PRÁCTICA N° 09

Observación de cromosomas en Mus musculus

I. INTRODUCCIÓN
Los genes son las unidades orgánicas que controlan la herencia y se encuentran
arreglados linealmente en los cromosomas, ocupando cada gen un sitio o locus
específico. Por su tamaño submicroscópico, los genes no pueden observarse
directamente, pero los cromosomas, que son los elementos intracelulares que los
transportan, pueden estudiarse directamente con el microscopio de luz. Todas las
células tienen cromosomas localizados dentro de su núcleo. Cada célula somática
normal de un individuo dentro de la misma especie tiene un número constante de
cromosomas, que en los organismos de reproducción sexual se denomina número
cromosómico diploide (2n). En tales organismos, las células encargadas de la
reproducción, llamadas gametos, tienen un número cromosómico igual a la mitad del
número diploide, el denominado número haploide o simple (n). (Jiménez y Merchant,
2003)
El núcleo tiene cromatina en una matriz semifluida llamada nucleoplasma. El ADN se
asocia a proteínas formando un complejo conocido como cromatina, que se observa
como una red de gránulos y hebras en el núcleo de las células que no están en división
(interfase). Aunque la cromatina parece desorganizada, no es así, ya que las moléculas
de ADN son extremadamente delgadas y largas. Justo antes de que la célula se divida,
las hebras de cromatina se empaquetan dentro del núcleo de una manera muy regular
como parte de unas estructuras llamadas cromosomas. Los cromosomas se hacen
visibles como estructuras filamentosas diferenciadas, es decir, la cromatina se observa
laxa, pero cuando inicia la división celular, la cromatina se condensa (compacta) y
recibe el nombre de cromosomas. Cada cromosoma está formado por un par de
cromátidas hermanas que contienen secuencias de ADN de cadena doble idénticas.
Cada cromátida contiene una región constreñida (angosta) llamada centrómero. Las
cromátidas hermanas están estrechamente asociadas entre sí en la vecindad de sus
centrómeros. La base química de esta asociación estrecha entre centrómeros son unas
secuencias específicas (nucleótidos de ADN) y unas proteínas que se unen a dichas
secuencias. (Angulo, Galindo y Pérez, 2012)
Objetivos:
• Adquirir destreza en el procedimiento para obtención y observación de placas
metafasicas.
• Determinar el número cromosómico de Mus musculus.
II. MATERIAL Y MÉTODOS

MATERIAL

BIOLÓGICO
 1 ratón Mus musculus (adulto)
NO BIOLÓGICO
 Jeringas de tuberculina
 Solución de colchicina al
0,02%
 Solución de KC1 0,075 M
 Solución de Carnoy
 Orceína acética
 Papel toalla
 Estuche de disección
 Navaja
 Pipeta de plástico
 Tubo de ensayo de 15ml
 Laminas portaobjetos
 Laminillas cubreobjeto
 Alcohol
 Ácido acético

PROCEDIMIENTO
1. Inyectar al espécimen, por vía intraperitoneal, una solución de colchicina al 0,02%
(0,1 mL por 10 g. de peso). Esperar 1 hora.
2. Sacrificar al espécimen y disertarlo. Aislar los huesos largos de las extremidades
limpiando músculos y tendones.
3. Raspar con tijeras las epífisis de los huesos en una solución de KC1 0,075 M,
luego, con una pipeta Pasteur, pasaje la suspensión a tubos de ensayo e incubar a
37°C durante 30 minutos.
4. Centrifugar a 1500 rpm. durante 10 minutos.
5. Eliminar el sobrenadante y agregar al precipitado 1 mL. O 2 mL de fijador
Carnoy's. Dejar transcurrir 15 minutos.
6. Homogenizar lentamente con pipeta Pasteur y centrifugar a 1500 rpm.
7. Eliminar el sobrenadante. Repetir el paso anterior dos veces más (homogenizado y
centrifugado) si fuera necesario.
8. Al último precipitado, agregar 1 mL. de Carnoy's, homogenizar y gotear la
suspensión celular sobre una lámina portaobjetos, desde una altura de 40 cm-60cm.
9. Dejar secar al ambiente, agregar una gota de Orceína acética sobre la muestra,
colocar una laminilla cubreobjetos, dejar colorear 1-2 minutos y observar al
microscopio.
10. Identificar las placas metafásicas y contar los cromosomas en por lo menos 10
metafases, para determinar el número cromosómico de la especie.
III. RESULTADOS

MUESTRA:

OBSERVACIÓN:

PREPARADO:

COLORACIÓN:

AUMENTO:

IV. CONCLUIONES

 Se adquirió destreza en el procedimiento para obtención y observación de

placas metafásicas.
 Se determinó el número cromosómico de Mus musculus.

V. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Jiménez, L. F. y Merchant, H. (2003). Biología Celular y Molecular. (1° Ed.).
México: Pearson Educación.
Angulo, A., Galindo A. y Carolina, C. (2012). Biología Celular. (1°Ed.). México:
Dirección General de Escuelas Preparatoria.