UNIVERSIDAD PRIVADA AUTONOMA

DEL SUR

Facultad de Farmacia y Bioquímica

TOXICOLOGIA FORENSE

Cromatografía capa fina

Implementación para el sembrado y elución de

muestras de extractos secos

DOCENTE: Q. F MANUEL MANCILLA

ALUMNA: APAZA QUISPE JEANETTE.

VIII Ciclo
AREQUIPA - PERU

2019
 PRACTICA 2 : IMPLEMENTACION DEL FUNDAMENTO PARA DOSAJE ETILICO
POR EL METODO DE SHEFTELL MODIFICADO

 OBJETIVOS
 Conocer uno de los procedimientos más utilizados en la investigación de alcohol etílico,
de interés médico legal.
 Determinar cómo hallar la concentración de alcohol etílico en muestras biológicas

I. INTRODUCCION

El alcohol, vocablo derivado del árabe ALKUL significa originariamente lo más fino, el más
delicado polvo, el cosmético de ojos. Su nombre químico es el de alcohol etílico (etanol)
(C2H5OH).

Se presenta en condiciones normales de presión y temperatura como un líquido incoloro e

inflamable con un punto de ebullición de 78ºC.

El alcohol es un líquido incoloro, que quema al paladar, con un peso específico de 0.79 (1 vol.
% =0.8 gr%), y un punto de ebullición de 78.3º,suele obtenerse por fermentación de azúcares,
disociados en alcohol y CO2, por acción de levaduras.

En su producción técnica, el alcohol se obtiene de la fécula, residuos de carbohidratos de la

producción azucarera (melaza) o a partir de sulfuro - alcalinos desprendidos en la fabricación
de la celulosa.

II.MARCO TEORICO

FARMACOCINÈTICA DEL ALCOHOL.

El alcohol se forma de modo endógeno en el organismo humano, aunque

desde luego, en cantidades muy reducidas.

Se estima que la máxima alcoholemia basal es de 0,015 0/00, estos valores son

tan bajos, que caen dentro del espectro del procedimiento y pueden ser, por ello despreciados.
El alcohol se absorbe relativamente de prisa por las mucosas, la absorción más lenta ocurre a
nivel de la mucosa gástrica y la más rápida a nivel de la mucosa del intestino delgado.

Tras su administración oral, el alcohol se absorbe en un 20% aproximadamente a través del

estómago y el resto pasa por el intestino delgado.

Todo aquello que retrasa el vaciado gástrico demora también la absorción del alcohol ingerido.

Pequeñas cantidades de alcohol pueden ser ya absorbidas al cabo de 10 minutos.- Un fuerte

consumo de tabaco y determinadas especies fuertes determinan el retraso de la absorción
(inhibición de la motilidad gástrica, pilorospasmo.

La absorción depende de la concentración del alcohol: los alcoholes más concentrados se

absorben más de prisa que los de menor concentración.

En cualquier caso, la pared muscular del estómago ve limitada su función por la acción de
líquidos cuya concentración supere 5%, con lo cual se demora el vaciado gástrico.

Con el estómago lleno, especialmente después de una comida rica en grasas, desciende
considerablemente la velocidad de absorción.-Dosis muy elevadas de alcohol provocan
mediante el pilorospasmo, el retraso del vaciado gástrico.

DISTRIBUCIÒN DEL ALCOHOL.

Una vez absorbido, el alcohol es distribuido desde la corriente sanguínea y por difusión a través
de los tejidos. Cuando todos los tejidos están bien vascularizados, sobreviene la rápida
distribución (difusión) dentro del agua total del organismo, lo que determina la caída acelerada
de la alcoholemia (caída de difusión).

La distribución del alcohol en cada uno de los tejidos individualmente considerados varía
mucho, y depende sobre todo de su contenido acuoso. Esto sólo es válido para la fase
postabsortiva.

Durante la fase de absorción, desempeña un papel considerable el grado de irrigación de cada

órgano. La concentración hemática de alcohol alcanza su punto máximo a los 30-60 minutos de
su administración oral. A continuación, la distribución se realiza de forma relativamente rápida y
regular por todo el organismo.
El alcohol atraviesa la placenta, lo que posibilita su paso al torrente circulatorio del feto. A los
60-90 minutos de la última ingesta de alcohol ha terminado su distribución por todo el cuerpo,
desde éste momento, la concentración de alcohol en sangre se corresponde ampliamente con
la de los tejidos. Esta depende de:

• La cantidad de alcohol.

• La velocidad de absorción.

• El peso corporal o de la cantidad de agua del organismo.

• La cantidad de eliminación del alcohol.

El contenido alcohólico del cerebro se corresponde fundamentalmente con la alcoholemia. El

ascenso y descenso de la concentración alcohólica en el líquido siguen, con cierta demora, a
los correspondientes en sangre, la concentración alcohólica más alta tiene lugar en la corteza
cerebral.

La concentración enòlica en el hígado es especialmente baja esto se debe al elevado

contenido hepático de alcohol deshidrogenasa (ADH). La concentración de alcohol en orina no
guarda ninguna relación constante con la alcoholemia. Durante la fase de absorción, es más
baja que en sangre. En la fase de eliminación, el alcohol urinario es superior a la alcoholemia,
desempeñando factores adicionales como: la diuresis y en el momento de la última micción.

METABOLISMO DEL ALCOHOL.

El alcohol ingerido produce sobre el organismo una acción DEPRESORA del Sistema Nervioso
Central, aunque la opinión corriente sostiene que a pequeñas dosis dicho fármaco es un
estimulante nervioso pues aumenta la actividad del sujeto, esa opinión es errónea puesto que
estudios cuidadosos han demostrado que el alcohol es un depresor y que la aparente
estimulación se debe a la LIBERACIÒN de los Centros Inferiores por depresión de los Centros
Corticales superiores, que normalmente ejercen una influencia inhibidora sobre los primeros, en
una palabra, se trata de una parálisis del freno. El efecto tóxico del alcohol, está en relación
directa por:

• Sexo de la persona.

• Edad de la persona.
• Cantidad de alcohol ingerido.

• Presencia de alimentos en el estómago de la persona que ha ingerido.

• Concentración de alcohol en la bebida que se ha ingerido.

• Tiempo en consumirse una cantidad específica de etanol.

La ingestión excesiva de alcohol durante periodos prolongados conduce a carencias en la

nutrición y en otras necesidades orgánicas, lo cual complica por la aparición de trastornos
psíquicos, complicaciones somáticas o la aparición de conflictos en sus relaciones
interpersonales, sus funciones sociales y laborales. Desarrollándose un alcoholismo crónico en
dicho sujeto, con la diferencia especial que en estos casos pueden llegar a desarrollarse
secuelas morbosas tales como:

• Hepatopatías.

• Hepatitis alcohólicas.

• Cirrosis hepáticas. Pancreatopatìas.

• Miocardiopatia alcohólica, etc.

DOSAJE ETILICO.- Concepto.

El dosaje etílico es el procedimiento químico que determina concentración de alcohol por litro
de sangre, expresada en gr/Lt, conocida como ALCOHOLEMIA. Si se sobrepasa el nivel de
alcoholemia, que en el Perú se ha fijado legalmente en 0,5 g/l (cinco decigramos de alcohol por
litro de sangre), se infringe la Ley. El dosaje etílico es una pericia toxicológica indispensable
para demostrar que los accidentes han ocurrido a consecuencia de la ingesta de alcohol. La
toma de muestras (sangre, orina y otros) debe hacerse en el menor tiempo posible, a fin de
obtener resultados que se ajusten a la realidad. Para la prueba de dosaje etílico, se puede
utilizar sangre, humor vítreo, vísceras etc. El humor Vítreo es una muestra muy utilizada en la
evaluación de la concentración de alcohol en casos de autopsia, por tener una concentración
cercana a la sangre. El análisis cuali-cuantitativo de alcohol etílico en sangre constituye en la
actualidad una de las prácticas más utilizadas en el ámbito de laboratorios forenses alrededor
del mundo. En los últimos decenios el alcohol ha sido investigado en una gran variedad de
matrices biológicas, tanto convencionales como no convencionales. Hemos podido confirmar
en la literatura internacional su análisis en sangre, orina, contenido estomacal y pared
estomacal, humor vítreo, fluido cerebroespinal, saliva, aliento, sudor, músculo, hígado (lóbulo
izquierdo y derecho), cerebro, pulmón, corazón, riñón (izquierdo y derecho) bilis, y testículos.
Sin embargo, la interpretación de los guarismos hallados permanece aún bajo debate en la
mayoría de las muestras mencionadas, cuando debe determinarse si un individuo estuvo bajo
los efectos del alcohol previo al óbito. La toma de muestra es, en nuestra opinión, el factor más
importante que se debe considerar, habiéndose comprobado en nuestro medio ser fuente de la
mayor parte de los errores que se cometen a la hora de interpretar el dato analítico. Muchos
toxicólogos forenses continúan repitiendo con insistencia el adagio: “el resultado de un análisis
solo puede ser tan bueno como el tipo y estado de la muestra recibida”. Probablemente la
alcoholemia es la determinación mejor conocida y muchos autores sugieren su determinación
inicial. No obstante, en revisiones recientes, algunos expertos opinan que la investigación en
otras matrices puede conducir a una mejor interpretación sobre el real grado de impregnación
en un individuo, pudiéndose detectar situaciones (especialmente en casos postmortales) que
llevarían a una errónea conclusión si solo se dispone de datos de una sola matriz.

III. MATERIALES Y REACTIVOS PROCEDIMIENTO CUANTITATIVO

a) Material de laboratorio

• Baño maría .

• Frascos de vidrio .

• Pipeta semiautomática.

• Tips (puntos de micro pipeta).

• Soporte para muestras .

b) Reactivos

• H2SO4 .

• K2CrO7

• H2O destilada.

IV. METODO Y FUNDAMENTO CUANTITATIVO.

Fundamento:

El análisis se basa en la acción oxidante de la mezcla sulfocromica (K2Cr2O7--- H2SO4) sobre

el alcohol etílico con formación de ácido acético y sulfato crómico, cuyo color varía del amarillo
al verde en forma proporcional a la concentración de alcohol etílico presente en la muestra, es
medido en el espectrofotómetro o en el fotocolorímetro a 420nm de longitud de onda o con filtro
azul respectivamente.
V. PROCEDIMIENTO PROCEDIMIENTO CUANTITATIVO .

A. Realizar la curva de calibración.

B. Preparación de la solución madre.

C. Preparación Sulfocromica: 1L = 1000Ml

VI. RESULTADOS PROCEDIMIENTO CUANTITATIVO.

Después que se retiró los frascos del baño maría se observara.

El resultado deberá dar una coloración azul verdosa en el frasco donde estará más
incrementado los valores de alcohol etílico. Esto significa que hay una formación de sulfato
cromoso (color azul verdoso), en forma proporcional a la concentración de alcohol existente en
la muestra problema, la cual es susceptible de ser medida por cualquiera de los métodos
fotométricos.

VII. DISCUSIÓN PROCEDIMIENTO CUANTITATIVO.

a.- Ventajas. Esta prueba se caracteriza por su sensibilidad, es decir mediante el Método de
Schefftel Modificado se puede medir concentraciones mínimas de alcohol. Esta prueba permite
la utilización de cualquier fluido orgánico (saliva, sangre, orina, humor vítreo).

Este procedimiento es de bajo costo, comparando con los métodos biológicos para determinar
alcohol. b.- Desventajas. Este método tiene el inconveniente de ser un análisis ciego, es decir
que no se puede distinguir entre alcohol etílico y otras sustancias con radical OH, como por
ejemplo el alcohol metílico. Requiere de profesionales experimentados, porque los resultados
pueden dar cantidades excesivas (8 gr/Lt), lo cual demuestra que es una muestra contaminada,
porque no existe organismo que pueda tolerar dichas concentraciones de alcohol etílico.

BIBLIOGRAFIA
1. Wamba Z., Ferrari L.A, Nieto RR, Arado MG, Colangelo CH, Nardo C, Sredcoff N and
Stoichevich S. Incidence of drugs of abuse and alcohol in suicides occurred in the province of
Buenos Aires in 1994, 1995 and 1996. Proceedings of 35thTIAFT Meeting. University of
Padova. Pp.638- 641 (1997).

2. Ferrari L.A. Alcohol etílico: Aspectos toxicológicos forenses, cálculos retrospectivos y

modificaciones postmortem. Bol. Asoc. Toxicol. Argent. 63, 9-15 (2004).

3. The Time Evolution of Drugs in the body, Journal of Chemical Education. 4. Manuel Litter.
Tratado de farmacología. 4ta Edición. El Ateneo.1971.