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UNIVERSIDAD TCNICA PARTICULAR DE LOJA La universidad catlica de Loja Escuela de Bioqumica y Farmacia TOXICOLOGA.

DETERMINACION DE ALCOHOL ETILICO


* Universidad

Buerneo L*, Guachn T* Ochoa S*,Prado M*, Sarango P*. no ciclo, Loja-Ecuador. Tcnica Particular de Loja, Escuela de Bioqumica y Farmacia, 10

OBJETIVO: Determinar cuantitativamente el nivel de alcohol etlico en sangre y evaluar el estado de la persona bajo el efecto de una determinada cantidad de etanol. FUNDAMENTO El alcohol es la principal droga de consumo por parte de la sociedad. Dos tercios de todos los abusos de substancias estn relacionadas con el alcohol. (Giannuzzi, 2006) El alcohol etlico es la sustancia psicoactiva de mayor consumo en el mundo. De acuerdo con el informe mundial sobre el consumo de drogas de la ONU del 2009, se estima que en el mundo cerca de 2.600 millones de personas lo consumen ya sea en forma ocasional, habitual, abusiva o adictiva. En Ecuador, se estima que el 80.7% de los estudiantes universitarios son consumidores habituales de alcohol etlico. El etanol es un alcohol de gran importancia toxicolgica dada su accin farmacolgica depresora del sistema nervioso central, que cuando se consume en forma continuada y frecuente produce efectos adversos agudos y crnicos en la salud humana. En intoxicacin aguda se pueden presentar alteraciones en el sistema gastrointestinal, endocrino y en el equilibrio cido bsico. (ura 2004) El consumo de etanol tambin se ha asociado con la presentacin de varias alteraciones sociales como incremento en los ndices de violencia intrafamiliar, violencia general, actos delictivos y accidentes de trnsito. (Epetto, 2002) Las vas de penetracin posibles de los alcoholes son la digestiva, la respiratoria, y la absorcin a travs de la piel, es absorbido a partir de los 30 a 60 minutos y hasta 180 minutos, mediante un mecanismo de difusin pasiva, pasando al torrente sanguneo. En ayunas, la absorcin es ms rpida en duodeno y yeyuno. Con el estmago lleno, la absorcin se retarda. El alcohol, una vez en el torrente sanguneo, pasa por el hgado, alcanzando su mayor concentracin alrededor de los 30 minutos en la circulacin sistmica(Epetto 2002). Durante la absorcin y la distribucin se va produciendo tambin la biotransformacin para luego producirse la biotransformacin como tal y finalmente la eliminacin. En el organismo, el alcohol sufre un proceso de oxidacin, que se desarrolla exclusivamente en el hgado, transformndose el etanol en acetaldehdo y posteriormente en acetato por medio de la cadena enzimtica. Los metabolitos se excretan por va pulmonar, va urinaria, por la saliva y por la leche en poca de lactancia. (Campos, 2005) Existen varios mtodos para determinar la concentracin de alcohol en un individuo como pruebas en sangre, orina y aliento, el utilizado en nuestra practica fue la determinacin de alcohol en sangre por el mtodo de microdifusin que se realiza en cmaras de Conway, las cuales poseen, en el compartimiento externo, muestra y agente liberador (CO3K2) y, en el interno, el agente atrapante Cr2O7K2 + H2SO4 0,01N. En este caso, se produce la captacin y oxidacin del

etanol hacia cido actico, forzndose la remocin completa del primer compuesto al cabo de un tiempo y temperatura previamente determinados, donde el dicromato, de color rojo anaranjado, oxida el etanol a acetaldehdo y es reducido, a su vez, a cromo (III), de color verde, para luego poder ser medida la absorbancia en un espectrofotmetro UV. (Giannuzzi, 2006)
Materiales y Metodologa:

Se extrajo 5.0 ml de muestra de sangre en un tubo heparinizado por medio de puncin venosa (se evit limpiar la zona de puncin con alcohol para evitar falsos positivos). Se contamin la muestra con 0,5ml de sangre junto a 0,5ml de coac (alcohol etlico). Se coloc en el compartimento central de la cmara de CONWAY, 2cm 3 de solucin de dicromato de potasio cido (solucin previament e preparada). Y en el compartimento externo en cambio se colocaron por goteo 1cm 3 de carbonato de potasio al 20%, e igualmente 1cm 3 de la muestra de sangre. Se cerr la cmara y se la coloc en la mufla a 40C. De la misma manera se realiz el mismo procedimiento con un estndar que contena 5% de alcohol etlico al 96%, y la misma proporcin de los reactivos anteriormente utilizados. Una vez que las tres cmaras permanecieron 20 minutos en la mufla a 40C, se las saco y se observo el cambi de color del compartimiento central. Por ltimo se tomo el contenido del compartimiento central de las cmaras y se colocaron cada una de estas muestras en probetas de 10ml, lavando varias veces el compartimiento central de la cmara con agua destilada con el fin de colocar toda la muestra en la probeta hasta aforar a 10 ml. Lo llevamos al espectrofotmetro HACH, colocando nuestras muestras en la s celdas de lectura, se ley la D.O. a 630 nm, encerando con el blanco de reactivos, antes de proceder a leer el estndar y la muestra de nuestro paciente.
Resultados: y

Cuando las cmaras salieron de la estufa, se observaron los siguientes colores:

Fig.1 Muestra de paciente. Compartimiento central color celeste

Fig. 2 Muestra estndar. Compartimiento central celeste .

La cuantificacin de las muestras en el espectrofotmetro dio los siguientes valores: VALOR Blanco 0nm Estndar 0,291nm Muestra de paciente 0,276nm

Clculos :

D.O.(muestra) x Conc.(St.) Conc. M = ---------------------------D.O (St.)

Conc. M = Conc. M= Conc. M=

0,291nm x 5% 0,276 1.455 0,276 5,27 %

D SCUS

Segn Cordoba (2000), La tasa de alcoholemia permitida en sangre por debajo de 0,5 g/L. si tomamos este valor como referencia, esto quiere decir que la muestra de nuestro paciente se encuentra con los niveles ligeramente elevados de alcohol etlico, al sobrepasar esta escala con 0,27%. Durante aos los estudios efectuados han demostrado que existe una relacin directa entre la conc entracin de alcohol en la sangre y algunos factores que pueden alterar o dar falsos positivos, por ejemplo Petkovi (2005) nos dice, que para poder diagnosticar a una persona con intoxicacin leve, la concentracin de alcohol en sangre debe estar entre 0,5 -1,5 g/L, es importante saber que estos valores van a depender de la edad del sujeto, su historial de consumo de alcohol y grado de desarrollo de tolerancia para el consumo de alcohol, tambin otros factores como las bajas temperaturas pueden favorecer la toxicidad del alcohol. As mismo, Campos (2005) manifiesta que la concentracin de alcohol vara dependiendo del metabolismo de cada persona y la cantidad de fluido que se encuentre en su organismo, es as que una persona que se encuentre ligeramente deshidratada la concentracin de alcohol en su sangre ser mucho ms elevada, es as que podra generar falsos positivos. Creemos que todos estos factores pueden ser los agentes causales de que en los resultados obtenidos con la muestra de nuestro paciente resu ltaran positivos, adems debemos tomar en cuenta que la muestra no fue tomada en el momento exacto de consumo de alcohol, as mismo se contamin la muestra con una cantidad adicional de alcohol etlico, pudiendo ser la razn de obtener falso positivo.
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CLUS

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A pesar de ser una droga legal, el etanol contribuye a ms muertes en los jvenes que el conjunto de todas las drogas ilegales. El consumo excesivo de etanol es el responsable o contribuyente de muchos accidentes de trfico, accidentes laborales, conductas violentas, suicidios, accidentes por fuego y ahogamientos

BIBL IOGRA FIA y y y y


y

EPETTO, Manuel. Toxicologa de Postgrado. Ed. Daz de Santos. Universidad de Sevilla Espaa. 2002 CORDOBA, Daro. Toxicologa. Editorial El Manual Moder no. Bogot. 2000 URA, Doris S. Gua Prctica de Toxicologa. UNIVALLE - COCHABAMBA. Bolivia. 2004 GIANNUZZI, Leda y FERRARI, Luis A. Manual de tcnicas de Laboratorio en Toxicologa y Qumica Forense. Ed. Praia. Argentina. 2006 CAMPOS, Manuel. Las nuevas tazas de intoxicacin etlica. Ed. Tectnos, Espaa, 2005, pg. 37. PETOVI, S. M., Simi, M. A. and Vuji, D.N. Postmortem production of ethanol in different tissues under controlled experimental conditions, J Forensic Sci. 50, pp. 204 -20., 2005.

Pginas Web:

 http://www.nhtsa.gov/planners/PRtoolkit09/linkfiles/glossary/glossary -sp.pdf  http://desastres.unanleon.edu.ni/pdf/2002/agosto/pdf/spa/doc14030/doc14030 -6.pdf  http://www.aebm.org/jornadas/farmacos/ETANOL.pdf