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Universidad Autónoma Chapingo

Departamento De Enseñanza, Investigación Y Servicio


En Zootecnia

Biología celular
Dr. Marian Jesabel Pérez rodríguez

Práctica 1
1.1 La Técnica de Tinción de Hematoxilina - Eosina (H-E).

Integrantes:
Cruz Monroy Itzel Vanessa
García Martínez Florencia
Juárez Tlaseca Mateo
Ovando Santiago Rodi Esaú
Ventura Pérez Libni Henrry

JUEVES 16 DE NOVIEMBRE DE 2023


Introducción
La microscopia óptica ha marcado un antes y un después en cuanto a manipulación
y observación de componentes celulares. El tejido posee características que
pueden ser fácilmente manipuladas y al mismo tiempo presentar resistencia (Narro
Robles et al., 2013); de esta forma es posible exponerlo a diferentes materiales sin
comprometer la estructura y con ello, su capacidad de observación.
Para que esto sea posible, se han requerido de técnicas establecidas y materiales
apropiados como lo son colorantes especiales que vuelven más fácil la identificación
de características propias de la muestra con la que se trabaja. Siendo mejor
conocidas como técnicas histológicas.
Los tejidos no poseen colores fijos y llamativos de manera biológica (Megías M et
al., 2023). Cada técnica de tinción conlleva métodos específicos; los componentes
de los colorantes responden a distintas condiciones y esto les da cierta
especificidad, como en este caso que responde a diferencias en el pH.
La especificidad de algunos colorantes es utilizada en métodos específicos y de
interés. En la presente práctica se buscará observar lípidos. El Sudán III permite
distinguir triglicéridos y otros lípidos (Garnica Guzmán et al., 2021). Al ser insoluble
en agua, permite teñir grasas con tonos rojos-naranjas. Al incluir otros colorantes,
como hematoxilina, también se busca identificación de otros componentes que
permitirán una discusión más amplia.
En este caso se trabajó con una muestra de tejido no mayor a 13 micras de ancho
proveniente de lengua de conejo, misma que fue preservada mediante congelación.

Objetivo
Analizar los adipocitos y núcleos existentes en el corte de lengua de conejo, con el
objetivo de distinguir estas estructura celulares, mediante la técnica de tinción de
Sudan III utilizando los colorantes rojo oleoso y hematoxilina de Harris.

Hipótesis
En la tinción de sudan III, los adipocitos adquirirán un color rojo-anaranjado,
mientras que el núcleo resaltará en color azul-morado, facilitando la visualización
de ambas estructuras.
Materiales Métodos
• Materiales 1. Lavar el corte en agua destilada durante 30s.
• Agua amoniacal 2. Colocar el corte en OH al 50% durante 2 min.
• Hematoxilina de Harris 3. Teñir con colorante rojo oleoso durante 15 min.
• Agua destilada 4. Poner en OH al 50% durante 1 min.
• Cortes (lengua de conejo) 5. Un lavado rápido con agua destilada.
6. Teñir con Hematoxilina de Harris 2 min.
• Alcohol al 50%
7. Lavar con agua destilada.
• Porta-objetos
8. Lavar con agua amoniacal por 5s.
• Microscopio
9. Lavar con agua destilada.
• Albumina
10. Sacar los cortes, colocarlos en los porta
• Rojo oleoso objetos.
• Tinción de Sudán III para lípidos 11. Montar con albumina.
12. Observar.

Ilustración 1. Materiales utilizados en la practica.

Nota: esta imagen se muestra cada uno de los materiales utilizados en la


ejecución de la práctica
Resultados
Se obtuvo como resultado una muestra de la lengua de conejo teñida y montada en
un porta objetos lista para observar. Se observo en un color anaranjado-rojizo los
adipocitos y en un color azul los núcleos. Además de que se podía observar parte
de una membrana o pared teñida igualmente de color azul, los adipocitos eran
notablemente más grandes y nítidos que los núcleos.
Ilustración 1. Adipocitos y Ilustración 2.
núcleos a 5X Adipocitos y núcleos a
10X
Ilustración 3. observación de adipocitos
y núcleos a 40X

Nota: Primer acercamiento a


las dimensiones y localización Nota: En esta imagen
de adipocitos y núcleos se observan algunas
teñidos. fibras musculares del
tejido.

Nota: En esta imagen se observa los adipocitos teñidos de


rojo y los núcleos de color azul-morado.

Análisis y discusión de resultados


Mediante las observaciones obtenidas en microscopio, se distinguen en rojo los
adipocitos y en azul el núcleo, la tinción de los núcleos en azul, es dada por la
hematoxilina de Harris, este colorante actúa en cargas negativas propias de los
ácidos, siendo un colorante básico actúa fuertemente sobre los ADN (ácido
desoxirribonucleico), al ocurrir esto da paso a la tinción azul-morado en núcleos
presentes en el tejido adiposo (Contreras R, 2015; Megías M et al., 2023).
Gracias a la tinción de sudan III se pudo observar a los adipocitos en los cortes de
lengua de conejo. El sudan III es un colorante que no presenta afinidad por
estructuras ácidas o básicas y es insoluble en agua. Al ser de color rojo, tiñe las
grasas de color rojo anaranjado. Es no polar y forma interacciones hidrofóbicas con
las cadenas de hidrocarburos de los lípidos (Garnica Guzmán et al., 2021).
En conclusión, la practica salió a lo esperado y podemos decir que nuestras
muestras fueron teñidas correctamente.

Bibliografía
Contreras R. (2015). Tinción de hematoxilina eosina.
https://biologia.laguia2000.com/histologia/tincion-de-hematoxilina-eosina
Garnica Guzmán, A., Katerine, A., Parra, C., Katherin, J., Martínez, R., Gómez, M.,
Jeannette, G., & Enciso, L. (2021). COMPARACIÓN DE LAS COLORACIONES
NILE-RED Y SUDÁN III PARA LÍPIDOS EN Caenorhabditis elegans.
Megías M, Molist P, & Pombal MA. (2023). Atlas de Histología Vegetal y Animal.
https://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/5-general.php
Narro Robles RECTOR Dra Patricia Dávila Aranda, J. D., Peñalosa Castro, I.,
Montoya Ayala, R., Reina Isabel Ferrer Trujillo, C., Manuel Mancilla Díaz, J., &
José Jaime Ávila Valdivieso, M. (2013). CD Rubén Muñiz Arzate SECRETARIO
DE DESARROLLO Y RELACIONES INSTITUCIONALES.

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