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Monografia de Banco de Sangre

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UNIVERSIDAD PERUANA LOS ANDES

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA PROFESIONAL DE TECNOLOGIA MÉDICA
ESPECIALIDAD DE: LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGICA

BANCO DE SANGRE Y NAT
UNIDAD DE EJECUCIONCURRICULAR: AUTOMATIZACIÓN EN LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGICA. DOCENTE: Lic. Andrés CANDELA ALUMNOS:

- GORA RAPRI, Cristhian Alin. - TORRES GARCIA, Scarlett Maziel.

HUANCAYO 2012-I

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PRESENTACIÓN
En la presente monografía consta de tres fases bien definidas: 1. Exposición de la teoría clara y concreta manejada en un laboratorio clínico en la unidad de banco de sangre 2. Factores predeterminados con la donación de sangre. 3. El sistema NAT. Con el fin de lograr el aprendizaje y la comprensión de conceptos como: el banco de sangre es cualquier organización dedicada a recolectar, almacenar, procesar y/o suministrar sangre humana para analizar las muestras recolectadas y separar a la sangre en sus componentes. Conocer aspectos referentes a la sangre que indispensable para vivir. Su papel es tan esencial que la disminución de su volumen o la alteración de alguna de sus funciones pueden poner en peligro la supervivencia del organismo; es decir, la sangre es sinónimo de vida porque no existe vida sin ella. Es imprescindible aportar al accidentado o al enfermo los elementos que le falten y recuperar la función alterada. Esta operación se denomina transfusión sanguínea. La donación de sangre, gesto generoso y desinteresado, es hoy por hoy, la única forma de salvar la vida o recuperar la salud para cualquier persona que sufra un déficit de componentes sanguíneos. Regulado por un sistema llamado

PRONAHEBAS el cual establece “… su responsable, tanto en el ámbito
público como privado, debe ser un médico especialista en hematología…” Hablaremos un capítulo sobre las técnicas de amplificación de ácidos nucleicos (NAAT) son fundamentales para las pruebas de ADN molecular, incluyendo el diagnostico clínico, pruebas ambientales, pruebas de alimentos y muchas otras aplicaciones.

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sistema de aféresis (métodos tradicionales y NAT) y almacenamiento de los derivados de la sangre. La Gerencia Ejecutiva de los Servicios de Banco de Sangre asegurará que la política de calidad sea conocida. en la transfusión de sangre y sus componentes y en la entrega de servicios (los que en este documento serán referidos como recolección. en las pruebas del receptor. en el almacenamiento de sangre. en el procesamiento de sangre. implementada y mantenida por todos los niveles de los Servicios.BANCO DE SANGRE Y NAT I. 3 . comprendida. en la distribución de sangre.La política de calidad describirá los objetivos de calidad de los Servicios de Banco de Sangre y su compromiso con dicha calidad. y servicios). La Gerencia Ejecutiva designará un Comité de Calidad. donación de sangre. en la recolección de sangre. procesamiento y transfusión de sangre y componentes sanguíneos. OBJETIVOS: Determinar e identificar la automatización en el banco de sangre. II. que definirá y documentará la política para que los Servicios de Banco de Sangre alcancen y mantengan calidad en la selección del donante. MARCO TEÓRICO: La Gerencia Ejecutiva de los Servicios de Banco de Sangre se reconoce como la máxima autoridad institucional.

procesar. FUNCION DEL BANCO DE SANGRE La función del banco de sangre es determinar quién es el donador ideal y detectar las unidades infectantes.III. Los actos de disposición de sangre y sus componentes para fines de transfusión autóloga. almacenar y distribuir la sangre y sus componentes. así como para analizar y conservar. DISPOSICIONES GENERALES Los disponentes alogénicos de sangre y de sus componentes podrán corresponder a las categorías siguientes:  Altruista. podrán llevarse a cabo mediante los procedimientos siguientes:    depósito previo hemodilución preoperatoria aguda escate celular transoperatorio y posoperatorio. DEFINICION: Es el establecimiento autorizado para obtener. V. VI.  familiar. ESQUEMATIZACIÓN EN BANCO DE SANGRE 1. conservar. recolectar. IV. ETAPA PRE-ANALITICA: Comprende de las pruebas preliminares donante-paciente 4 . aplicar y proveer componentes de la misma. Comprende :    donación de sangre sistema de aféresis almacenamiento de los derivados de la sangre 2. Tambien es el encargado de recibir a los donantes. aplicar y proveer sangre humana.

No eres candidato ideal SI: • • • • • • • • • • hace tres días tuviste fiebre. • • • Es candidato ideal para donar sangre si: eres mayor de 18 años pesas por lo menos 50 kg cuentas con buen estado de salud. diabetes y recibes insulina. tuvieron contacto con homosexuales. tomaste medicinas. SELECCION DEL DONADOR 3. alta o baja presión no controlada. desconocidos o sexo servidoras has recibido quimioterapia para el tratamiento del cáncer 5 .PRONAHEBAS (Programa Nacional de Hemoterapia y Banco de Sangre)      Donante voluntario Donante reposición Donante remunerado Donante autóloga Paciente hemodependiente 3. fiebre y orina oscura si tu o tu pareja recibieron sangre.2. moretes o sangrados espontáneos. alcohol o tuviste tu sangrado menstrual hace 45 días donaste sangre hace 6 meses te operaron o estuviste embarazada padeces ataques. problemas del corazón. 3.1. alergias graves o una infección actual has tenido enfermedades venéreas usaste o usas drogas tuviste hepatitis has tenido los ojos amarillos. infección.

los métodos manuales. mediante la separación inicial de plasma rico en plaquetas.4. 6 . Para la separación de las plaquetas se pueden utilizar el metodo de obtención de buffy-coat o bien. PRINCIPIOS UTILIZADOS EN BANCO DE SANGRE Tradicionalmente se han utilizado para el fraccionamiento de la sangre. un concentrado eritrocitaria. que tienen como base la centrifugación diferencial. pero tienen además la ventaja de lograr la estandarización de los procesos con mayor facilidad. En los años resientes se han usado métodos semiautomatizados mediante los cuales se pueden obtener a partir de una sangre total. En la medida en que los métodos tienden a ser semiautomatizados o automatizados se ahorran recursos. esto se debe a que los equipos realizan algunas etapas en las cuales se limita la intervención de los operarios y como consecuencia se reduce la variación en el procedimiento. la cual se sustenta en los diferentes pesos específicos de los componentes de la sangre. un concentrado plaquetario y plasma rico en factores de la coagulación.

7 .Otro avance importante en el enfoque de la seguridad transfusional es la implementación de los métodos de leucorreduccion para la hemocomponentes. durante la separación de los elementos celulares sanguíneos. Con ellos se reducen la posibilidad de sensibilizar. La unidad sanguínea a transfundir deberá contener menos de 5 x 1000000 leucocitos por unidad de acuerdo a los estándares de asociación americana de sangre (AABB). ya sea durante su obtención ( filtros en línea) o bien con el uso de filtros a pie de cama (filtros postalmacenamiento) con frecuencia las plaquetas obtenidas por una maquina de aféresis de última generación son leucorreducidas desde su obtención. Por ejemplo: Para las plaquetas que se optiene a partir de una mezcla de concentrados plaquetario unitarios (pool) se pueden considerar leucorreducidas cuando se han sometido a leucorreduccion.

1 AFÉRESIS PARA HEMOTERAPIA Y BANCO DE SANGRE La palabra aféresis deriva del griego que significa remover o separar. PRUEBAS PRETRANSFUSIONALES Son los procedimientos realizados por los servicios de transfusión o los bancos de sangre. donadores de repetición. previos a la transfusión con el fin de asegurar la selección adecuada de la unidad de sangre o los componentes a transfundirse. 5.1. 5. VENTAJAS DE LA AFÉRESIS Las dosis terapéuticas de plaquetas se obtiene de un solo donador (3x 1011). y retornar al donador o paciente el resto de los componentes sanguíneos. 5 días de vigencia de las plaquetas. COMPONENTES DE LOS EQUIPOS DE AFÉRESIS Y SEPARADORES SANGUÍNEOS       centrifugas (flujo continuo y discontinuo) bombas peristálticas sistema óptico. recuperación del donador alas 72 hrs. 5. Panel monitor (operador) Cámaras/ campanas/ cinturón de recolección y separación. se obtiene dobles concentrados eritrocitaria. Válvulas-sensores de presión y volumen. 5. tiempo. TIPOS DE AFÉRESIS En función de los elementos sanguíneos extraídos:      plaquetoferesis plasmaferesis eritrocitaferesis leucaferesis (granulocitos y linfocitos) recolección de células tallo. Separar de manera selectiva el componente sanguíneo que se desea.1. es un producto leucorreducidas.5. se disminuye el riesgo de aloinmunizacion y el riesgo de enfermedades infecciosas. La aféresis terapéutica se refiere a extracción de elementos patológicos.1. promedio de donación 90 minutos y son productos de alta calidad. (menos de 1x106).3..1. 8 .2.

PRUEBA DE COOMBS Es una prueba que busca anticuerpos que puedan fijarse a los glóbulos rojos y causar su destrucción prematura (hemólisis). el médico introduce suavemente una aguja en la vena y recoge la sangre en un frasco hermético o en un tubo pegado a la aguja. Luego. El médico envuelve una banda elástica alrededor de la parte superior del brazo con el fin de aplicar presión en el área y hacer que la vena se llene de sangre.2. El sitio se limpia con un desinfectante (antiséptico). Una vez que se ha recogido la muestra de sangre. 5. 9 .ANEXOS: equipo estéril desechable (bolsas. FORMA EN QUE SE REALIZA EL EXAMEN La sangre se extrae típicamente de una vena.) 5. etc. soluciones.2. por lo general de la parte interior del codo o del dorso de la mano. se retira la aguja y se cubre el sitio de punción para detener cualquier sangrado.1. La banda elástica se retira del brazo.

en un portaobjetos o en una tira reactiva.2.2. metildopa y procainamida) pueden llevar a la producción de estos anticuerpos. Finalmente.4. 10 . se puede colocar un vendaje sobre el área si hay algún sangrado.2. La sangre se recoge en un tubo pequeño de vidrio llamado pipeta. algunas personas sienten un dolor moderado.2. PREPARACIÓN PARA EL EXAMEN No se requiere preparación especial para este examen. se puede utilizar un instrumento puntiagudo llamado lanceta para punzar la piel y hacerla sangrar.2. con más frecuencia. LA PRUEBA DE COOMBS DIRECTA Se utiliza para detectar anticuerpos que ya se han fijado a la superficie de los glóbulos rojos. LO QUE SE SIENTE DURANTE EL EXAMEN Cuando se inserta la aguja para extraer la sangre.1. mientras que otras sólo sienten un pinchazo o sensación punzante. LA PRUEBA DE COOMBS INDIRECTA Busca anticuerpos circulantes libres contra una serie de glóbulos rojos estandarizados. se utiliza para determinar si una persona podría tener o no una reacción a una transfusión de sangre. 5. 5. Esta prueba algunas veces se lleva a cabo para diagnosticar la causa de anemia o ictericia.En bebés o en niños pequeños.2.4. 5. Esta prueba indirecta sólo se usa rara vez para diagnosticar una afección médica y. Muchas enfermedades y fármacos (quinidina. RAZONES POR LAS QUE SE REALIZA EL EXAMEN Hay dos formas de realizar la prueba de Coombs: directa e indirecta. 5.4. 5. Estos anticuerpos algunas veces destruyen los glóbulos rojos y causan anemia. puede haber una sensación pulsátil o se puede presentar una contusión en el sitio donde se insertó la aguja. Posteriormente.2.3.

Hasta el 3% de las personas que están hospitalizadas sin un trastorno sanguíneo conocido tendrán un resultado anormal en la prueba de Coombs directa. Los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre diferentes laboratorios. Esto puede sugerir la presencia de:    Anemia hemolítica autoinmunitaria o inducida por fármacos Eritroblastosis fetal (enfermedad hemolítica) Incompatibilidad sanguínea (cuando se utiliza en bancos de sangre) 11 .2. Una prueba de Coombs indirecta anormal (positiva) significa que usted tiene anticuerpos que actuarán contra los glóbulos rojos que el cuerpo asume como extraños.5 VALORES NORMALES La falta de agrupación de células (aglutinación). indicando que no hay anticuerpos para los glóbulos rojos.6. 5.2. especialmente entre los ancianos. lo cual puede deberse a:      Anemia hemolítica autoinmunitaria sin otra causa Anemia hemolítica inducida por fármacos (muchos fármacos han sido asociados con esta complicación) Eritroblastosis fetal (enfermedad hemolítica del recién nacido) Sífilis Reacción a transfusión como la ocasionada por unidades de sangre cotejadas de manera impropia Esta prueba también es anormal en algunas personas sin una causa clara. SIGNIFICADO DE LOS RESULTADOS ANORMALES Una prueba de Coombs directa anormal (positiva) significa que usted tiene anticuerpos que actúan contra sus glóbulos rojos.5. Hable con el médico acerca del significado de los resultados específicos de su examen. es lo normal.

5.2.1.3. pero pueden ser:     Sangrado excesivo Desmayo o sensación de mareo Hematoma (acumulación de sangre debajo de la piel) Infección (un riesgo leve cada vez que se presenta ruptura de la piel) 5. DONACIÓN:  Donantes “universales”: Son los que tiene el grupo O negativo.1. rutinariamente se empleará la prueba de antiglobulina humana (prueba de Coombs). Sus glóbulos rojos no tienen antígenos por lo que los anticuerpos del receptor no pueden reaccionar. en algún medio facilitador de la reacción. CUÁLES SON LOS RIESGOS Las venas y las arterias varían en tamaño de un paciente a otro y de un lado del cuerpo a otro. LAS CONTROLES EN LA PRUEBA: Laspruebascruzadasdeberánincluiruncontrolquepermitadetectarlapresenciadeauto anticuerpos. así como.5. Incluirán pruebas de aglutinación en medio salino. por esta razón.1. 12 . PRUEBAS CRUZADAS Es una prueba inmunohematologica cuyo principio es la hemaglutinación y su objetivo es evitar la destrucción intravascular de los hematíes en un receptor.3.7. 5. pudiéndose omitir cuando se tenga certeza que el receptor y el disponente carezcan de antecedentes propiciadores de aloinmunizacion.3. puede ser más difícil obtener una muestra de sangre de algunas personas que de otras. Otros riesgos asociados con la extracción de sangre son leves.

Estas personas no poseen anticuerpos por lo que no rechazan la sangre trasfundida. 13 . Receptor “universal”: Son las personas que tienen el grupo AB.

una mezcla de anti-A y anti-B. una de anti-B. 2. previa desinfección con alcohol o agua oxigenada. y una gota de anti-D. cada una en su casilla correspondiente. Depositar una gotita de sangre en cada casilla y mezclar con los sueros.5. 14 . Pinchar la yema del dedo.4. DETERMINACION DEL GRUPO AOB 1. Colocar en la tarjeta una gota se suero anti-A.

SUERO ANTI-A y ANTI-B. entonces usted tiene sangre tipo AB. mecánicos y se pueden automatizar. usted tiene sangre tipo B. Los procesos son totalmente controlados. SUERO ANTI-B. Tipificación ABO: Si sus glóbulos sanguíneos se pegan o aglutinan al mezclarse con:     Suero ANTI-B. usted tiene sangre TIPO O. Si los glóbulos sanguíneos no se pegan o aglutinan cuando se agrega suero ANTI-A Y ANTI-B.Observar el resultado e interpretar. usted tiene sangre tipo A. para ello se desarrollo la siguiente técnica: 15 .

Los eritrocitos van perdiendo elasticidad en sus membranas de forma que aglutinados grandes quedan atrapados en la zona superior y los pequeños quedan distribuidos a lo largo de la columna. Esta técnica nos permite que estandaricemos la lectura de la reacción antígenoanticuerpo con facilidad y repetitividad. Así como la estandariza del uso de reactivos. tiempos y lecturas disminuyendo sustancialmente la influencia de la mano del operador. Es de tecnología de microtipificacion en gel se basa en la separación por tamaño de los eritrocitos aglutinados.5. durante un proceso de centrifugación en un gel poroso. DG Gel® ABO/Rh (2D) Tarjeta de gel para la determinación de los antígenos del sistema ABO. Rh (D) y determinación de grupo sérico. DETERMINACIÓN DEL GRUPO SANGUÍNEO CON TARJETAS DE GEL El sistema utilizado en inmunohematologia para investigar e identificar antígenos y anticuerpos antieritrocitarios.5.5. 5. Cada tarjeta consta de 8 micropozos que contienen una solución de gel con: 16 .1.

La documentación fotográfica de los resultados obtenidos puede ser utilizada como instrumento legal o de consulta. Es una microtécnica con una macrolectura.Anti-D monoclonal (clon P3x61) El reactivo Anti-D. 17 .Anti-B monoclonal (clon 9621 A8). incluyendo la variante DVI. mezcla de monoclonales. . por ser las reacciones microscópicas y fijadas sobre el gel. detecta D débiles y variantes parciales del antígeno D. Fenotipo de Rh Grupo sanguíneo neonatal.    Los procesos son totalmente controlados y se pueden automatizar.5. Rastreo de anticuerpos irregulares. Coombs directo. La metodología es simple y estandarizada para todas las reacciones.Anti-A monoclonal (clones 16243 G2 y 16247 E6) .3. 16247 E6 y 7821 D9) .5..Anti-AB monoclonal (clones 16245 F11 D8. La lectura de los resultados es fácil. QUE PRUEBAS SE PUEDEN REALIZAR EN TARJETAS DE GEL. Identificación de anticuerpos irregulares.        Grupo sanguíneo ABO directo e inverso y factor Rh Pruebas de compatibilidad sanguínea.     5.2.Con solución tamponada de gel para realizar grupo inverso 5. . Se reduce el nùmero de manipulaciones aumentando la bioseguridad del operador. Hay trazabilidad desde el inicio de la prueba hasta la obtención del resultado.Con solución tamponada de gel para realizar el control (ctl) . VENTAJAS SOBRE LA METODOLOGÍA TRADICIONAL.

SANGRE TOTAL Unidad de sangre extraída con un anticoagulante y bolsa autorizados y no fraccionada. Durante la conservación a 4 ºC las plaquetas y leucocitos dejan de ser funcionantes al cabo de pocas horas después de la extracción.5. como el plasma. OTRAS PRUEBAS: • • • 5. concentrado de eritrocitos.6.7. 5. Son las fracciones separadas de una unidad de sangre.2. Los hematies conservados durante 5 semanas en CPD-A presentan una recuperación media del 70%. la recuperación mínima aceptable.7. Conservación: La sangre total puede ser almacenada refrigerada entre 21 y 35 días dependiendo de la solución conservante anticoagulante-utilizada. La tasa de Factor VIII experimenta una disminución del 50% a las 24 horas de la extracción y el factor V queda reducido al 50% a lo 10-14 días. Los niveles de factores V y VIII también descienden. plaquetas y factor VIII. y se produce una reducción gradual de la viabilidad de los hematies. Pruebas antiparasitarias Prueba de determinación de anticuerpos Prueba de ELISA HEMODERIVADOS Componentes de la sangre. 18 . Contenido: Una unidad de sangre total (ST) contiene 450 mL de sangre más aproximadamente 63 mL de solución anticoagulante-conservadora.1.7. albúmina. gammaglobulina. con lo que su volumen final está en torno a los 500 mL 5.

4.7.5. que típicamente es de +16 °C a +20°C.7. 5.3.  Puerta delantera de cristal u otro material que permita al usuario ver el contenido de la cámara sin que ello afecte a la temperatura y cajones o estantes con correderas para depositar la sangre. Conservación: Cuando la sangre se recoge en bolsa que contienen CPD-A. más unos 100 mL de plasma residual. El refrigerante se aloja en una doble bolsa sellada La refrigeración más eficaz se produce cuando la bolsa de refrigerante se halla en contacto directo con la unidad de sangre o de plaquetas. Contenido: Contiene los hematies correspondientes a una unidad de sangre total.  Un ventilador de refrigeración  Dispositivos de vigilancia de la temperatura.7.3 REFRIGERADORAS: Las refrigeradoras del banco de sangre presentan las siguientes características de diseño fundamentales:  Autonomía frigorífica: capacidad de mantener la temperatura entre +2 °C y +6 °C si hay corte de fluido. Son el componente sanguíneo más frecuentemente usado para incrementar la masa de células rojas 5.7. estos concentrados pueden conservarse durante 35 días a 4 ºC. 5. 5.3.1.2.  Revestimiento interior de la cámara resistente a los arañazos (acero inoxidable y aluminio).3.3.3. 19 .7. REFRIGERADORES PORTÁTILES PARA EL TRANSPORTE SANGRE Y LÍQUIDOS REFRIGERANTES   DE   Deben contener bloques refrigerantes El refrigerante es una solución eutéctica que tiene una gran capacidad termo energético y una gran estabilidad a su temperatura de cambio de estado. CONCENTRADOS DE HEMATIES: Componente obtenido tras la extracción de aproximadamente 200 mL de plasma de una unidad de sangre total después por centrifugación.

4 AGITADOR DE EXTRACCIÓN AUTOMÁTICA CON BALANZE  Agitador de extracción y balanza digital con corte por volumen que permite la automatización de las donaciones en bancos de sangre con el control y seguridad en el proceso Función: mezclar la sangre total extraída con el anticoagulante presente en la bolsa. La mayoría de las reacciones provocadas por anticuerpos anti leucocitos dependen de la cifra de éstos. entre las cuales destacan: 20 .7.   5. La denominación "hematies pobres en leucocitos" se aplica a aquellos concentrados preparados según un método que reduce el contenido de leucocitos en el componente final a una cifra inferior a 5 x 108. en muchos casos una reducción del 50 % del número de leucocitos en una unidad de hematies evitará la reacción. No obstante en algunos pacientes la eliminación de más del 95 % de los leucocitos puede no anular la respuesta febril.80 ºC. Dichas técnicas permiten periodos de conservación de hasta 10 años. la centrifugación.5. El nombre correcto para este componente es " hematies libres de leucocitos separados por (método utilizado)".3.7. 5. Posee una rotación continua y suave para evitar la lisis celular dentro de la bolsa de extracción. SANGRE DESLEUCOCITADA: Los pacientes que experimentan fuertes y/o reiteradas reacciones no hemolíticas febriles a causa de las transfusiones suelen mejorar cuando se les transfunde hematies pobres en leucocitos. y el lavado. reteniendo como mínimo el 80 % de los hematies originales. Entre los métodos para eliminar leucocitos se encuentra la filtración.5. Se trata de procedimientos caros. Indicaciones: Los hematies pueden ser congelados utilizando técnicas especiales de criopreservación. por tanto el uso de hematies congelados se recomienda en circunstancias especiales. por lo tanto. HEMATIES CONGELADOS: Hematies congelados preferentemente antes de los 7 días postextracción.4.7. utilizando crioprotector y conservados a temperatura inferior a .

en un volumen reducido de plasma (50-70 mL).7. CONTENIDO: Los concentrados de plaquetas contienen aproximadamente 6 x 109 plaquetas. ya que los congeladores suelen mantener una temperatura inferior a la coagulación durante más de 24 horas siempre que no se abra con frecuencia. El plasma con esta nueva denominación tiene 4 años más de vida útil si se conserva a -18º C o menos.7.   Autotransfusión individuos pertenecientes a grupos sanguíneos raros individuos con anticuerpos múltiples 5.6.2. 21 . debe considerarse a partir de entonces y etiquetarse como PLASMA. Si el PFC no se utiliza en el plazo de un año. CONCENTRADOS DE PLAQUETAS: Un concentrado de plaquetas corresponde a las plaquetas obtenidas de una unidad de sangre total por doble centrifugación. el nivel de Factor VIII puede haber disminuido en algunas unidades de tal manera que el plasma ya no sea óptimo para el tratamiento de pacientes con esta deficiencia. CONGELADORES DE PLASMA Los congeladores de plasma no precisan estar conectados a un generador eléctrico de reserva.6. 5. PLASMA FRESCO CONGELADO Se define como PFC el plasma separado de la sangre de un donante y congelado a una temperatura inferior a -18º C en las 8 horas siguientes a la extracción.7. Pasado este tiempo.6. procedimiento por el cual el donante sólo dona plaquetas. 5.1. lo que representa el 60-80 % de las contenidas en una unidad de sangre total. o bien a partir de donantes por medio de procesos de aféresis (plaquetoferesis). Conservación: Según la bolsa de plástico utilizada las plaquetas son viables durante 5 días o más si se mantienen a 22º C sometidas a una agitación horizontal constante 5. Si se almacena a -30º C (mejor que a -18º C) el PFC tiene un periodo de caducidad de 12 meses.3.7.6.

lo cual ayuda a mantener la temperatura por debajo de -35°C 5.Estos congeladores están especialmente diseñados para conservar el plasma.4.7. En un diseño ideal.6. cada estantería se puede abrir de forma independiente.5.  Es indispensable para la vigilancia del agitador una alarma que alerte de los fallos de movimiento.6. 5. o bien colocarse como unidad autónoma en una habitación climatizada a una temperatura de entre 20°C y 24°C.  El descongelador de plasma produce un plasma descongelado uniforme y de calidad para transfusiones y otros usos. están equipados con un mecanismo interno de refrigeración por ventilador que distribuye el aire de forma homogénea en el interior del equipo y entorno a los dispositivos de vigilancia de la temperatura. 22 . conservando así la temperatura. AGITADORES DE PLAQUETAS  Conservación de plaquetas a una temperatura de entre 20°C y 24°C  Las plaquetas deben mantenerse en agitación continua para que conserve su viabilidad y propiedad adhesión  El agitador de plaquetas puede encajarse en el interior de una incubadora que mantenga la temperatura deseada.  Se tarda unos 15 minutos en realizar la descongelación. tras abrir la puerta frontal. El aislamiento de estos equipos es más espeso que el de los congeladores domésticos convencionales. DESCONGELADORES DE PLASMA  Un descongelador de plasma consiste fundamentalmente en un baño a 37°C o bien dirigiendo un chorro de agua caliente hacia la unidad de plasma.7. de -30°C a 0°C.

La aplicación de ambas metodologías contribuye a aumentar la seguridad transfusional.  COBAS AmpliScreen (Roche) Diagnostics Metodología empleada: PCR (Reacción en cadena de la Polimerasa) 23 . La tecnología NAT es utilizada como complemento a los ensayos de detección serológica. para la reducción del riesgo de transmisión. de gran valor en Bancos de Sangre. pero es la tecnología de detección de ácidos nucleicos (NAT) la que nos permite acercarnos al buscado “riesgo cero”. El riesgo de transmisión de los virus de mayor relevancia clínica VIH y VHC (hepatitis C) a través de la sangre es muy bajo con los análisis serológicos realizados habitualmente en los bancos de sangre. permite la amplificación y detección directa de ácidos nucleicos virales. denominado “análisis de ácidos nucleicos” (NAT. y de este modo se evita el contagio a través de transfusiones. B. por sus siglas en inglés) permite detectar incluso las infecciones más recientes por virus de sida o hepatitis B y C.VII. C. CONCEPTOS: Este sistema. En muestras de donantes de sangre voluntarios.NAT A. gracias a la detección directa de los virus en el período de ventana serológico. DEFINICION Nucleic Acid Amplification Technology. entre otros. TECNICAS  CEQUIMAP : Desarrollo un método cualitativo directo basado en la técnica de transcripción reversa acoplada a la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR en tiempo real) que permite identificar la presencia de los ARNs específicos correspondientes a los virus de VIH-1 y VHC.

DENATURACION 3. AMPLIFICACION 2. CONJUGACION 5. HIBRIDACION 4.1. CATALIZIS DEL SUBSTRATO 24 .

Todas las muestras reactivas fueron luego confirmadas serológicamente. El material de partida es plasma. en la segunda la enzima transcriptasa reversa sintetiza ADN complementario (cADN) utilizando como molde ARN. de los cuales 6 fueron reactivos para VIH-1 y 4 para VHC. La realización de cada ensayo incluye controles que son analizados en paralelo con las muestras y que nos permiten establecer la validez de los resultados obtenidos y monitorear todo el proceso. inhibiciones y posibles errores. RESULTADOS OPTENIDOS E INTERPRETAR: Se analizaron 1362 mini-pooles de muestras de donantes.D. identificando cual era la muestra positiva. Luego se realizó el análisis individual de las 6 muestras que componían cada mini-pool. en la primera se purifica el ARN viral. En la tercera y última etapa los procesos de amplificación y detección ocurren de manera simultánea (PCR en tiempo real). detectando contaminaciones. Los oligonucleótidos y sondas de VIH y VHC fueron diseñados para amplificar regiones conservadas del genoma viral que nos permiten detectar diferentes genotipos de los virus de interés. MATERIALES Y MÉTODOS: El método NAT desarrollado consta de tres etapas. que se analiza en minipooles de 6 o de manera individual. E. 25 .

26 . Hasta el momento tras analizar 8171 donaciones no hemos detectado ningún donante en período ventana. con el objeto de disminuir el período de ventana serológico. Este resultado no es sorprendente ya que en EEUU tras analizar 40 millones de donaciones empleando las pruebas NAT para VIH y VHC. como en obtención de los resultados en tiempo útil.diagonosticar y mejorar la calidad de vida. especificidad y robustez. procesan y distribuyen los componentes sanguíneos para el tratamiento de los pacientes que los necesiten. el rendimiento de las mismas es de: 1 caso cada 3 millones de donaciones para VIH y 1 caso cada 270000 donaciones para VHC.CONCLUSIONES El banco de sangre en un laboratorio clínico cumple un rol importante para prevenir.tratar. •Métodos de inactivación viral. Es por ello que CEQUIMAP y el Banco de Sangre de la UNC decidieron emprender el desarrollo de un método NAT para la detección de los virus de VIH-1 y VHC. •Aparición de métodos de tamizajemas sensibles. •Incorporación de sistemas de control de calidad de procesos. Seguridad Transfusional •Mejoramiento en la selección de donantes. Consideramos que nuestro método ha tenido un desempeño adecuado tanto en sensibilidad. y para la detección de múltiples enfermedades se realizara un montón de métodos en caso de los virus que poseen ácidos nucleicos para su identificación se utilizara un metodo avanzado llamado NAT: La seguridad transfusional constituye la principal preocupación de los Bancos de Sangre que colectan. usando herramientas que por el pasar del tiempo e lograron ser automatizadas sobre todo su papel desempeñara en la parte pre-analítica antes de cualquier hemoterapia o transfusión sanguínea.

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