VERSIÓN 1 – FECHA DE ENTRADA EN VIGOR: 1 DE ENERO DE 2016

RECUENTO DE PARÁSITOS PALÚDICOS

DIAGNÓSTICO MICROSCÓPICO DEL PALUDISMO PROCEDIMIENTO
OPERATIVO ESTANDAR – DMP-POE-09

1. OBJETIVO Y ALCANCE
Describir el procedimiento para contabilizar los parásitos palúdicos en extensiones de sangre gruesas y
finas.
Este procedimiento solo podrá modificarse con la aprobación del coordinador nacional del
aseguramiento de la calidad del diagnóstico microscópico del paludismo. Todos los procedimientos
especificados en el presente documento son de obligado cumplimiento para todos los microscopistas
responsables del diagnóstico microscópico del paludismo en los laboratorios nacionales de referencia, los
laboratorios hospitalarios y los laboratorios básicos de los establecimientos de salud que llevan a cabo
esta prueba.

2. INFORMACIÓN GENERAL
La densidad parasitaria informa sobre la gravedad de la infección y la respuesta al tratamiento. Se
contabilizan las formas asexuadas de P. falciparum, P. vivax, P. malariae y P. ovale. Salvo que el protocolo
dicte otra cosa, los gametocitos quedan fuera del recuento, pero su presencia siempre se notifica. Se
deben notificar todas las especies parasitarias identificadas, aunque se contabilicen juntas.
La mayoría de los recuentos parasitarios se realizan en gotas gruesas. Si no se dispone de una gota
gruesa o esta se ha dañado, se realiza el recuento en la extensión fina. También se hace un recuento
en la extensión fina cuando en la gota gruesa se observan más de 100 parásitos por campo, lo cual
corresponde a más de 80 000 parásitos/µl.

3. SUMINISTROS, MATERIALES Y EQUIPOS

• Un microscopio compuesto binocular de 10x; objetivos de 10x, 40x y 100x, y una platina mecánica
(también se pueden montar un marcador de objetos y un objetivo de 60x);
• un contador con varias teclas o dos contadores simples, uno para contar los parásitos palúdicos y
otro para contar los leucocitos;
• las extensiones de sangre teñidas con colorante de Giemsa que se van a examinar;
• aceite de inmersión de tipo A de alta calidad;
• papel para limpieza de lentes;
• lápiz y bolígrafo, y
• una calculadora de mano.
DMP-POE-09: RECUENTO DE PARÁSITOS PALÚDICOS
4. PROCEDIMIENTO
DIAGRAMA DE FLUJO
4.1. Recuento de parásitos en una gota gruesa
y cálculo de la densidad parasitaria
1. Coloque el
portaobjetos sobre la platina
del microscopio con el rótulo a la
izquierda.
2. Determine la presencia de parásitos
palúdicos, identifique la(s) especie(s)
y las formas evolutivas, y anote esta
información (véanse los DMP-POE 06b
y 08).
3. Empezando por la parte superior
izquierda de la extensión, busque un
campo típico que contenga parásitos y
leucocitos y comience a contar.
4. Cada vez que observe un parásito
o un leucocito, pulse la tecla
correspondiente del contador.
5. Tras contar todos los parásitos
y leucocitos de un campo, pase al
siguiente, repita el procedimiento y así
sucesivamente.
Fig. 1. Recorrido para contar los parásitos y los
DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD
4.1. Recuento de parásitos en una gota gruesa
y cálculo de la densidad parasitaria
Nota: Antes de empezar a contar, examine
100 campos de la gota gruesa con el
objetivo de inmersión de 100x para detectar
la presencia de parásitos palúdicos.
1. Coloque el portaobjetos de vidrio sobre la
platina del microscopio con el rótulo a la
izquierda. Este proceder permite comenzar
el recuento de una manera normalizada
y registrar las ubicaciones de los parásitos
utilizando las divisiones grabadas en el
soporte del portaobjetos.
2. Si observa parásitos palúdicos (véase el
DMP-POE 08: Examen microscópico de
extensiones de sangre gruesas y finas para
la identificación de parásitos palúdicos),
cuente las formas asexuadas (ya se trate de
una infección simple o mixta) y no cuente las
sexuadas (gametocitos), que solo se notifican.
En las infecciones mixtas se contabilizan
juntas todas las formas asexuadas de los
parásitos y se notifica la presencia de varias
especies (véase el DMP-POE-06b: Registro
y notificación de los resultados del examen
microscópico).
3. Empezando por la parte superior de la
extensión, busque un campo en el que se
observe un buen número de leucocitos
juntos y comience a contar.
4. Mediante un contador múltiple, cuente los
parásitos y los leucocitos simultáneamente
pulsando cada vez la tecla asignada a
unos o a otros, según corresponda. Si está
utilizando dos contadores, emplee uno para
los leucocitos y otro para los parásitos.
5. Una vez contabilizados todos los parásitos y
los leucocitos de un campo, pase al siguiente
según el recorrido que se muestra en la
figura 1, repita el procedimiento de conteo
y así sucesivamente. Tenga cuidado de no
solapar los campos.
leucocitos
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DMP-POE-09: RECUENTO DE PARÁSITOS PALÚDICOS
DIAGRAMA DE FLUJO
6. Según el número de parásitos
observados, deje de contar después de
haber contado 200 o 500 leucocitos.
• Si ha contado ≥ 100 parásitos en
campos que contienen 200 leucocitos,
deje de contar y anote los resultados
como el número de parásitos por
200 leucocitos.
• Si ha contado ≤ 99 parásitos en
campos que contienen 500 leucocitos,
deje de contar y anote los resultados
como el número de parásitos por
500 leucocitos.
7. Contabilice todos los parásitos y
leucocitos en el último campo.
8. Anote el número real de parásitos y
leucocitos que ha contado.
9. Calcule la densidad parasitaria con esta
fórmula:
Número de parásitos
Parásitos / µl
contados x 8000 leucocitos/µl
sangre =
Núm. de leucocitos contados
DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD
6. Para saber cuándo debe dejar de contar,
siga estas normas:
• Si ha contado ≥ 100 parásitos
en campos que contienen 200
leucocitos, deje de contar y anote
los resultados como el número de
parásitos por 200 leucocitos.
• Si ha contado ≤ 99 parásitos
en campos que contienen 500
leucocitos, deje de contar y anote
los resultados como el número de
parásitos por 500 leucocitos.
7. Contabilice todos los parásitos y leucocitos
en el último campo, aunque la cifra de
leucocitos sea mayor de 200 o 500.
8. Anote en una hoja de cálculo adecuada
el número real de parásitos y leucocitos
contabilizados.
9. Una vez terminado el recuento, calcule la
densidad parasitaria basándose en la cifra
real de leucocitos del paciente. Si no dispone
de ella, utilice una estimación media de
8000 leucocitos/µl de sangre.
Haga el cálculo aplicando la fórmula
siguiente:
Número de parásitos contados
Parásitos / µl
x 8000 leucocitos/µl
de sangre =
Núm. de leucocitos contados
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DMP-POE-09: RECUENTO DE PARÁSITOS PALÚDICOS
DIAGRAMA DE FLUJO
4.2. R
 ecuento de parásitos en una extensión
fina y cálculo de la densidad parasitaria
1. Si hay eritrocitos
infectados, cuente todos los
que están parasitados y anote la
información.
2. Empezando por la parte superior de la
extensión, busque un campo típico que
contenga eritrocitos parasitados y sin
parasitar.
3. Cada vez que observe un eritrocito
parasitado o sin parasitar, pulse la tecla
correspondiente del contador.
4. Tras contar todos los eritrocitos
parasitados y sin parasitar presentes
en un campo, anote el resultado,
desplácese al campo siguiente y repita el
procedimiento de conteo.
5. Tras examinar 20 campos de la
extensión fina, deje de contar y anote
todos los eritrocitos parasitados y sin
parasitar.
6. Anote el número total de eritrocitos
parasitados y el número total de
eritrocitos contados en los 20 campos
de la extensión fina. Aplique la fórmula
siguiente para calcular la densidad
parasitaria:
Núm. de eritrocitos
Parásitos / parasitados x 5 000 000
µl = Núm. de eritrocitos
contados
DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD
4.2. R
 ecuento de parásitos en una extensión
fina y cálculo de la densidad parasitaria
Nota: Si observa ≥ 100 parásitos por campo en
la gota gruesa con el objetivo de 100x, haga un
recuento parasitario en la extensión fina.
1. Si hay eritrocitos infectados, cuente todos los que
están parasitados. Si observa formas sexuadas
(gametocitos), no las cuente, pero notifíquelas.
En las infecciones mixtas, cuente juntos todos los
eritrocitos parasitados, y notifique la presencia de
varias especies parasitarias.
2. En la parte alta de la extensión fina, localice un
campo que contenga unos 250 eritrocitos. Cuente
el número total de eritrocitos en ese campo y el
número de ellos que están parasitados. Un campo
típico (con un aumento de 100x) debe contener
unos 250 eritrocitos.
3. Mediante un contador múltiple, contabilice los
eritrocitos parasitados y los que no lo estén
pulsando las teclas asignadas a cada uno de estos
tipos de células. Si está utilizando dos contadores,
emplee uno para los eritrocitos parasitados y otro
para los que no lo estén.
4. Una vez contabilizados todos los eritrocitos
parasitados y sin parasitar presentes en un campo,
desplácese al siguiente según el recorrido que
se muestra en la figura 1, repita el procedimiento
de conteo y así sucesivamente. Tenga cuidado
de no solapar los campos. Continúe de manera
longitudinal, desplazándose campo a campo por
la extensión según el recorrido indicado. En cada
campo contabilice todos los eritrocitos parasitados
y los que no lo estén, aunque el número total de
eritrocitos por campo supere los 250.
5. Deje de contar cuando haya contabilizado unos
20 campos con unos 250 eritrocitos cada uno (en
total, 5000 eritrocitos aproximadamente). Anote
en una hoja de cálculo adecuada el número real
de eritrocitos parasitados y no parasitados. Utilice
estos valores para calcular el número total de
parásitos por microlitro de sangre.
6. Una vez terminado el recuento, calcule la
densidad parasitaria a partir de la cifra real de
eritrocitos del paciente. Si no dispone de ella,
utilice una cifra media estimada de 5 000 000 de
eritrocitos/µl y aplique la fórmula que se indica a
continuación. Tenga en cuenta que el resultado
final se ha redondeado al entero más próximo.
Número de parásitos por µl de sangre:
Núm. de eritrocitos
Parásitos /
parasitados x 5 000 000
µl =
Núm. de eritrocitos contados
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DMP-POE-09: RECUENTO DE PARÁSITOS PALÚDICOS

5. POE RELACIONADOS
DMP-POE-06b: Registro y notificación de los resultados del examen microscópico
DMP-POE-08: Examen microscópico de extensiones de sangre gruesas y finas para la identificación de
parásitos palúdicos.

6. REFERENCIAS
Organización Mundial de la Salud. Medios auxiliares para el diagnóstico microscópico del paludismo.
Ginebra; 2010.
Organización Mundial de la Salud. QA manual for malaria microscopy. 2nd edition. Ginebra; 2015.
Organización Mundial de la Salud. Bases del diagnóstico microscópico del paludismo. Parte I. Guía del
alumno. Segunda edición. Ginebra; 2014.
Organización Mundial de la Salud. National malaria slide bank standard operating procedures. Ginebra;
2015 (en preparación).

7. DOCUMENT HISTORY
Fecha Persona responsable
Versión Observaciones
(mmm/aaaa) (Nombre y apellido)
Examinado y redactado
Glenda Gonzales,
en su versión definitiva
Ene 2016 1 Funcionaria técnica,
por expertos, editado y
WPRO
formateado

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WHO/HTM/GMP/MM/SOP/2016.09 © Organización Mundial de la Salud 2016. Se reservan todos los derechos.