UNIVERSIDAD

CATOLICA DE SANTA MARIA

I SEMESTRE
PROTOCOLO DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA
CELULAR ODONTOLOGIA
Autores:
Ruth Álvarez Monge
Kathia Mamani Baldárrago
Susan Flores Calla

Nombre: Gian Pierre Sanca Machaca

Grupo: 07

AREQUIPA – 2021
 PRACTICA N°7
ORGANELAS E INCLUSIONES
CELULARES

1. COMPETENCIAS
 Analiza y diferencia cada una de las organelas citoplasmáticos.
 Reconoce diferentes inclusiones celulares: glucógeno, imagen positiva y negativa
de grasas, la melanina.
 Identifica la coloración selectiva de cada organela e inclusión.
 Valora la importancia de los colorantes en la aplicación citológica.

2. MARCO TEÓRICO (Formato APA)

ORGANELAS

a) Retículo Endoplasmático Rugoso:

 Formación de cito membranas.

 Transporte de proteínas sintetizadas hacia el AG.

 Síntesis de proteínas para la exportación: MP y Lisosomas.

b) Retículo Endoplasmático Liso:

 Carece de ribosomas.

 Ayuda a sintetizar y concentrar las diversas sustancias que necesita la

célula.

c) Mitocondrias: Respiración celular y fosforilación oxidativa. Ciclo de Krebs y

del ácido cítrico.
 d) Aparato de Golgi: Modificar, almacenar y exportar proteínas sintetizadas
en el RE a distintas partes del organismo.

e) Nucleolo:

 Estructura esférica de composición química a base de RNA.

 Sintetizan ribosomas RNA.

 Es clave en la regulación de la síntesis proteica.

f) Membrana plasmática: Transporte de iones y moléculas, reconocimiento,

receptores para moléculas grandes y pequeñas, morfología celular y
movimiento.

g) Núcleo: Síntesis y reparación de DNA, síntesis y procesamiento de RNA,

síntesis de ribosomas.

h) Lisosomas: Hidrolisis de polímeros mediante hidrolasas acidas.

i) Peroxisomas: Reacciones oxidativas con O2, utilización de H202.

j) Microtúbulos y Microfilamentos: Citoesqueleto, morfología celular,

motilidad Celular, movimientos intracelulares.

3. METODOLOGÍA

MATERIALES

* Láminas histológicas a observar

* Aceite de inmersión

* Microscopio compuesto

* Alcohol isopropilico

* Algodón
I. OBSERVACIÓN DE ORGANELAS CELULARES

A. ERGASTOPLASMA

Muestra: Páncreas
Coloración: H. E.
Observación: Retículo endoplasmatico rugoso o ergastoplasma

Con el objetivo de menor aumento recorra la lámina, observará un órgano compacto

dividido en lobulillos mediante tabiques interlobulillares, dentro de cada lobulillo
observará infinidad de núcleos, redondos y teñidos de color lila o azul, tenga presente
que cada núcleo corresponde a una célula, las células pancreáticas se agrupan de 5
a 10 alrededor de una luz central y conforman los llamados acino pancreáticos.
Observe cada una de estas células tomando como referencia el núcleo de color azul
y el citoplasma rosado en el sector que mira al centro del acino (polo apical) y lila
(basófilo) en el polo opuesto o polo basal. En un inicio, no podrá individualizar cada
célula del acino, pero tenga en cuenta que todas las células confluyen en un punto
central del acino, traces líneas imaginarias de la periferia de la célula al centro y
descubrirá que las células tienen forma piramidal. La región basal de la célula
corresponde al extremo más ancho y la apical al más delgado. Cambie a mayor
aumento para ver mejor el Ergastoplasma. Dibuje, coloree y ponga los nombres que
corresponden.
 Observacion 10x

Observacion con el objetivo panoramico

 ACINOS
Observacion 40x – 100x

Observacion a mayor aumento

B. APARATO DE GOLGI

Muestra: Epidídimo
Coloración: Aoyama – Impregnación argentica
Observación: Aparato de Golgi

Recorra la muestra y encontrará gran cantidad de conductos unidos por un tejido fino
que se colorea ligeramente. Escoja un tubo y observe que están formados por células
cilíndricas; la región donde se encuentra el núcleo es el polo basal y la región opuesta
el polo apical. En el polo apical de cada célula se observa una condensación marrón
o negra correspondiente al Aparato de Golgi.

Observacion 10x

Observacion con el objetivo panoramico

 Observacion 100x

Observacion a mayor aumento

C. MITOCONDRIAS

Muestra: Hígado
Coloración: Hematoxilina fosfotúngstica
Observación: Mitocondrias

Recorra la muestra e identifique a los hepatocitos, que son células poliédricas que
forman este órgano macizo, con la ayuda del objetivo de inmersión busque en el
citoplasma de estas células y encontrará a las mitocondrias a manera de gránulos
finos de color magenta o lila obscuro

Hepatocitos
Observacion 10x

Observacion con el objetivo panoramico

 Observacion 100x

Observacion a mayor aumento

II. OBSERVACIÓN DE INCLUSIONES CITOPLASMÁTICAS.

A. GLUCÓGENO

Muestra: Hígado
Coloración: P.A.S.
Observación: Glucógeno

Recorra la lámina con panorámico y observe que el tejido presenta sectores con
mayor y menor coloración (corresponden a mayor o menor cantidad de glucógeno). A
más aumento observe los hepatocitos algunos de ellos con dos núcleos y en el
citoplasma de cada célula reconozca el glucógeno presente en forma de gránulos P.
AS. positivos (color magenta y púrpura).
 Observacion 40x

Observacion a mayor aumento

B. GRASA

IMAGEN POSITIVA
Muestra: Tejido subcutáneo
Coloración: Sudan
Observación: Grasa

Para obtener esta muestra se utilizó una técnica especial en la que se evita e uso
del xilol y un micrótomo de congelación, el preparado se ha coloreado con Sudán III
y contrastado con hematoxilina. Las zonas anaranjadas corresponden a grasa, que
se ubica dentro de los adipocitos y en todos los casos el citoplasma y el núcleo han
sido desplazados a la periferia.
 Observacion con el objetivo panoramico

IMAGEN NEGATIVA DE GRASA. LAMINA Nº 10

Muestra: Tejido subcutáneo
Coloración: H. E.
Observación: Imagen negativa de grasa

Recorra la lámina con menor aumento y observe la presencia de grandes sectores

claros que presentan una apariencia de malla, a mayor aumento puede observarse
los espacios poligonales donde estuvo la grasa y el citoplasma y núcleo
desplazados hacia la periferia. Uniendo a las células adiposas se encuentra el tejido
conjuntivo.
 Observacion con el objetivo panoramico

C. PIGMENTO MELANINA

Muestra: Piel pigmentada

Coloración: H. E.
Observación: Pigmento melanina

El preparado es una muestra de piel en ella se diferencian dos zonas, oscura

epidermis y la dermis; en la epidermis observe una franja de color café casi en el
limite con la dermis, a mayor aumento notara gránulos de color marrón o negruzco
que corresponden a la melanina.
 Observacion con el objetivo panoramico

4. CUESTIONARIO

 ¿En qué consiste la fosforilación oxidativa?

Es el proceso por el que se forma ATP como consecuencia de la transferencia
de electrones desde el NADH o del FADH2 al O2 a través de una serie de
transportadores de electrones.
 ¿Por qué es necesario colorear una muestra?
Porque nos facilita la visualización de los componentes y la estructura
de una célula.
 Explique el fundamento de la coloración argéntica
Utiliza el nitrato de plata, con esta técnica el núcleo se tiñe lila débilmente y el
citoplasma de amarillo, el Aparato de Golgi de color marrón o negro.
 ¿Qué es la Hematoxilina fosfotúngstica? Explique el fundamento
Identifica mitocondrias, es una coloración que está en base a hematoxilina
contrastada con el ácido fosfotungtico y agua destilada. Lo que hace el ácido
fosfotungtico es oxidar la hematina (colorante de la hematoxilina) para
observar con mayor intensidad los componentes celulares.

 ¿En la imagen positiva de grasas, por qué no se utilizó la Técnica de

Inclusión en parafina?
En la Inclusión en Parafina si usamos el xilol, al ser un alcohol fuerte, va a
disolver la grasa dejando espacios libres en la célula.
 ¿Qué son las inclusiones celulares?
 Son sustancias inertes que se almacenan en el interior de la célula, este lo
encontramos en el citoplasma, son gránulos de glucógeno, lípidos, proteínas
cristalizadas, pigmentos y aceites esenciales.

 ¿En la imagen positiva de grasas, por qué no se utilizó la Técnica de

Inclusión en parafina?
En la Inclusión en Parafina si usamos el xilol, al ser un alcohol fuerte, va a
disolver la grasa dejando espacios libres en la célula.

5. BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA APA

 Anónimo. (2017). Fosforilación oxidativa. Khan Academy.

 Anonimo. Retículo endoplasmático. National Human Genome Research Institute.