ALCOHOLEMIA

LABORATORIO DE TOXICOLOGIA

INSTITUTO NACIONAL DE MEDICINA

LEGAL Y CIENCIAS FORENSES.
2008
 ALCOHOL
ALCOHOL ETILICO:

 Liquido incoloro e inflamable, volátil.

 Miscible en agua y soluble en stes. orgánicos
 Punto de ebullición de 78 ºC.
 Su fórmula química es C2H5OH.
 Peso molecular:46,07 g/mol.
 Densidad:0,789 g/ml .
 Amplios usos: Licores, Industria cosmética,
Solvente orgánico, antiséptico.
[edar]
 BEBIDAS
ALCOHOLICAS
 Se obtiene bien por
fermentación a partir
de frutas o granos.

BEBIDA GRADO
ALCOHOL
Cerveza 4 - 6 % V/V
Vino 11 – 12 % V/V
Aperitivos 16 – 24 % V/V 3
BEBIDAS ALCOHOLICAS
 Por destilación (25 – 60 % V/V )

BEBIDA GRADO
ALCOHOL
Aguardiente 28 - 30 % V/V
Ron 30 – 40 % V/V
Brandy 30 - 40 % V/V
Ginebra 40 - 50 % V/V
Vodka 40 - 50 % V/V
Tequila 40 - 50 % V/V
Whisky 40 – 50 % V/V
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 El etanol es un depresor del Sistema
Nervioso central.
 Potencia su efecto cuando se consume
junto con otras sustancias tales como:
Sedantes
Hipnóticos
Anticonvulsivantes
Antidepresivos
Tranquilizantes
Otros depresores como los opiáceos.
 Produce tolerancia.
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 ASPECTOS
JUDICIALES

 Contravención de
Tránsito
 Delitos culposos por
conductas imprudentes
(Conducir y causar
lesiones u homicidio).
 Facilitador de la
comisión dolosa de
ilícitos.
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 FARMACOLOGIA DEL
ETANOL

FARMACOCINETICA

 ABSORCIÓN
 DISTRIBUCIÓN
 BIOTRANSFORMA
CIÓN
 ELIMINACIÓN
 ABSORCION

Las vías de ingreso más

conocidas son:
 Oral
 Pulmonar
 Percutánea
 Parenteral
 Otras (Vaginal)
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ABSORCION
DIFUSION PASIVA EN
BOCA Y ESOFAGO.

ABSORCION 20-25%
ESTOMAGO.

INTESTINO DELGADO
75-80%

ESTOMAGO VACIO:
DOSIS UNICA SE
ABSORBE EN UNA HORA
 ABSORCION
Este porcentaje de absorción se
puede influenciar por diversos
factores tales como:

 El contenido gástrico, la ingesta

simultánea de alimentos
especialmente grasas y carbohidratos,
disminuye la velocidad de absorción.
 La motilidad gastrointestinal.
 La calidad y composición del licor.

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TOXICOCINÉTICA DEL ALCOHOL.

PROCESO DE DISTRIBUCION
 ESTÓMAGO Y
DUODENO
 HÍGADO (VENA
PORTA)
 CIRCULACIÓN
SISTÉMICA
 SANGRE ARTERIAL
 CORAZÓN
 PULMONES
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 TOXICOCINÉTICA DEL ALCOHOL.

METABOLISMO

(95%) HEPATICO

 ALCOHOL, ACETALDEHÍDO, ÁCIDO

ACÉTICO

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ACETALDEHIDO

 Primer y principal metabolito del

etanol.
 PRODUCE VASODILATACION,
RUBEFACCION Y CEFALEAS:
“GUAYABO”
 Eliminación lenta.
 EFECTO ANTABUSE
(BLOQUEA LA ALDH).
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QUE ES LA ALCOHOLEMIA ??

 Examen o prueba de laboratorio que

determina el nivel de etanol en sangre total.
 Se expresa en mg/100mlsangre total.
 Nunca es igual a la embriaguez.
 Embriaguez: Es un estado de intoxicación
aguda con diversas manifestaciones Psíquica
y físicas, evaluadas y diagnosticadas
mediante un examen clínico forense por un
médico.

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CORRELACIÓN ENTRE
ALCOHOLEMIA Y
EMBRIAGUEZ
ALCOHOLEMIA EMBRIAGUEZ

Menor de 39 mg/% Negativo

40 a 99 mg/% Grado I
100 a 149 mg/% Grado II
≥ a 150 mg/% Grado III

Resolución 000414/2002 del Instituto Nacional de

Medicina Legal y Ciencias Forenses.

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El proceso metabólico del ETANOL:

ETANOL
etanol dehidrogenasa

ACETALDEHIDO
aldehído dehidrogenasa

ACIDO ACETICO

CO2 H2O
 FACTORES QUE MODIFICAN LA
CONCENTRACION DE ETANOL EN
SANGRE
1. DURACIÓN DEL PERIODO DE INGESTA
DEL LICOR
2. NATURALEZA DEL LICOR CONSUMIDO
3. PRESENCIA O AUSENCIA Y LA
NATURALEZA DE LOS ALIMENTOS EN
EL ESTÓMAGO
4. FACTORES FISIOLÓGICOS
 FACTORES QUE NO MODIFICAN
LA CONCENTRACION DE ETANOL
EN SANGRE
1. MEDICAMENTOS
2. FRUCTUOSA: DESEMBRIAGANTES
3. ACTIVIDAD MUSCULAR
4. SUEÑO E INCONCIENCIA
5. VÓMITO
6. PÉRDIDA DE SANGRE
7. OTROS FACTORES PATOLÓGICOS Y
FISIOLÓGICOS
MÉTODOS DE
LABORATORIO
PARA LA
DETERMINACIÓN
DE ALCOHOLEMIA
QUE ES LA ALCOHOLEMIA ??
 Examen o prueba de laboratorio que
determina el nivel de etanol en sangre
total.
 Se expresa en mg/100mlsangre total.
 Nunca es igual a la embriaguez.
 Embriaguez: Es un estado de intoxicación
aguda con diversas manifestaciones Psíquica
y físicas, evaluadas y diagnosticadas
mediante un exámen clínico forense por un
médico.
 ALCOHOLEMIA
Diagnostico médico legal de la embriaguez:
Se evalúan 5 puntos:
Halitosis alcohólica.

Prueba de nistagmus postural. (Alcoholemias de 60mg%).

Prueba del dedo-nariz.

Prueba del polígono de sustentación.

Prueba del Cuatro.

Con 3 o más pruebas positivas se Dx Embriaguez Aguda.

 RES. 414/2002 DEL
INMLCF. ART 1
PARÁGRAFO: De las maneras de determinar la alcoholemia:
La alcoholemia se puede determinar de manera directa a
través de la medición de etanol en sangre por diversos
métodos de laboratorio, preferiblemente por cromatografía de
gases. La alcoholemia también se puede determinar de
manera indirecta midiendo la cantidad de etanol en aire
espirado, para lo cual se podrá utilizar un equipo tipo
alcohosensor que cuente con un dispositivo de registro.
Cualquiera que sea la metodología empleada para determinar
la alcoholemia, debe demostrarse la aplicación de un
sistema de aseguramiento de la calidad que incluya
aspectos relacionados con la calibración del equipo, la
idoneidad del personal que lo opera, el método
utilizado y los demás componentes de este sistema.
CORRELACIÓN ENTRE
ALCOHOLEMIA Y EMBRIAGUEZ
ALCOHOLEMIA EMBRIAGUEZ

Menor de 40 mg/% Negativo

40 a 99 mg/% Grado I
99 a 149 mg/% Grado II
Mayor de 150 mg/% Grado III

Resolución 000414/2002 del Instituto Nacional

de Medicina Legal y Ciencias Forenses.
 METODOS ANALITICOS PARA LA
DETERMINACION DE ALCOHOLEMIA

 METODOS BASADOS EN
PROCESOS DE OXIDACION-
REDUCCION.
 METODO ENZIMATICO.

 METODOS DE CROMATOGRAFIA
DE GASES.
 METODOS BASADOS EN PROCESOS
DE OXIDACIÓN-REDUCCIÓN

Se basan en la capacidad Re-dox del alcohol

C-C-OH + K2Cr2O7 K2Cr2O4

Dicromato de K Dicromato de K
Amarillo Verde- Azul
 METODOS BASADOS EN PROCESOS DE
OXIDACIÓN-REDUCCIÓN

• Se pone la muestra de sangre en la

cámara externa de la celda de Conway.
• El alcohol que hay en la muestra
presenta difusión y es oxidado a ácido
acético en la segunda cámara.
• Luego se mide o valora el oxidante que
quedó sin reaccionar con el alcohol.
 METODOS BASADOS EN PROCESOS
DE OXIDACION-REDUCCION
 METODO DE CONWAY: Mide visualmente el
cambio de color del dicromato al reaccionar
con el alcohol.
 METODO DE FELDSTEIN: determina la
absorbancia del reactivo oxidante a 450 nm
 METODO DE WINICK: Valora
químicamente el dicromato que no se
consumió por que no reaccionó con el
alcohol.
 ALCOHOLEMIA
Métodos de Laboratorio para
calcularla:
Los métodos Red-ox son inespecíficos para los volátiles

Falsos positivos con osmolaridad (hipernatremia,

hiperglicemia o hipernatremia).
Falsos positivos con metanol, cetona y acetaldehído.

El método ideal es la
Cromatografía gaseosa
 MÉTODO ENZIMÁTICO

 Valora de una manera indirecta la

cantidad de enzima alcohol
deshidogenasa consumida por el
alcohol presente en la muestra.
 Este método presenta
interferencias por que la alcohol
deshidrogenasa no es específica
del etanol.
TAMIZAJE EN MUESTRAS DE
SANGRE Y HUMOR VÍTREO.

Prueba colorimétrica para

detectar la presencia de
sustancias volátiles reductoras. 30
 CROMATOGRAFÍA DE GASES

 Es un proceso que permite separar los

componentes de una mezcla.
 Se requiere un cromatógrafo de gases,
que consta de:
– Un inyector
– Una columna cromatográfica
– Un detector
– Un regisrador o integrador.
METODOS UTILIZADOS
EN EL INML Y CF PARA
LA DETERMINACION DE
LA ALCOHOLEMIA
PRUEBA DE TAMIZAJE
Feldstein y klenshoj:

Es un prueba de
reacción colorimétrica
que permite detectar
sustancias volátiles
reductoras entre ellas
el Etanol, Metanol,
Isopropanol,
Acetaldehído y
Acetona.
 TAMIZAJE EN MUESTRAS DE
SANGRE Y HUMOR VíTREO.

Prueba colorimétrica para detectar la presencia de sustancias volátiles

reductoras.
 CROMATOGRAFIA DE
GASES
 Técnica instrumental
que permite la
separación de los
componentes de una
mezcla y la identificación
de los mismos.

 Técnica utilizada:
Cromatografía de gases
con automuestreador de
volátiles (Head-Space) y
de tector de Ionización
de llama de Hidrógeno
(FID).
AUTOMUESTREADOR DE
VOLATILES. (HEAD SPACE)
Dilutor Hamilton
MICROLAB PLUS 500
 Diagrama de un
cromatógrafo de gases

esquema
 COLUMNA
CROMATOGRAFICA

HORNO
SEPARACION EN LA COLUMNA
SEPARACION CRO
 DEFINICIÓN: Dispositivo
diseñado para medir la cantidad
de alcohol en sangre en forma
indirecta a través del aire espirado

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 PRINCIPIO DE LA MEDICIÓN:
1. Relación Concentración de Etanol
en sangre : Concentración de
Etanol en el aliento: 2300 : 1

2. En proceso de respiración:

Exhalación: Etanol (vapor) en

Sangre Pulmones
44
ASEGURAMIENTO
DE LA CALIDAD
EN LA PRUEBA DE
ALCOHOLEMIA
EMPLEANDO
ALCOSENSORES
 ASEGURAMIENTO
DE LA CALIDAD
Programa de actividades formuladas
sistemáticamente para identificar,
monitorear y controlar los factores
que pueden afectar la prueba
asegurando que los resultados sean
correctos.

46
ASEGURAMIENTO DE LA
CALIDAD EN MEDICIONES CON
ALCOHOSENSOR

 Equipos
 Métodos
 Muestras
 Analistas

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 ASEGURAMIENTO DE LA
CALIDAD EN MEDICIONES CON
ALCOHOSENSOR: EQUIPOS

 Hoja de vida.
 Programa de control metrológico.
 Condiciones de transporte.
 Condiciones de operación.
 Blanco.

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 ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD EN
MEDICIONES CON ALCOHOSENSOR:
EQUIPOS
 Procedimiento de
operación.
 Procedimiento de
calibración.
Registros:
informes de
mantenimiento y
calibración,
chequeo antes de
operación.
49
 ASEGURAMIENTO DE LA
CALIDAD EN MEDICIONES CON
ALCOHOSENSOR
METODO:
 Precauciones: chicles,
vómito, eructos,
prótesis, inhaladores,
enjuagues bucales,
hemorragias, piercing.
 Condiciones especiales:
reflujo
gastroesofágico, EPOC.

50
 ASEGURAMIENTO DE LA
CALIDAD EN MEDICIONES CON
ALCOHOSENSOR

EJECUCIÓN DE LA PRUEBA
 Fase pre-analítica:
preparación del sujeto
(Entrevista).
 Fases analítica: chequeo
inicial
– Blanco.

– Duplicados.
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 ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD
EN MEDICIONES CON
ALCOHOSENSOR

EJECUCIÓN DE LA PRUEBA
 Los 15 minutos de espera (Boca
alcohólica)
 Tiempo entre los duplicados (15 min).

 Cantidad de muestra.

 No hay contramuestras ni remanentes.

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ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD EN
MEDICIONES CON ALCOHOSENSOR

ANALISTAS
 Recomendaciones sobre
la administración del
programa de
capacitación y
entrenamiento.
 Perfil requerido.

 Habilidades requeridas.

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 ERRORES MÁS
FRECUENTES
 Falta de registros impresos,
especialmente de los resultados.
 Falta de análisis del duplicado.
 Falta de calibración del equipo.
 Falta de calificación del
operador.
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 CADENA DE
CUSTODIA EN LA
PRUEBA DE
ALCOHOLEMIA
 CADENA DE CUSTODIA
 Conjunto de
procedimientos orientados
a conservar la identidad e
idoneidad de los elementos
objeto de estudio y
garantizar que sobre ellos
no se realicen
alteraciones, adiciones o
sustracciones, ni se
produzca deterioro alguno
durante la recolección,
empaque, envío y análisis
de forma tal que los
estudios analíticos se
desarrollen sobre
elementos con
características semejantes
a los recogidos en el lugar
donde se encontraron.
DONDE INICIA Y DONDE
TERMINA?

 Inicia con el funcionario que recolecta en la

escena del crimen, los ELEMENTOS
MATERIALES DE PRUEBA..
 Finaliza con el juez de la causa y los
diferentes funcionarios jurisdiccionales.
A QUE ELEMENTOS SE LE DEBE
APLICAR?
A todos los elementos materiales de
prueba, recolectados, así como a las
actas u oficios que los acompañan.
CADENA DE CUSTODIA
 PROCEDIMIENTOS BÁSICOS

 * La solicitud (oficio petitorio) debe

contener:
1. Cuestionario pertinente.
2. Petición clara y concreta del tipo de
información que desea obtener a partir
de los elementos de prueba.
CADENA DE CUSTODIA
 PROCEDIMIENTOS BÁSICOS
* La solicitud (oficio petitorio) debe
contener:
3. Relación de cada una de las
muestras remitidas, empleando
su número, descripción del
empaque y el contenido.
CADENA DE CUSTODIA
 PROCEDIMIENTOS BASICOS
4. Información adicional que relacione:
HECHOS MUESTRA.
Para orientar al perito (analista).
5. Nombre y teléfono de la entidad
solicitante; el cargo y la firma de la
autoridad que solicita el estudio
pericial o analítico.
CADENA DE CUSTODIA
PROCEDIMIENTOS BÁSICOS

6. Embalar utilizando
métodos adecuados,
para garantizar la
conservación del
Elemento Material
de Prueba
CADENA DE CUSTODIA
PROCEDIMIENTOS BÁSICOS

7. Rotular en lugar visible y

tomar las medidas
necesarias para proteger
el Elemento Material de
Prueba de posibles
adulteraciones o
sustracciones.
 MUESTRAS APTAS PARA EL
ANALISIS CUANTITATIVO

 SANGRE TOTAL:
Tubo tapón gris, El volumen debe ser mínimo
la mitad de la capacidad del tubo y de vaso
periférico.
 HUMOR VITREO : Tubo tapón gris.
 HEMATOMA, HIGADO,
MUSCULO:
Frasco plástico de polipropileno, boca ancha,
tapa rosca.
 MUESTRAS NO APTAS
 Sangres coaguladas.
 Sangres que lleguen mal tapadas o con fisuras
en el envase.
 Muestras que lleguen sin marcar.
 Muestras putrefactas o en descomposición.
 Humor vítreo contaminado con Sangre, de color
amarillento, con partículas o manchas oscuras.
 Muestras que lleguen sin solicitud de autoridad
competente o con solicitud sin firma.