3.

PROCEDIMIENTO
EXPERIMENTAL

3.1. CÉLULA EUCARIOTA Y PROCARIOTA:

RECONOCIMIENTO DE ESTRUCTURAS
3.1.1. MATERIALES:
*50 ml de agua de pantano.
* 1 cebolla
* 1 rama de Elodeasp
* 1 marcador
* Hojas de afeitar
* Lamina portaobjetos
* Lamina cubreobjetos
* 1 lamina fijada en espermatozoides
* Lugol
* Goteros
* Microscopio
* 1 pliego de papel toalla
* Colorante verde de janus

3.1.2. PROCEDIMIENTO:
3.1.2.1 ESTRUCTURA CÉLULAS PROCARIOTAS (FORMA Y COLOR):
 Bacteria
- Nos acercamos a una mesa en la cual el microscopio ya tenía enfocada una
lámina que contenía bacterias.
Observamos su forma y color.
3.1.2.2. ESTRUCTURA CÉLULAS VEGETALES (NÚCLEO, NUCLÉOLO
Y PARED CELULAR):
 Cebolla:
1) Usamos una hoja de afeitar para cortar un pedazo de catáfilo de cebolla.
2) Después lo colocamos cobre una lámina portaobjetos, le pusimos una gota
de lugol y le pusimos la lámina cubreobjetos.
3) Finalmente lo llevamos al microscopio para enfocarlo en: 10x y 40x.
Observamos el núcleo y la pared celular.

 Elodea:
1) Sacamos una hoja de la rama de elodea.
2) Después la colocamos en una lámina portaobjetos, le agregamos una gota
de agua destilada y le pusimos la lámina cubreobjetos
3) Finalmente lo llevamos al microscopio para enfocarlo en: 10x y 40x.
Observamos los cloroplastos.

3.1.2.3 ESTRUCTURA CÉLULAS ANIMALES (NÚCLEO,

CITOPLASMA Y MITOCONDRIAS):

 Epitelio bucal:
1) Uno de nosotros tuvo que raspar la parte interna de su boca con un palillo.
2) Después raspamos suavemente el palillo con la lámina porta objetos.
3) Ya con las células en la lámina portaobjetos, le agregamos una gota de
verde de janus y esperamos tres minutos.
4) Inclinamos un poco la lámina portaobjetos sobre el papel toalla para
eliminar el exceso de colorante.
5) Finalmente colocamos la lámina cubreobjetos, lo llevamos al microscopio
para enfocarlo en: 400x.
Observamos el núcleo, mitocondria y el citoplasma.
3.1.2.4. CILIOS Y FLAGELOS:
 Agua de pantano:
1) Con un gotero sacamos unas cuantas gotas de la base del agua de pantano
y la colocamos sobre una lámina portaobjetos.
2) Pusimos la lámina cubreobjetos, lo llevamos al microscopio y lo enfocamos
en: 10x y 40x.
Observamos a los protozoarios y los cilios.

 Espermatozoides:
-Nos acercamos a una mesa en la cual el microscopio ya tenía enfocado la
lámina con espermatozoides.
Observamos el núcleo, flagelo y cromosomas.

3.2. OBTENCIÓN Y ANÁLISIS DE FRACCIONES

CELULARES
3.2.1. MATERIALES:
* 10 gr. de hígado de pollo
* 1 Mortero
* 1 Gasa
* 2 beakers de 100ml
* Tubos ependorf de 1,5 ml
* Buffer Tris 10 mM pH 7,5
* Verde de Janus
* Azul de Metileno
* Laminas portaobjetos
* Laminas portaobjetos
* Microscopio de campo claro
* Micropipetas
* Tips de Micropipeta.
3.2.2. PROCEDIMIENTO:

1) Cortamos el hígado del pollo en un tamaño de 3x3.

2) Colocamos el hígado de pollo dentro del mortero.
3) Agregamos 100 ml de Buffer Tris dentro del mortero y después
empezamos a homogenizar hasta casi desaparecer los trozos de hígado.
4) Después de haberlo homogenizado bien colocamos la gaza encima de un
beaker vacío para poder filtrar nuestra sustancia.
5) Agarramos dos tubos ependorf y en uno le pusimos M (mitocondrias) y en
el otro N (núcleo).
6) Usamos la micropipeta, le pusimos un tip para poder sacar 50 ml de esta
sustancia. Después que sacamos 50ml de la sustancia la pusimos en el tubo
N.
7) Con ayuda de una maquina centrifugamos la sustancia a 3000 rpm
durante tres minutos. Al sacar el tubo vimos que la sustancia se había
separado en dos partes que eran: el sobrenadante y el precipitado.
8) Con cuidado sacamos el sobrenadante y lo pusimos en el tubo M y lo
llevamos para que se centrifugue a 1000 rpm durante ocho minutos.
Mientras que para el tubo N usamos la micropipeta y le colocamos un poco
de Buffer Tris, después lo devolvíamos dentro del tubo repetimos esa acción
para poder homogenizar las sustancias.
9) Después de haber homogenizado bien las sustancias en el tubo N, usando
la micropipeta colocamos una gota en una lámina porta objetos y le pusimos
una gota de azul de metileno para después ponerle la lámina cubre objetos.
10) Al sacar el tubo M usamos la micropipeta y con un nuevo tip sacamos una
gota de esta sustancia y la colocamos en una lámina porta objetos para
agregarle una gota de verde de jauz para después poner la lámina cubre
objetos.
11) Finalmente llevamos ambas láminas al microscopio. Para observar la
sustancia del tubo N la enfocamos en: 10 y 40 para observar el núcleo. Para la
sustancia del tubo M la enfocamos en: 10 y 40 para poder observar las
mitocondrias.
4. RESULTADOS

4.1. CELULAS VEGETALES

 Catáfila de cebolla: Observamos a 400x el nucléolo, pared celular y núcleo.

 Elodea: Observamos a 400x, cloroplastos.

4.2. CELULAR ANIMALES

 Células de epitelio bucal: Observamos a 400x el núcleo,

citoplasma y mitocondrias.
4.3. CILIOS Y FLAGELOS:

 Agua de pantano: Observamos a 1000x los cilios y protozoarios.

 Espermatozoides: Observamos a 1000x los flagelos, cromosomas y

núcleo.
4.4 analisis de lasfraccioens celualres

I. Observamos de la solución realizada con azul de metileno a 10x y 40x el núcleo.

II. Observamos de la solución realizada con verde de janus a 40x las mitocondrias.
5. ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE LOS
RESULTADOS
5.1. ANÁLISIS:

5.1.1. CÉLULA EUCARIÓTA Y PROCARIOTA: RECONOCIMIENTO DE

ESTRUCTURAS
Este informe presenta información sobre la estructura de las células vegetales,
así mismo como sus componentes u organelas mediante la ayuda del
microscopio, también se hace presente las diferencias entre la coloración Gram
que se dividen en dos grandes clases: GRAM POSITIVAS o GRAM NEGATIVAS.
Conjuntamente se puede distinguir diferencias entre células vegetales como la
forma o estructura de su pared celular, el tamaño de las vacuolas y la manera
en la que están agrupadas

5.1.2. OBTENCIÓN Y ANÁLISIS DE FRACCIONES CELULARES

El fraccionamiento celular es una técnica bioquímica utilizada para separar los
distintos orgánulos y componentes celulares para su estudio. La técnica se inicia
con la homogeneización. El tejido se tritura en un homogeneizador de manera
que las células se comprimen y se libera su contenido. Lo que luego se hace con
ese extracto es someterlo a diferentes centrifugaciones a diferentes velocidades
y tiempos, de manera que obtenemos fracciones enriquecidas de los distintos
orgánulos
5.2.DISCUSIÓN DE RESULTADOS
5.2.1. CÉLULA EUCARIÓTA Y PROCARIOTA: RECONOCIMIENTO DE
ESTRUCTURAS
 Cebolla :
Para las células de la cebolla se observó que en ella su pared celular posee
algunos pequeños polígonos. Se observaron distintas formas y tamaños, se
tenían que teñir para poder identificar estructuras propias de las células

 Hoja de elodea :
Los cloroplastos se mueven en la periferia de las células en el espacio que queda
entre la membrana plasmática y la gran vacuola central que ocupa las células se
logró identificar la pared celular y también los cloroplastos

 Epitelio bucal:
Hemos visto que las células de la mucosa bucal son muy sencillas. Se podía ver
el núcleo de la célula. El pequeño tamaño de las células y la cantidad de ellas
que podemos tener en un poquito de saliva

 Agua de pantano:
Son estructuras que pueden moverse y desplazar fluidos, se observó que los
cilios tenían un desplazamiento rápido

5.2.2. OBTENCIÓN Y ANÁLISIS DE FRACCIONES CELULARES

 Hígado de pollo:
El método de centrifugación diferencial es el adecuado para separar fracciones
subcelulares previas a una homogenización, se determinó fracciones celulares
como núcleos, mitocondria, lisosomas por centrifugación diferencial
CONCLUSIONES

 Célula procariota y eucariota:

Reconocimiento de estructuras
- Se puede concluir que la célula eucariota tiene una mayor organización debido a que
es posible encontrar estructuras celulares que se denominan organelas celulares
determinados en una organización y para una función mientras que la célula
procariota sus organelas membranosas se encuentran dispersos en el citoplasma.

-Se pudo analizar la presencia de una pared celular que le da soporte y rigidez a la
célula vegetal mientras que la célula animal posee una membrana citoplasmática
pudiendo adoptar distintas formas.

 Obtención y análisis de fracciones celulares

-Es importante que el procedimiento se realice en temperaturas frías para mantener el

BUFFER TRIS y este a su vez nos ayude a limpiar unas enzimas de la célula para que sea
más sencilla su observación.
-Aprendimos que el colorante azul de metileno le da un color a la célula, pero por ser
una solución base ya que puede ser absorbida mejor por algunos organelos para
reconocerlas de mejor manera.
- Se logró realizar satisfactoriamente el experimento teniendo como resultado la
apreciación de la fracción celular el cual es el primer paso para profundizar en la
funcionabilidad de cada componente celular.
-Se determinó fracciones celulares como la fracción nuclear y las mitocondrias; ambas
observadas en dos tipos de microscopios tanto de campo claro como de fluorescencia,
aunque este último lo vimos por medio de el proyector.
REFRENCIAS BIBLIOGRAFICAS
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Monografias.com. 2012 [cited 15 May 2012]. Available from:
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2015]. Available from:
http://www.profesorenlinea.cl/Ciencias/celula_animal_y_vegetal.htm
 Manrique C. INFORME DE LABORATORIO BIOLOGÍA CELULAR [Internet]. Scribd. 2012
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CELULAR
 Tood H. Henry, El Laboratorio en el Diagnostico Clínico Todd-Sanford 20ª Ed.
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 Karp, G.; (1998) Biología Celular y Molecular. Ed. Mc Graw Hill
Interamericana. México