIONES
En un estudio realizado mediante diluciones con influencia de los tiempos 5, 10 y
15 minutos por (41), indica que la bacteria Gram positiva fue influenciada por el
tiempo de exposición al desinfectante de amonio cuaternario; con lo que
concordamos con este estudio; ya que los tiempos de exposición de Pinesol cloruro
de benzalconio influenció en el crecimiento de S. aureus (Gram negativa), a pesar
que el tiempo de incubación fue diferente a la temperatura que utilizaron. Sin
embargo en dicho estudio señala que para la bacteria Gram negativa, la exposición
a los tres tiempos de este desinfectante no influenció en su crecimiento; siendo
discrepante con lo obtenido en nuestros resultados, donde los tres tiempos de
exposición si influyeron en el crecimiento de P. aeruginosa (Gram negativo) En los
resultados obtenidos del estudio Formulación de tres productos desinfectantes y
evaluación de su actividad antibacteriana por (42) se demostró que el tiempo con
mejor actividad de exposición de Glutaraldehído al 2% frente a Escherichia coli,
Staphylococcus aureus, Pseudomona aeruginosa, Salmonella choleraesuis y Listeria
monocytogenes, fue el minuto 15, resultado que no concuerda con nuestra
evaluación, ya que Poett – Glutaraldehído no presentó actividad antimicrobiana en
Staphylococcus aureus, Pseudomona aeruginosa. El desinfectante Clorox – Lejía,
tuvo buena actividad antibacteriana en los minutos 5, 10 y 15, lo cual se asemeja a
la evaluación realizada por (43), en hipoclorito de sodio donde presenta una
eficacia bactericida del 100% en concentraciones al 0.08% a diferentes tiempos de
exposición en diferentes cepas. (2)

FUENTE 3
Objetivo general
Evaluar la eficacia de dos desinfectantes de uso hospitalario frente a biopelículas
de Pseudomonas aeruginosa y Staphylococcus aureus formadas sobre acero
inoxidable.
Objetivos específicos

1. Optimizar un método para la formación de biopelículas de Pseudomonas

aeruginosa y Staphylococcus aureus sobre discos de acero inoxidable.
2. Evaluar la reducción bacteriana después del tratamiento con los
desinfectantes frente a biopelículas de Pseudomonas aeruginosa y de
Staphylococcus aureus formada sobre discos de acero inoxidable.
 3. Comparar la eficacia de los desinfectantes de uso hospitalario frente a
biopelículas de Pseudomonas aeruginosa y de Staphylococcus aureus
formada sobre discos de acero inoxidable.
4. Comparar la eficacia de los desinfectantes de uso hospitalario contra la lejía
tradicional de uso común frente a biopelículas de Pseudomonas aeruginosa y
de Staphylococcus aureus formada sobre discos de acero inoxidable.

MÉTODO
Optimización de un método para la formación de biopelículas sobre discos
de acero inoxidable
Preparación de los discos de acero inoxidable:

A. a. Lavar los discos con agua destilada y limpiarlos.

B. b. Remojar los discos en acetona durante 10 minutos, lavar con agua
destilada, limpiar con etanol y enjuagar con agua destilada.
C. c. Colocar los discos en agua destilada hirviente durante 10 minutos y secar
a 40 °C.
D. d. Autoclavar los discos durante 15 minutos a 121 ºC.

Cultivo de bacterias y suspensión bacteriana:

A. a. Inocular una colonia de Staphylococcus aureus y Pseudomonas

aeruginosa en TSB y incubar a 37 ºC por 24 horas.
B. b. Recolectar por centrifugación, lavar con Agua peptonada bufferada (APB)
y resuspender en TSB (equivalente a 0,5 de la escala McFarland).

Formación de la biopelícula:

A. a. Colocar un disco en un tubo con suspensión bacteriana y dejar a 4 °C por

24 horas.
B. b. Lavar los discos con APB, transferir a tubos con TSB y incubar a 37°C por
6 días, cambiando el medio diariamente.

Tratamiento de la biopelícula con desinfectantes:

A. a. Lavar los discos con APB, someterlos a desinfectantes según

concentraciones y tiempos específicos.
B. b. Utilizar Dezavid® en concentraciones recomendadas, Supersafe-D® en
spray directo y lejía tradicional diluida.

Enumeración bacteriana:

A. a. Lavar los discos con APB, transferir a tubos con perlas de vidrio estériles y
agitar.
B. b. Plaquear en Agar Plate Count (PC) las diluciones de la suspensión de
células sin diluir y diluciones en APB.
C. c. Incubar las placas a 37 °C por 48 horas y realizar el recuento de colonias
(UFC/disco). (3)

CONCLUSION

Se optimizó un método para la formación de biopelícula de Staphylococcus aureus y

Pseudomonas aeruginosa sobre discos de acero inoxidable. Se evaluó la reducción
bacteriana para Dezavid® 0,05 % en Staphylococcus aureus ATCC y cepa clínica
los cuales tuvieron una reducción logarítmica de 2,28 log (99,47 %) y 2,33 log
(99,53 %) respectivamente; y para Pseudomonas aeruginosa ATCC y cepa clínica
fue de 1,06 log (91,26 %) y 1,07 log (91,48 %) respectivamente; en Dezavid®
0,10 % para Staphylococcus aureus ATCC y cepa clínica tuvo una reducción de 3,91
log (99,99 %) y 3,95 log (99,99 %) respectivamente; y para Pseudomonas
aeruginosa ATCC y cepa clínica fue de 2,15 log (99,28 %) y 2,20 log (99,36 %)
respectivamente. En cuanto al desinfectante Dezavid® 1,00 % y Supersafe-D® se
obtuvo tanto en Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa una reducción >
5 log (> 99,999 %). Dezavid® 1,00 %; 0,10 % y Supersafe-D® fueron los
desinfectantes con mayor eficacia para Staphylococcus aureus ATCC y cepa clínica.
En el caso de Pseudomonas aeruginosa ATCC y cepa clínica los desinfectantes con
mayor eficacia fueron Dezavid® 1,00 % y Supersafe-D®. Lejía (1:20) tuvo igual
eficacia que Dezavid® 1,00 %; 0,10 % y Supersafe-D® para Staphylococcus
aureus ATCC y cepa clínica. En el caso de Pseudomonas aeruginosa ATCC y cepa
clínica la Lejía (1:20) tuvo igual eficacia que Dezavid® 0,10 %. (3)

FUENTE 4
El objetivo primario de este estudio fue evaluar la eficacia inmediata de 5
productos a base de hipoclorito de sodio, sales de amonio cuaternario y triclosán (5
cloro-2 (2-4-diclorofenoxi)fenol) para la reducción de la carga bacteriana
doméstica. Secundariamente se intentó determinar la eficacia de dichos productos
a mediano plazo, comparada con la de otros productos de uso habitual, junto a la
importancia de la educación sanitaria del hogar, para el mantenimiento de niveles
bajos de carga bacteriana doméstica. (4)

Materiales y métodos
Se seleccionaron 32 hogares de la Ciudad de Buenos Aires y su conurbano, de
los cuales 16 fueron provistos con cinco productos desinfectantes: (a) solución
líquida con triclosán al 0.03% (spray), (b) solución líquida con hipoclorito de sodio
al 2.5%, (c) solución líquida con sales de amonio cuaternario al 0.675%, (d)
pastillas con ácido tricloro isocianúrico al 90%, (e) gel con sales de amonio
cuaternario al 0.45%. Los restantes 16 hogares seleccionados formaron el grupo
control, y emplearon sólo los productos que usaban habitualmente: (a) solución
líquida de hipoclorito de sodio en un rango de concentración de 5-6%, (b)
solución líquida con cloruro de benzalconio al 0.16% y (c) soluciones líquidas con
detergentes (alquilbenceno sulfonato de sodio) en un rango de concentración
de 8-30%. El grupo control mantuvo las prácticas habituales de limpieza de la
vivienda sin intervención durante el mes de duración del estudio. (4)
Resultados Y CONLUSIONES
El 86.7% de las muestras basales obtenidas en cocinas, y el 64.0% de las
muestras basales de los baños resultaron positivas (Tabla 3). El recuento
bacteriano basal promedio en cocinas fue de 66.0 UFC/cm2 y en los baños fue de
40.1 UFC/cm2 (Tabla 4). En ambos sitios evaluados se observó un descenso
significativo del recuento bacteriano inmediato, efectuado a los 10 minutos de la
desinfección inicial con los productos ensayados. En la cocina, sólo el 7.6% de las
muestras de seguimiento inmediato resultaron positivas, con una carga
bacteriana promedio de 0.8 UFC/cm 2 (reducción del 98.8% del recuento basal;
p = 0.0001). En el baño fueron positivas el 0.8% de las muestras de seguimiento
inmediato, con un recuento promedio también menor a 1 UFC/cm2 (reducción del
98.8% del recuento basal; p = 0.0001) (4)

FUENTE 5
el objetivo principal de esta investigación es evaluar la concentraciÛn y eficiencia
durante el tiempo de uso de nuevos desinfectantes que reduzcan el deterioro
microbiano de los productos frescos. (5)

METODOS.
Desarrollo de la prueba: Para esta prueba se ocupó un inóculo de 500-10000
UFC/mL como se indica en la NOM-181-SSA1-1998. Con los resultados obtenidos
del conteo bacteriano en la estandarización de la técnica se realizaron los cálculos y
se obtuvo la concentraciÛn de carga bacteriana que se aplic al desinfectante en
cada uno de los tiempos (2 mL de la dilución -2 al 10 ± 2 % de transmitancia por
cada 500 mL de desinfectante). Dicho inoculo se prepara diariamente para cada
una de los desinfectantes a diferentes concentraciones, asÌ como la verificaciÛn del
espectrofotÛmetro que se ajustaba al 10 ± 2 %de transmitancia. Preparación del
desinfectante: Se prepararon por separado cada uno de los desinfectantes en
concentraciones de 10 ppm y 20 ppm en 3 L de agua desionizada para
posteriormente tomar 500 mL para cada tiempo aevaluar(0,10,20,30,60 y 120
min). Después,se agregan 2 mL del inóculo antes mencionado,se agita en el Vortex
y se realizaron diluciones seriadas de -1 a la -7 seg ̇n lo indica la NOM-110-SSA1-
1994, sembrando en placas por la tÈcnica de vaciado, 1 mL por duplicado con agar
PC y dejando una placa como blanco. Transcurridos los tiempos indicados se
incubaron a una temperatura de 35 C Por 48 h. Por u̇ltimo, se retiraron de la
incubadora para determinar el crecimiento bacteriano. Con los resultados de la
cuenta de UFC/mL en la estandarizaciÛn de la técnica y el conteo de colonias
desarrolladas después de aplicar el desinfectante de prueba, se calcularon los
porcentajes de reduccion bacteriana de acuerdo a la NOM-181-SSA11998. (5)

RESULTADOS
Porcentaje de Reducción Bacteriana (%RB):
En la tabla 1 se muestran los porcentajes del efecto de reducción bacteriana en
cada uno de los desinfectantes en los diferentes tiempos de exposición. El cloro
granulado en ambas concentraciones (10 y 20 ppm) y en todos los tiempos de
exposición, se obtuvo una eficiencia del 100% sobre la bacteria E. coli al 10% de
transmitancia. En el caso del hipoclorito de sodio, por ser un derivado de los
compuestos clorados y uno de los más utilizados en la industria alimentaria (Troller
1993; Stewart et al., 1994; Sanderson y Stewart, 1997), se esperarían resultados
semejantes. Sin embargo, ni en las concentraciones evaluadas y en ninguno de los
tiempos de exposición se obtuvo un porcentaje de reducción bacteriana
satisfactorio. En el minuto 0 con la concentración de 10 ppm se obtuvo una
eliminación del 99.30% y en 20 ppm fue de 99.54%. Por lo anterior y según la
NOM-181-SSA1-1998, no es un desinfectante viable para ser utilizado. La NOM-
181-SSA1-1998 indica que el porcentaje de reducción bacteriana debe ser igual o
mayor al 99.99% para considerar que el desinfectante puede ser utilizado. (5)

FUENTE 6

OBJETIVO GENERAL: Valorar la eficacia de los desinfectantes DIVOSAN FORTE Y

MH, utilizados para la desinfección tanto en las áreas de trabajo como en la
maquinaria, de una industria procesadora de helados.
OBJETIVOS ESPECIFICOS: Determinar el tipo de microorganismos que se
presentan con mayor incidencia en las áreas de trabajo y en los equipos de la
planta de procesamiento en la industria de alimentos. Evaluar la efectividad de los
desinfectantes utilizados en el proceso, teniendo en cuenta las concentraciones, la
recomendada 0.2 v/v, la mitad de esta 0.1 v/v y el doble de la recomendada 0.4
v/v, y los tiempos de exposición de los productos 5, 10 y 15 minutos, para los
microorganismos hallados. (6)

METODOS
La evaluación microbiológica se basó en la técnica de evaluación de desinfectantes
(CARRASCAL, 2003) (GUEVARA, 1997). Los microorganismos a empleados fueron
los contaminantes ambientales de la planta de procesamiento de helados. Se
utilizaron los volúmenes estipulados por la técnica 2 y 0.2 mL de sanitizante y
microorganismo respectivamente, teniendo en cuenta la relación 1/11. Se
adicionaron 2 mL de cada concentración de las soluciones a evaluar en tubos tapa
rosca estériles. Se adicionaron 0.2 mL de la solución de microorganismo a cada
tubo con la solución a evaluar. Se dividieron las cajas de Petri con agár selectivo
en cuatro cuadrantes, los cuales corresponderán a los tiempos evaluados y al
control
Se realizaron pases de cada tubo a los diferentes agáres selectivos por duplicado, a
los 5, 10 y 15 minutos, inoculando con asa 4 estrías sobre la superficie de los
agáres en cada cuadrante. Adicionalmente, se realizó un control positivo
(microorganismo) por cada caja sembrada. Se llevaron a incubar las cajas de los
agáres selectivos sembrados a 35ºC por 48 horas para las cepas de bacterias y a
30ºC por 5 días para las cepas de levaduras y hongos. Se realizó la lectura de las
cajas incubadas de la siguiente manera: observando el número de estrías que
presentaron crecimiento del microorganismo, teniendo en cuenta que cada una de
ellas tendrá un valor de 25% sobre un total de 100% equivalente a las cuatro
estrías del cuadrante. Para considerar válida una estría, ésta debía presentar un
crecimiento mayor o igual al 50% de su longitud. (6)

RESULTADOS
Estos dos tipos de desinfectantes resultaron muy efectivos con los dos
microorganismos que se evaluaron, ya que mostraron un 100% de inhibición en el
crecimiento de estos, casi en la totalidad de ensayos realizados; es decir como se
pudo observar en los resultados mostrados anteriormente, los desinfectantes
DIVOSAN FORTE y MH, son capaces de inhibir el 100% de los microorganismos
aislados y probados, tanto en la concentración recomendada 0.2% v/v, (Tabla 2,
Figura 3), como en la correspondiente al doble de esta es decir 0.4% v/v, (Tabla 4,
Figura 5). Esto se determinó para todos los tiempos evaluados 5, 10, 15 minutos
respectivamente, por ende la hipótesis de nulidad Ho: μ ≤ 75% en estos casos, se
rechaza y se puede decir que la media poblacional de los microorganismos es
mayor a 75%. En cuanto a la concentración correspondiente a la mitad de la
recomendada, en este caso 0.1% v/v, (Tabla 3, Figura 4), se observo que presenta
fallas en su efectividad, debido a que a los 5 minutos de exposición, el porcentaje
de inhibición fue de 0%, y a los 10 minutos fue de 75%, lo cual indica que a esta
concentración, los desinfectantes necesitan un mayor tiempo de exposición, el cual
esta entre 10 y 15 minutos, para lograr un 100% de inhibición de l crecimiento
microbiano. Para este caso se acepta la hipótesis de nulidad Ho: μ ≤ 75%, para los
5 minutos de exposición. Para los 10 y 15 minutos esta hipótesis se rechaza, ya
que los desinfectantes cumplieron con la disminución en un 75% de los
microorganismos. (6)

FUENTE 7

Es objetivo de este trabajo evaluar la efectividad del desinfectante LopHene ST

mediante el método de placas de contacto.

Desarrollo del método

Se tomó 1 mL de la suspensión de los microorganismos y se esparció sobre una
superficie de 25 cm × 25 cm de material análogo al material donde se aplica el
desinfectante. En posiciones aleatorias en réplicas de tres por cada medio se realizó
el muestreo de superficie con placas RODAC listas para su uso de la casa comercial
Liofilchem de Italia; estas placas contenían TSA y SDA, más neutralizante. Se
procedió a su incubación según tiempo y temperatura indicada para cada medio (32
± 2 ºC y 22 ± 2 ºC respectivamente). Transcurrido el tiempo de incubación, se
contaron las UFC en las placas. Se procedió a calcular la media y se multiplicó por
el factor de dilución, considerándose como control positivo. Los resultados se
expresaron en UFC/mL. Sobre una superficie de igual dimensión se aplicó el
desinfectante preparado según instrucciones del fabricante, concentración del 4 %-
10 min de exposición. Se procedió de igual manera que para el control positivo.(7)

Resultados.
Se evidenció que el método de placas de contacto empleado resultó válido para la
evaluación de la efectividad de los lotes del desinfectante. Las placas RODAC
recuperaron las UFC al tiempo cero y a los 10 min de exposición, lo que mostró la
reducción de las colonias crecidas. Un resultado similar a este se obtuvo al emplear
este método por parte de los autores para evaluar la efectividad de un
desinfectante indicado para la desinfección de superficies críticas. El desinfectante
LopHene ST es eficaz frente a las cepas de microorganismos ensayadas en el
tiempo evaluado (10 min de contacto) y a la concentración probada (4 % diluido);
con esto se demuestra su capacidad bactericida y fungicida en las condiciones
estudiadas. (7)

FUENTE 8

Objetivo General Evaluar la efectividad de los desinfectantes utilizados en el

proceso de limpieza y desinfección de áreas y equipos para la fabricación de
productos fitoterapéuticos en LABORATORIOS PRONABELL LTDA.
Objetivos Específicos

 Determinar el desempeño de los desinfectantes en uso, mediante la técnica

de coeficiente fenólico utilizando las concentraciones sugeridas por el
fabricante.
 Realizar el monitoreo microbiológico de los puntos críticos de control en
áreas y equipos destinados a la producción de fitoterapéuticos en
LABORATORIOS PRONABELL LTDA.
 Evaluar el tiempo de contacto en que deben estar los desinfectantes con las
superficies para que inhiban o eliminen a los microorganismos presentes.
 Evaluar estadísticamente los resultados obtenidos para proceder a realizar
modificaciones a los POEs , optimizando los procedimientos actuales.(8)

METODO

Se realizó la técnica del coeficiente fenólico descrito por la Association of Official

Analytical Chemists AOAC. Se prepararon tres (3) soluciones de la muestra: La que
recomendaba el fabricante, una más concentrada y una menos concentrada que la
recomendada. Se valoraron las muestras tomadas para los desinfectantes Tego 51,
Sumasol, Sanitizer y alcohol al 70%, después de 5, 10 y 15 minutos de exposición
y estos fueron comparados con el fenol respectivamente a diferentes
concentraciones (propuestas por la AOAC) según el microorganismo a evaluar. Las
suspensiones para cada microorganismo evaluado se prepararon a una
concentración correspondiente al tubo No. 1 del patrón de Mc Farland (AOAC,
2000). Cada prueba con cada desinfectante fue repetida 3 veces. Se tuvo como
controles, las cepas sin el desinfectante (control negativo) y el desinfectante solo
(control positivo).(8)

RESULTADOS.
Los resultados de la técnica del coeficiente fenólico mostraron que el desinfectante
SUMASOL, diluido a 1/100 en el laboratorio, fue efectivo para eliminar
microorganismos. Incluso a una concentración ligeramente más baja (1/90), logró
eliminar los microorganismos estudiados en 10 minutos. SUMASOL, un compuesto
de cloro, demostró ser un germicida potente con amplio espectro de acción. Por
otro lado, el desinfectante TEGO 51, con compuestos anfóteros y amonio
cuaternario, también mostró eficacia contra bacterias, esporas y hongos.
SANITIZER, similar a TEGO51, demostró buen desempeño a una dilución de 1/50.
El alcohol al 70% fue evaluado sin dilución y se encontró efectivo según la
concentración recomendada para su uso como desinfectante. Estos resultados
respaldan la eficacia de los desinfectantes evaluados en el estudio.este tipo de
Industrias. Este resultó ser un buen desinfectante para utensilios y equipos ya que
aunque no se pudo comparar con el fenol fue efectivo a partir de los 5 min de
exposición. Como el alcohol se encuentra diluido en agua su poder para denaturar
proteínas es mayor, que si se encontrara puro, además, el alcohol es capaz de
interferir en la síntesis te algunos metabolitos esenciales para la división celular. Es
por medio de estos mecanismos que el alcohol ejerce un efecto biocida frente a los
microorganismos con los que fue enfrentado. (ALDANA-SARASSA, 1999). (8)

FUENTE 9

Objetivo General. Evaluar el efecto bactericida de los desinfectantes en cepas

bacterianas ATCC y cepas aisladas del área de fabricación de productos estériles,
realizando las pruebas de dilución “in use” (AOAC Modificado), en condiciones
controladas del tiempo de acción y concentración del desinfectante en Laboratorios
Bagó de Bolivia S.A

 Objetivos Específicos. o Establecer los neutralizantes y concentraciones

adecuados para los diferentes tipos de desinfectantes.
 o Establecer la toxicidad del neutralizante para los diferentes tipos de
bacteria.
 o Verificar que las concentraciones de trabajo y tiempos de exposición de los
desinfectantes aplicados en ambientes de fabricación son eficaces.
 o Determinar la concentración de trabajo requerida y el tiempo de
exposición óptimo para cada desinfectante,
 o Determinar los desinfectantes que presentan la mayor eficacia bactericida
con respecto a la concentración y al tiempo de exposición.
 o Determinar que microorganismo es más resistente al ataque de los
desinfectantes. (9)

Método

La determinación de la actividad antimicrobiana propiamente tal, se efectuó de

acuerdo a la metodología recomendada por la AOAC, poniendo en contacto los
microorganismos en concentraciones de 108 ufc/ml con los productos en estudio,
en volúmenes iguales (3ml microorganismo y 3 ml del desinfectante) sacando
alícuotas de la suspensión de 100 ul. A los tiempos establecidos (2, 5, 10, 15 y 20
minutos) y efectuando el recuento de los microorganismos sobrevivientes. Este
recuento final y el recuento inicial de las cepas en la prueba de viabilidad, se realiza
en Agar Nutritivo con incubación a 37 ºC y 18 a 24 horas.(9)

Resultados.

A concentraciones altas de exposición las bacterias ensayadas, sufren una muerte

del 100 % a tiempos de exposición que van desde 1 a 5 minutos. La Pseudomonas
aeruginosa, no alcanza a los 99,996 % de eficacia bactericida a un tiempo de 5
minutos, con tres de cinco desinfectantes. Siendo esta la única cepa que presenta
supervivencia al ataque del TEGO 51, TIMEROSAL y ALCOHOL. Las cepas aisladas
del ambiente de fabricación son susceptibles al ataque de cuatro de cinco
desinfectantes ensayados, observándose que el TIMEROSAL a una concentración de
0,04 %, resulta ineficaz para realizar la limpieza de acorde a los estudios in vitro. A
concentraciones bajas de los desinfectantes (TEGO 51, Timerosal y Alcohol), existe
un tiempo inicial de muerte muy lento de las cepas enfrentadas. El Timerosal por
poseer características bacteriostáticas y el alcohol se consideran ineficientes para
realizar la sanitización, por presentar una reducción inadecuada de bacterias a un
tiempo de exposición superior a los 15 min, ya que se necesitaría grandes
concentraciones de Timerosal para alcanzar un efecto bactericida. Encontramos que
el Hipoclorito de sodio es capaz de eliminar la mayoría de las cepas bacterianas en
un corto periodo de tiempo y a una concentración de hasta 0.08%.(ver foto Nº 5),
determinando que es un buen desinfectante. (9)
FUENTE 10
Los objetivos generales planteados en este trabajo fue estudiar la eficacia y el
efecto residual de diferentes productos desinfectantes sobre superficies de acero
inoxidable.

METODO
Los ensayos se realizaron a una temperatura entre 18 ºC y 25 ºC. Se colocaron 4
superficies de ensayo en posición horizontal, inoculando 50 μl de la suspensión
bacteriana de ensayo a cada una de las superficies de los discos y permitiendo que
el inóculo se distribuyera lo más homogéneamente posible. Las superficies
inoculadas se secaron en una estufa a 37 ºC, retirándolas cuando estuvieron
visiblemente secas (45 ± 5 minutos) y dejando que se equilibraran a temperatura
ambiente. Se agregaron 100 μl de los productos desinfectantes de ensayo a 3
superficies con el inóculo bacteriano seco, asegurando que quedaran totalmente
cubiertos. Para el control de agua, se agregaron 100 μl de agua dura sobre otra
superficie. Después de 5 minutos de acción de los productos desinfectantes y el
agua dura en las diferentes superficies, estás se transfirieron de forma invertidas a
las caras inoculadas a placas de Petri de 50 mm de diámetro y 23 mm de altura
(Esterilin®) que contenían 10 ml de neutralizante (apartado 4.1.4.1) y 3,5 g de
perlas de vidrio de 2,0 mm de diámetro.
Para el ensayo del desinfectante y el control de agua, después de un tiempo de
neutralización de 5 minutos ± 10 segundos, se prepararon diluciones decimales de
10-0, 10-1 y 10-2 para cada uno de los ensayos del desinfectante y de 10-3 a10-6
para el control de agua. Se tomaron 1,0 ml de cada concentración por duplicado y
se procedió a sembrar en placas Petri, en medio agar TSA, incubándolas por un
tiempo de entre 24 y 48 horas a 37 ºC.(10)

Resultados.

Los productos desinfectantes que mostraron actividad bactericida igual o superior a

4 log10 al 100% de concentración de estudio fueron el P3, el P5 y el P6. El
producto P3 con una actividad bactericida de 5,77 log10, está compuesto de 0,25%
de peróxido de hidrógeno y 0,25% de cloruro de benzalconio. El P5 y el P6 están
compuestos a base de 0,50% y 1,0% de peróxido de hidrógeno, respectivamente,
tensoactivos no iónicos (1,0%), propionato de N,N-didecil-N-metil-polioxietil
amonio al 0,20% (polímero catiónico) y alcohol etílico al 5,0% (tabla 8). La
actividad bactericida más elevada fue para el producto P5 con un valor de 6,72
log10. Los productos que no presentaron actividad bactericida en esta
concentración de estudio para S. aureus fueron el P1, P2, P4 y P7. Los resultados
de la actividad bactericida al 50% de concentración de estudio, mostraron que los
productos P3 y P6 presentaron unos valores de 4,77 log10 y 4,99 log10,
respectivamente; mientras que en esta misma concentración, el producto P5 no
conservó la actividad bactericida superior a 4 log10, que sí se observó en este
producto al 100% de concentración. En la concentración del 25% para S. aureus,
los productos a base de peróxido de hidrógeno no mostraron actividad bactericida.
Los ensayos empleando peróxido de hidrógeno como único componente en los
productos P1 (1,0% de H2O2) y P2 (2,0% de H2O2), no presentaron actividad
bactericida frente a Staphylococcus aureus en ninguna de sus concentraciones de
ensayo. Así también, los productos P4 y P7, al igual que en las concentraciones del
100% y 50%, tampoco presentaron actividad bactericida al 25% de concentración.
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