Toxicología forense

Alcohol
• El etanol se consume y producir alteraciones
del humor, cuando ello se hace con
moderación es socialmente aceptable y no
resulta nocivo .
• Un 50 %de los adultos de los países
occidentales consumen alcohol y cerca del 5-
10 % presenta alcoholismo crónico
 Metabolismo del Etanol
• El alcohol sanguíneo es biotransformado a acetaldehído en el
hígado por 3 sistemas enzimáticos, alcohol deshidrogenasa
isoenzimas del citocromo P-450 y catalasa .
Efectos del alcohol
 Dosaje de alcohol
• Se puede medir el etanol en la sangre,
suero, plasma, saliva u orina y muestras post-
mortem (por ejemplo, humor vítreo).
• Obtención y preparación de las muestras
• No usar alcohol u otros desinfectantes volátiles para
el sitio de la venopunción. Utilizar soluciones acuosas
de Zephiran (cloruro de benzalconio), Merthiolate
(timerosal) o povidona yodada.
• Plasma tratado con heparina de litio y EDTA
bipotásico.
 Determinación de etanol
Método enzimático:
• EL alcohol etílico y NAD se convierten en acetaldehído y NADH por la
acción de la ADH y se mide a 340 nm.

Interferencias:
• Este método es muy selectivo, pero no del todo específicos
para el etanol, con algunas interferencias (3% a 7%) de otros
alcoholes como el metanol, butanol, o n-propanol.
 Método Enzimatico
• Resultados:
• 0,5-1 g/L, 50-100 mg/dL Rubor, reflejos disminuidos,
agudeza visual disminuida
• > 1 g/L, > 100 mg/dL Depresión del SNC
• > 4 g/L, > 400 mg/dL Han ocurrido casos fatales
 Cromatografía de gases
• Es el método de referencia para la determinación del etanol
• Con este método es posible cuantificar de manera simultaneas otros
alcoholes ,como el metanol y el isopropanol.
• La muestra se deposita en vial cerrado con un tapón perforable ,en el que
se deja una camara de aire
• Se calienta a 60 grados durante 30 minutos.
• Se extrae con una jeringa para gases una muestra de la parte superior del
frasco para inyectarla en un cromatógrafo de gases.
• Los componentes se detectan con un detector de ionización de llama.
• Alcoholes volátiles eluyen de la columna en el siguiente orden: 1) metanol
a 0.94 minutos, 2) de etanol a 1,50 minutos, 3) isopropanol en 1.90
minutos, y 4) n-propanol en 3,90 minutos.
 Cromatografía de gases

Ventajas e inconvenientes:
➢Costoso.
➢Personal especializado
➢Técnica muy sensible ,fiable y rentable para determinaciones
cualitativas y cuantitativas (limite de sensibilidad 1-5ug/ml).
 Alcohol en aliento

• Reacción química: Consiste en ampollas de vidrio cerradas que contienen

cristales de dicromato de potasio en un medio de acido sulfurico. Antes
del uso se rompe la ampolla en una bolsa hermetica y se sopla durante un
tiempo ,el alcohol del aliento se detecta por un cambio de color de los
cristales de dicromato de potasio.
 Alcohol en aliento
• Celda electroquímica

• Absorción de radiación infrarrojo: Una muestra de aliento se

mantiene en una celda de gas por la que pasa radiación infrarroja
La absorbancia de unas cuantas longitudes de onda se usa para
cuantificar la cantidad de etanol presente .La longitud de onda
primaria detecta el etanol y contaminantes orgánicos .Se usan una
o dos longitudes de ondas secundarias para detectar las sustancias
que interfieren, las cuales sirven luego para corregir la absorción de
la longitud primaria. Estos instrumentos requieren de una fuente
eléctrica
 Saliva
• Preparacion y recoleccion de muestra:
➢ No debe colocarse nada en la boca del sujeto durante al menos 10
minutos antes de colectar la saliva. Esto incluye alimentos, bebidas,
productos del tabaco y otros materiales.
➢ La muestra de saliva puede recolectarse en un recipiente para recolectar
esputo o un recipiente limpio, o aplicarse directamente en la almohadilla
reactiva de la tira de prueba.
➢ Evitar contacto con la piel usando guantes y vestimenta de laboratorio
adecuada.
 Métodos
• Método ADH-Diaforasa

Rangos:
Se cuantifica de 10-145 mg/dl
• Método Alcohol oxidasa
 Alcohol en orina
➢ Los Exámenes de Orina para Determinar el Alcohol
➢ Aunque el efectuar el test de orina sirve para indicar la presencia de
alcohol en el sistema de la persona, no indica el estado actual del
individuo. Una vez que se ha consumido, el alcohol se introduce en
la sangre por medio del estómago aproximadamente en 15
minutos, causando un daño inmediato. A continuación el cuerpo lo
metaboliza y entre 1 hora y media y 2 después comienza a aparecer
en la orina.
➢ Por lo tanto, la prueba de la orina para determinar el contenido del
alcohol no ofrece una imagen real del estado actual de la persona.
Los resultados indican el estado de la persona varias horas antes. Es
mas, la concentración del alcohol en la orina no corresponde
directamente con la concentración del alcohol en la sangre.
Uso y nuevas aplicaciones de marcadores de alcohol
• Los últimos años el uso de los nuevos biomarcadores, etil
glucurónido (ETG) y sulfato de etilo (ETS), para la detección de
el consumo de alcohol.
• Cada metabolito representa menos del 0,1% de los
metabolitos total de la ingestión de etanol. Ambos son
marcadores biológicos detectable en la orina en cuestión de
minutos de consumo de alcohol y son detectables durante
aproximadamente tres días mediante espectrometría de
masas.
Estabilidad:
• ETG no es estable en las muestras de orina sin conservantes almacenarse
a temperatura ambiente. β-glucuronidasa bacteriana
provoca una degradación significativa en el 50% de las muestras dentro de
24 horas y la hidrólisis completa en tres a cuatro días
• Además, las muestras de orina que contiene E. coli y el etanol se encontró
que contienen ETG niveles de 0,5 mg / L a 17,6 mg / l después de 24 horas
a temperatura ambiente, lo que indica ETG se pueden producir in vitro.
ETS no se produce y no se degrada
• mayoría de los laboratorios deberán ETS puede detectar a 25 ng / ml a 100
ng / mL para informar de una muestra como positiva.
Consumo no intencional
• En estudios sobre el efecto de enjuague bucal, los niveles de ETG eran menos de
120 ng / mL, si se usó un enjuague bucal sólo una a tres veces al día . Hacer
gárgaras con grandes volúmenes en un período de 15 minutos puede generar
niveles superiores a 300 ng / mL, probablemente porque la persona ingirió el
enjuague bucal, o las membranas mucosas de la cavidad bucal absorbe el etanol.

Nuevas aplicaciones de la ETG

• Una de las nuevas aplicaciones para el monitoreo ETG es un parche de sudor
(PharmChek) .
• ETG ha sido identificado en el pelo de las enfermedades crónicas alcohólicos. El
límite de detección fue estimada en 2 pg / mg, con concentraciones ETG pelo de 6-
1239 pg / mg en los alcohólicos crónicos.
• Pigmentación del pelo parecía no tener ningún efecto. No se ETG encuentran en el
cabello de los consumidores moderados o abstemios.
• ETG niveles fueron de 20 ng / ml a 57,7 ng / mL a las 14 horas después de la
ingestión moderada de alcohol. Los niveles de 13,3 ng / ml a 37,7 ng / ml se
determinó ya en dos horas de la ingestión.
 Reglamento Nacional de Transito
• Capitulo III Sanciones
• Artículo 307º.-
• El grado de intoxicación alcohólica sancionable a los titulares de Licencias
de Conducir para vehículos automotores, se establece de la siguiente
forma:
• a) Clases “A”, “B” y “E” A partir de 0.70 grs./lt.
• b) Clases “C” y “D”. A partir de 0.50 grs./lt.