métodos de

extracción de
ADN a partir de
restos óseos en
el laboratorio
forense
 introducción
En los laboratorios forenses se busca realizar los
llamados exámenes "Post-Mortem

Estos se realizan en tejidos corporales, sangre u

otros que se pueden recolectar en autopsias,
exhumaciones, en la escena de un crimen.

Suelen se procesos complejos que involucran

equipos multidisciplinarios como especialistas en
medicina forense, odontología forense, genética
forense o dactloscopía.
Se hace necesario además comparaciones de perfil
de ADN o uso de muestras "Antemortem".
01
MUESTRAS MÁS ADECUADAS
PARA LA OBTENCIÓN DE ADN A
PARTIR DE ESTRUCTURAS
ESQUELÉTICAS
 Numerosos estudios señalan
que el material genético se
degrada rápidamente en
tejidos blandos que en
huesos.

En el estudio de Milós se
registraron 25 361 huesos y
dientes de restos recuperados de
fosas comunes en la antigua
Yugoslavia.
02
FACTORES QUE INFLUYEN
EN LA PRESERVACIÓN DEL
ADN
 1. LA TEMPERATURA 2. LA HUMEDAD

factores
4. LOS COMPUESTOS DEL SUELO 3. UN PH NEUTRO

cuarzo

feldespato
03
PROBLEMAS
METODOLÓGICOS EN LA
OBTENCIÓN DE ADN A
PARTIR DE RESTOS
ÓSEOS
 LA ESCASEZ Y
FRAGMENTACIÓN DE LAS
CADENAS DE ADN

DIFICULTADES

LA PRESENCIA DE
LAS MODIFICACIONES INHIBIDORES DE LA PCR
MOLECULARES EN LOS EXTRACTOS
04 PROCESO DE
EXTRACCIÓN DE ADN A
PARTIR DE
ESTRUCTURAS ÓSEAS

Protocolo
«Fenol:cloroformo»
que se basa en la extracción
de ADN mediante la digestión
de las muestras con
proteinasa K y un detergente
para romper las membranas
celulares.
PROTOCOLOS
Protocolo «Silica-sal»
se añade una solución de
extracción al polvo de hueso
o diente, seguido de una
solución de unión que
contiene tiocianato de
guanidinio y cloruro o acetato
sódico.
Protocolo
«Desmineralización-silica»
se realiza una digestión
completa de la matriz ósea
mediante una solución de
desmineralización que
incluye EDTA, N-
laurilsarcosinato sódico y
proteinasa K.
Protocolo «Fishing»
(purificación)
la muestra se somete a una
extracción inicial con un tampón
estándar, seguido de una serie
de pasos que incluyen la unión y
lavado repetitivo del ADN
utilizando partículas magnéticas
recubiertas de estreptavidina.
05
VALORACIÓN FINAL DE
LOS MÉTODOS DE
EXTRACCIÓN DE ADN
CONSIDERADOS
Estos métodos de extracción de ADN. en resumen
presentan algunas limitaciones o ventajas según la
condición de la muestra.

Factores Limitantes:
Degradación, modificación del ADN, presencia de inhibidores de la PCR.

Los métodos de Silica Sal y Fenol:Cloroformo tienen a su vez distintas

situaciones en como aplicarse

La estrategia propuesta sería una mezcla de ambos métodos.

 Imágenes capturadas por científicos
británicos para la revista "Nature
Communications" en 2021.

FOTOGRAFÍA DE LABORATORIO
¡GRACIAS!