Prueba ELISA

Descripción técnica

ELISA (Prueba por Inmunoabsorción Ligado a

Enzimas) usa anticuerpos ligados a enzimas a fin de
detectar y medir la cantidad de una sustancia en una
solución, como el suero.

En la etapa final, se produce una reacción

enzimática que causa un cambio de color que puede
leerse mediante el uso de una máquina especial.

Tipos de ELISA

ELISA Directo
ELISA Indirecto
ELISA Sandwich
ELISA de antigeno marcado
ELISA competitvo

Materiales
→Las pipetas: se utilizan para transferir un volumen definido con
precisión de una solución a los pocillos de la placa de
microtitulación.

→ Bandejas con Pequeños Pozos: es el recipiente en el que se

realizara la técnica.

→ La lavadora ELISA: sirve para lavar placas de microtitulación.

Después de cada paso de incubación (excepto la incubación con el
sustrato), la placa ELISA debe lavarse con tampón de lavado.

→ El lector de ELISA: es un espectrofotómetro que permite medir la

densidad óptica y calcular la concentración de una muestra.

→Computadora con un software de evaluación.

Procedimiento

Enfermedades que puede • Se deposita la muestra en bandejas

con pequeños pozos.
diagnosticar
• Una vez depositada la muestra se
añaden los anticuerpos que detectan
los antígenos

• Si es un ELISA indirecto se pueden

✓ VIH (el virus que causa el SIDA) añadir otros anticuerpos que detecten
✓ Enfermedad de Lyme los anticuerpos previos; así se amplía la
✓ Anemia perniciosa señal.
✓ Rickettsiosis exantemática de Ricketts
✓ Rotavirus • Se realiza un lavado de los pocillos;
✓ Carcinoma escamoso así se eliminan los anticuerpos que no
✓ Sífilis estén unidos a antígenos.
✓ Toxoplasmosis
✓ Virus varicela zóster (que causa • Se añade un sustrato, es decir, una
varicela y culebrilla
✓ Actualmente el Covid-19 sustancia química que reacciona con
las enzimas de los anticuerpos que
queden. Al reaccionar se forman
metabolitos.

• Por último, se mide la cantidad de

metabolito que hay mediante diferentes
técnicas, como la espectrofotometría.