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Histología: estudio científico de las estructuras microscópicas de los tejidos y órganos del
cuerpo. La observación de un tejido puede ser:
Mediata (post-mortem): se puede extraer un tejido una vez que el organismo
murió. Se utiliza técnica de H&E. A veces se utilizan otras técnicas de tinción para
mostrar componentes específicos de las células y los tejidos.
Inmediata (in vitro). Sin colorantes: en microscopio de contraste de fases o
microscopio de interferencia.
Con colorantes (vital): cuando se requiera destacar alguna estructura celular o
tisular se pueden emplear colorantes inocuos para la vida de las células, no
modifican su estructura ni interfieren en sus funciones.
Intravital: consiste en la administración de colorantes vitales a través de las vías digestiva
o intratraqueal; mediante inyecciones sanguíneas, linfáticas, subcutánea, o
intraperitoneal.
Supravital: se emplean colorantes que se aplican a células o tejidos provenientes de
organismos vivos.
Azul tripano, Azul pirrol, Carmín, Verde Jano, Rojo neutro, Azul de metileno, ABC.
Inmunofluorescencia
indirecta: primero, los
anticuerpos primarios
específicos reaccionan
con el antígeno de
interés. Segundo, los
anticuerpos secundarios,
que están marcados con fluorocromo, reaccionan con los anticuerpos primarios.
Aumenta en forma considerable la emisión de la señal de fluorescencia del tejido,
presenta mayor sensibilidad que el método directo.
Microscopía
MICROSCOPIO
- Simple: una sola lente. Ej: lupa.
- Compuesto: sistemas ópticos centrados. Electrónicos: MET, MEB.
Fotónicos: óptico, de campo oscuro, de fluorescencia, de polarización, de contraste de
fases, de interferencia, de luz UV.
Sistema óptico:
Lámpara: Emite los rayos de luz que van dirigidos a la muestra que se está estudiando.
Suele ser una lámpara halógena de intensidad graduable.
Diafragma: El condensador tiende a estar acoplado con el diafragma, mismo que se
encarga de regular la cantidad de luz incidente empleada en la muestra, controla la
abertura (cuanta luz pasa).
Condensador: Su función principal es concentrar cada uno de los rayos de luz sobre la
muestra que se va a observar.
Objetivo: Esta parte fundamental de la herramienta se basa en un conjunto de lentes
que reciben la luz que proviene de la muestra, de esta manera, permite aumentar la
imagen de la muestra que se está observando. Es múltiple, un revólver va girando los
distintos objetivos con varios aumentos. Un anillo coloreado indica los aumentos, son de
4, 10, 40 y 100 aumentos.
Espejos o prismas deflectores: espejos o prismas para que no se produzca pérdida de
fotones.
Ocular: Se encarga de ampliar la imagen que proviene del objetivo, es a través de esta
parte que se puede observar la muestra totalmente. Es el conjunto de lentes necesarios
para generar una imagen aumentada próximas al ojo del observador. (Se miden en 10X,
15X, 20X).
Sistema mecánico: se trata del resto de las partes que proporcionan el soporte
estructural y permiten posicionar con precisión la muestra a analizar en los tres ejes
X,Y,Z (brazo de sujeción, pie, platina, tornillo macrométrico y micrométrico).
Platina: donde va montada mi muestra. Posee una pinza y una escala que muestra los
dos ejes. También hay dos perillas que mueven a la muestra tanto vertical como
horizontalmente.
Sistema de enfoque: posiciona a la muestra en el eje Z, lo que se mueve es la platina.
Tiene 3 partes: el tornillo macrométrico permite movimientos grandes, el tornillo
micrométrico permite ajustar el foco hasta donde deseo visualizar y el freno es un
sistema de seguridad que impide que se mueva sobrepasando una distancia para evitar
el riesgo de destruir la muestra o dañar el microscopio.
Formación de la imagen
La lente situada cerca de la muestra se denomina objetivo, el ocular es la lente a través de
la cual observamos la muestra con el ojo.
La luz proveniente de la muestra atraviesa el objetivo formando una imagen aumentada
invertida como resultado. Esta imagen se denomina imagen real. Al mirar a través de la
lente ocular se ve una imagen aumentada de la imagen real que se conoce como imagen
virtual, mayor, invertida.
Tejido epitelial
Reviste las superficies corporales y tapiza los órganos huecos, las cavidades y los
conductos. También da origen a las glándulas. Sus células están yuxtapuestas y se apoyan
sobre una membrana basal.
Entre su gran cantidad de células agrupadas y compactas hay escasa MEC. Es un tejido
avascular que se encuentra adyacente a tejidos conectivos vascularizados, de los cuales
reciben nutrientes y eliminan desechos por difusión.
Estructura:
a) Cara apical: está dispuesta hacia la superficie corporal, una cavidad corporal, la luz
(espacio interior) de un órgano interno o un conducto tubular que recibe las
secreciones celulares. Puede contener cilios o microvellosidades.
b) Cara lateral: enfrentan las células adyacentes a cada lado.
c) Cara basal: es la opuesta a la apical, limita con tejido
conectivo. Las caras basales de la capa celular más
profunda del epitelio se adhieren a materiales
extracelulares, como la membrana basal.
d) Membrana basal: estructura laminar sobre la cual se
asientan los epitelios. Su principal función es adherir los
epitelios al tejido conectivo.
P.A.S.: es positiva, tiñéndose de color magenta.
Impregnaciones argénticas: se tiñe de negro.
La membrana basal se conforma de:
Lámina basal: está próxima a las células epiteliales y es secretada por ellas. También se
encuentra rodeando a los adipocitos, a las células musculares y a las células de Schwann
(se la denomina lámina externa). Contiene proteínas como laminina y colágeno,
glucoproteínas y proteoglucanos.
A su vez se diferencia en:
- Lúcida (laminina): electrolúcida, en contacto con el epitelio.
- Densa (laminina, entactina/nidógeno, colágeno tipo IV, perlecano): electrodensa, en
contacto con la lámina reticular o con el tejido circundante (en el caso de que no haya
lámina reticular).
Lámina reticular: está próxima al tejido conectivo subyacente. Contiene fibroblastos, fibras
reticulares (colágeno tipo I y II) con proteínas de anclaje que las unen entre sí (colágeno tipo
VII), colágeno tipo IV (placas de anclaje) y V. Su función es de sostén, adhesión y filtrado.
Funciones de la membrana basal:
a. Sostén mecánico del epitelio suprayacente.
b. Adhesión de las células epiteliales a la MEC del tejido subyacente o circundante.
c. Filtración:
De moléculas: selección por tamaño (atraviesan las más pequeñas) y por carga (tiene
gran cantidad de cargas negativas por los proteoglicanos.
De células: normales (excepto los leucocitos) y patológicas (neoplásicas).
d. Regulación de la migración y diferenciación celular por medio de las moléculas que la
componen (embriogénesis, cicatrización).
Funciones de los epitelios:
Protección, característica de los epitelios estratificados.
Absorción, característica en epitelios simples. Su cara apical absorbe sustancias
desde la luz hacia los capilares del tejido conectivo. Son más finos, por ej respiratorio.
Secreción, característica en epitelios simples. Estas células pueden secretar hacia la
luz diferentes sustancias.
Transporte: función particular del epitelio respiratorio. Al inspirar aire atmosférico
ingresan impurezas que pueden llegar hasta la tráquea y los bronquios. Desde allí,
las impurezas se transportan desde sus epitelios hacia las vías respiratorias
superiores, y son finalmente expectoradas o ingeridas.
Lubricación: función de algunas glándulas presentes en la mucosa y la submucosa
del aparato digestivo, y de los mesotelios de la pleura, pericardio y peritoneo.
Sensorial y sensitiva. Están inervados por terminaciones nerviosas libres
provenientes del extremo dendrítico de neuronas sensoriales. Ej: epitelio del pulpejo
de los dedos, celúlas olfatorias del pulpejo olfatorio y corpúsculos gustativos en las
papilas gustativas.
Excreción: en epitelios especializados en el transporte de solutos y agua desde y
hacia la luz. Ejemplo: epitelios de los conductos excretores estriados de las glándulas
salivales.
Inmunológica: primera barrera para la entrada de sustancias extrañas al organismo.
CPA (células presentadoras de antígenos) y células que no son del epitelio, pero
migraron desde el tejido conectivo subyacente (linfocitos, neutrófilos).
Sostén y nutrición: en los epitelios germinativos las células encargadas del sostén y
la nutrición de las células germinales femeninas y masculinas (células de la granulosa
y célula de Sertoli respectivamente).
CLASIFICACIÓN
Epitelios de revestimiento: forman la capa externa de la piel y de algunos órganos internos y
también la capa interna de los vasos sanguíneos, los conductos y las cavidades corporales
y tapiza el interior de los aparatos respiratorio, digestivo, urinario y reproductor.
Epitelios glandulares: constituyen la porción secretora de las glándulas, como la tiroides, las
suprarrenales y las sudoríparas.
El epitelio simple es una capa única de células que participa en la difusión, la ósmosis, la
filtración, la secreción y la absorción. Todas sus células contactan con la membrana basal.
Plano, cúbico, cilíndrico, pseudoestratificado.
- PLANO SIMPLE: una sola capa de células
aplanadas con núcleos a una altura baja y
ahusados con su eje mayor paralelo a la
membrana basal, o protruyendo hacia la luz.
Presentes en los sitios donde se realiza filtración.
Endotelio vascular, epitelio de la hoja parietal de
la cápsula de Bowman en riñón.
- CÚBICO SIMPLE: una sola capa de células cúbicas con núcleo central y redondeado.
Túbulo
contorneado proximal en riñón.
El epitelio estratificado está formado por dos o más capas de células que protegen tejidos
subyacentes donde el rozamiento es considerable. Plano (queratinizado o no
queratinizado), cúbico, cilíndrico, polimorfo/de transición/urotelio. Para su clasificación, se
tiene en cuenta la forma de la capa de células más superficial, es decir, más cercana a la
luz.
- PLANO ESTRATIFICADO: posee varias capas de
células y las que están en contacto con la luz son
planas. Puede ser queratinizado (contiene una capa
de queratina en la cara apical de las células, se
observa como una capa acidófila) o no queratinizado
(no contiene capa de queratina).
El epitelio queratinizado es característico de las superficies
secas como la epidermis de la piel. En cambio, el epitelio
no queratinizado es característico de las superficies húmedas como la boca, el esófago, la
vagina y el conducto anal.
- CÚBICO/CILÍNDRICO ESTRATIFICADO: es
biestratificado y los núcleos que contactan con la
luz son ovoides. Se encuentran en conducto
excretor de las glándulas sudoríparas y de otras
glándulas exocrinas, la uretra femenina, el epitelio
no fotosensible de la retina y los folículos ováricos.
POLIMORFO/DE TRANSICIÓN: su aspecto es variable. En estado relajado, parece un
epitelio cúbico estratificado, con núcleos redondos, de cromatina más laxa, algunas con un
halo claro perinuclear y citoplasmas levemente teñidos. Al M.E. se observa que las células
no pierden el contacto con la membrana basal, llamándose a estas células “en raqueta”.
Las células apicales tienden a ser grandes, redondas y acidófilas. Los núcleos de la capa
apical son esféricos y pueden ser mononucleadas o binucleados, de cromatina más densa
y citoplasma acidófilo más intenso, que se apoyan sobre varias células subyacentes,
denominadas células “en paraguas”.
A medida que el tejido se estira, las células se aplanan y tienen el aspecto de un epitelio
plano estratificado. Es exclusivo de las vías urinarias, por lo que se lo denomina también
urotelio. Como el número de capas y la forma de las células puede variar dependiendo si el
órgano (uréter, vejiga) está lleno o vacío, se lo llama polimorfo. En realidad, es un epitelio
pseudoestratificado (simple).
Especializaciones de membrana
Las células epiteliales presentan polaridad en su membrana plasmática dada por las
uniones estrechas o zonulas occludens, originando dominios:
- Dominio apical, luminal o libre (que contacta con la luz)
- Dominio baso-lateral: cara lateral (contigua con otras células) + cara basal (ésta
separada del tejido conectivo por una membrana basal).
DIFERENCIACIONES DEL DOMINIO APICAL
Microvellosidades: son evaginaciones digitiformes que aumentan la superficie de la
membrana plasmática apical. Presentan abundante glucocálix, por lo que son P.A.S +.
Al M.O se pueden diferenciar 2 tipos:
Chapa estriada: microvellosidades uniformes, similar longitud y grosor. Epitelio intestinal.
Ribete “en cepillo”: microvellosidades de diferentes grosores y longitudes. Túbulos
contorneados proximales al riñón.
Partes:
➢ Haz de filamentos paralelos: filamentos de actina F cuyos extremos + están hacia las
microvellosidades y los extremos – hacia la red terminal.
➢ Puentes transversales: separan los filamentos de actina, formados por fibrina y fascina.
➢ Cilios: prolongaciones con movimientos oscilantes que movilizan líquidos o una capa de
moco por encima de la superficie del epitelio.
Células calciformes: son células epiteliales cilíndricas modificadas que secretan moco por
sus superficies apicales. Se encuentran intercaladas entre los epitelios de revestimiento.
Secretan mucina, formada por hidratos de carbono mayoritariamente y proteínas que,
cuando se hidrata, forma mucus recubriendo la superficie de los epitelios de revestimiento
en los que se encuentran. La mucina se acumula en forma de gránulos o vesículas
rodeadas por membrana en la región apical sobre el aparato de Golgi y el núcleo se
encuentra en la región basal.
Los gránulos de mucina no se ven con H&E, sí con P.A.S. La región basal se tiñe basófila
debido a la acumulación de REG.
DIFERENCIACIONES DEL DOMINIO BASO-LATERAL
Cara lateral: