En SFC se emplean tanto las columnas
abiertas como las columnas rellenas, aunque
las primeras son las más empleadas. Las
columnas abiertas son similares a las
columnas de sílice fundida con
recubrimientos internos de varios tipos de
siloxanos enlazados y de enlaces cruzados.
Las columnas tienen una longitud de 10 a 20
m y un diámetro interno de 0,05 a 0.10 mm.
El espesor de la película varía entre 0.05 1
micrómetro
Fase estacionaria
La temperatura crítica de una sustancia es la
temperatura por encima de la cual no puede
existir en la fase líquida independientemente de
la presión. La presión crítica es la presión de
Fase móvil
presiones por encima de su temperatura y de
su presión crítica (punto crítico) se denomina
Es un disolvente excelente par un conjunto de
moléculas orgánicas no polares.
vapor de una sustancia a su temperatura
crítica. Una sustancia a temperaturas y
fluido supercrítico.
Mediante esta modificación, se tienen
separaciones que dependen de factores como
tamaño de partícula de la resina, forma iónica e
incluso distribución de isómeros. Esto permite
separar especies que de otra forma eluirían al
mismo tiempo. Las separaciones se llevan a
cabo en resinas de intercambio con base en
poliestireno de alta capacidad como eluyentes,
ácidos minerales diluidos.
El fundamento de la técnica consiste en
depositar sobre un medio poroso una mezcla
de especies cargadas. Por aplicación de un
campo eléctrico entre los extremos del soporte
poroso las especies se separan en función de
sus cargas y su movilidad iónica en ese medio.
Cromatografía de fluidos super críticos
La cromatografía en papel es un proceso muy utilizado en
los laboratorios para realizar análisis cualitativos ya que pese
a no ser una técnica potente no requiere de ningún tipo de
simplemente por una tira de papel de filtro. La muestra se
Cromatografía de exclusión de iones
disolución y evaporando el disolvente. Luego el disolvente
Electroforesis
Cromatografía de permeación de gel
Consiste en una columna cromatográfica
empacada de tal manera que las partículas de
dicho empacamiento tienen diferentes tamaños
de poros o de redes de poros con el fin de que
las moléculas de soluto sean retenidas o
excluidas basándose en su forma y tamaño y
no en el peso molecular.
Empaquetamientos de columna. Existen
distintos tipos de empacamientos columna.
Entre ellos están los polímeros
macromoleculares semirígidos, los
entrecruzados, las sílices rígidas ó las de “poro
controlado”.
La cromatografía de exclusión requiere un solo
disolvente durante el análisis en el cual se
pueda disolver la muestra.
equipamiento. La fase estacionaria está constituida
deposita en un extremo colocando pequeñas gotas de la
empleado como fase móvil se hace ascender por
capilaridad.
Cromatografía en papel
Introducción a los métodos de
separación.
Métodos cromatográficos según el estado físico
Introducción a la cromatografía
En 1906, el botánico Ruso M. Tswett realizó un
experimento que condujo al descubrimiento de lo
que hoy conocemos como cromatografía. Colocó un
extracto de pigmentos vegetales en la parte superior
de una columna de vidrio rellena de carbonato de
calcio (CaCO3). Al agregar éter, observó que la
mezcla original se separaba en diversas bandas
coloridas que descendían a través de la columna a
diferentes velocidades
rellenando un tubo; en el segundo, se dispersa
sobre una lámina de vidrio o aluminio formando
cromatografía en papel, la fase estacionaria es
Cromatografía de afinidad
Cromatografía de liquídos de alta resolución
Cromatografía de intercambio iónico
Cromatografía en capa fina
de la fase móvil
Cromatografía líquida
Esta forma de cromatografía puede realizarse
con diferentes arreglos experimentales: en
columna, en capa delgada o en papel. En el
primer caso, la fase estacionaria se encuentra
un lecho de espesor uniforme; en la
la solución acuosa contenida en el interior de
las celdas formadas por las fibras de la
celulosa, y es por tanto una forma de
cromatografía líquido.
La cromatografía de afinidad tiene la ventaja de
ser altamente selectiva para la retención de La cromatografía de afinidad separa las
proteínas afines a la columna, para ello, emplea proteínas (analitos) en función de su
sistemas de baja presión, columnas cortas y un especificidad de fijación de ligandos
campo restringido para la separación
La cromatografía de líquidos de alta eficacia es
la técnica analítica de separación más
ampliamente utilizada.
La cromatografía de intercambio iónico se lleva
a cabo con empaques de columna que tiene
grupos funcionales cargados unidos a una
matriz polimérica.
La cromatografía en capa fina se basa en la
preparación de una capa, uniforme, de un
adsorbente mantenido sobre una placa de
vidrio u otro soporte. Los requisitos esenciales
son, pues, un adsorbente, placas de vidrio, un
dispositivo que mantenga las placas durante la
extensión, otro para aplicar la capa de
adsorbente, y una cámara en la que se
desarrollen las placas cubiertas. Es preciso
también poder guardar con facilidad las placas
preparadas y una estufa para activarlas.
Aplicaciones
Cromatografía de gases Los cationes inorgánicos se pueden determinar
en alimentos, tales como los alimentos
dietéticos bajos en sodio, y en muestras de
orina.
Este tipo de cromatografía siempre es en
columna, ya que es la única manera de que la
fase móvil gaseosa se mantenga fluyendo,
confinada dentro del sistema. La columna
puede estar rellena con la fase estacionaria, en
forma semejante a la cromatografía líquida, o
bien la fase estacionaria puede depositarse
sobre las paredes de un tubo muy delgado
(0.25mm de diámetro) y largo (hasta 100m).