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Practica #3 .

21 Marzo 2023

Curvas de calibración a partir de permanganato de


potasio por espectrofotometría.
Integrantes: Corrales Noel, Cota José Alberto, Macías Anahí, Romero
Daniel, Valenzuela Miriam.
Resumen:
En esta práctica realizaremos una curva de calibración con los datos obtenido de las
concentraciones que se analizarán, como muestra se utilizarán 5 muestras de distintas
concentraciones de permanganato de potasio. Ya obtenidas las muestras usaremos el
espectrofotómetro UV-VIS para calcular la cantidad de luz absorbida por las concentraciones.

Introducción. registra la respuesta instrumental en cada


concentración. Para más exactitud y
Una curva de calibración es la representación gráfica comprender el error, se puede repetir la
que relaciona una señal instrumental en
función de la concentración de un analito y respuesta en cada concentración por lo
define un intervalo de trabajo en el cual, los que se obtiene una barra de error. Los
resultados a informar tienen una precisión datos entonces se caben con una función
por lo que se pueden predecir las
y exactitud conocida que ha sido
concentraciones desconocidas. Por lo
documentada en la validación de cada
general la respuesta es lineal, sin embargo,
método.
una curva se puede hacer con otras
La etapa de calibración analítica, se realiza funciones como la función es conocida. La
mediante un modelo, que consiste en curva de calibración puede utilizarse para
encontrar la recta de calibrado (expresión calcular el límite de detección y límite de
matemática) que mejor ajuste a una serie cuantificación. [2]
de “n” puntos experimentales, donde cada
Un espectrofotómetro mide la cantidad de
punto se encuentra definido por una
variable “x” (variable independiente, energía radiante absorbida por las
generalmente concentración del analito de moléculas de una muestra en función de
interés) y una variable “y” (variable las longitudes de onda específicas. La
dependiente, generalmente respuesta energía absorbida o absorbancia (A) y la
instrumental). La recta de calibrado se longitud de onda (λ) [3]
encuentra definida por una ordenada al
origen (b) y una pendiente (m), mediante la
ecuación: y = mx + b. [1]
Las curvas de calibración se utilizan para
comprender la respuesta instrumental a
un analito y predecir la concentración en
una muestra desconocida. Por lo general un
conjunto de muestras estándar se hacen a
diferentes concentraciones con una gama La espectroscopia ultravioleta-visible es un
que incluye al desconocido de interés y se tipo de espectroscopia de absorción en la
que se ilumina una muestra con rayos

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Practica #3 . 21 Marzo 2023

electromagnéticos de varias longitudes de RESULTADOS:


onda en el rango ultravioleta (UV) y visible
Para saber la cantidad de permanganato
(VIS). Según la sustancia, la muestra
de potasio calculamos con la siguiente
absorbe parcialmente los rayos de luz
formula cada una de estas
ultravioleta o visible. El resto de la luz, es
concentraciones
decir, la luz transmitida, se registra como
una función de la longitud de onda • 0.0008M
mediante un detector adecuado. El
• 0.001M
detector produce entonces el espectro UV-
VIS único de la muestra (también conocido • 0.0015M
como el “espectro de absorción”). [4] • 0.002M
• 0.0025M
La transmitancia (T) de una sustancia en
solución es la relación entre la cantidad de
luz transmitida que llega al detector una
vez que ha atravesado la muestra, It, y la FORMULA
cantidad de luz que incidió sobre ella, Io, y
se representa normalmente en tanto por
ciento: % T = It/Io x 100 Desarrollamos la formula con las
diferentes concentraciones dadas:
La transmitancia nos da una medida física
de la relación de intensidad incidente y
transmitida al pasar por la muestra. La
relación entre %T y la concentración no es
lineal, pero asume una relación logarítmica
inversa.
La absorbancia (A) es un concepto más
relacionado con la muestra puesto que nos
indica la cantidad de luz absorbida por la
misma, y se define como el logaritmo de 1/T,
en consecuencia: A = log 1/T = -log T = -
log It/ Io.

Cuando la intensidad incidente y


transmitida son iguales (Io = It), la
transmitancia es del 100% e indica que la
Recolección de datos
muestra no absorbe a una determinada
longitud de onda, y entonces A vale log 1
= 0. [5]

Materiales:
• 5 matraces de 50 ml
• Pizeta
• Pipeta de 5 ml
• Prepipeta
• Solución preparada de permanganato de
potasio

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Practica #3 . 21 Marzo 2023

Conclusión:
Observando la curva de calibración nos
damos cuenta de que tuvo un
comportamiento normal, ya que se
muestra como aumenta la concentración
junto con la absorbancia.
En conclusión, las curvas de calibración
nos ayudan a reconocer la concentración
del analito y al momento de analizar la
muestra en el espectrofotómetro, ya que
de ahí generamos los datos necesarios
para conocer la absorbancia de la
muestra para la curva de calibración.

Curva de calibración Referencias


[1]Chile, A. L. (2017). Análisis químico, medir es
La absorbancia fue obtenida mediante el
comparar. Área Salud y Seguridad.
espectrofotómetro.
[2] Espejo, M. (Diciembre de 2016).
Utilizamos el espectrofotómetro a 400nm
Universidad de Sevilla. Obtenido de
en nuestras 5 muestras de permanganato
https://idus.us.es/bitstream/handle
de potasio (KMnO4) a diferentes
/11441/54518/IMPORTANCIA%20DE%2
concentraciones y en una sustancia
0LA.pdf
desconocida.
[3] Laboratorio del Dr. B. Jill Venton -
En la solución de las muestras fuimos
Universidad de Virginia. (s.f.).
agregando más soluto en cómo podemos
Obtenido de
observar en el gráfico de la curva de
https://www.jove.com/es/v/10188/ca
calibración va en aumento, ya que la
libration-curves?language=Spanish
concentración de KMnO4 aumenta en cada
analito. [4] Mettler Toledo. (s.f.). Obtenido de
Aplicaciones de UV-VIS:
Muestras: https://www.mt.com/mx/es/home/
applications/Application_Browse_L
aboratory_Analytics/uv-vis-
spectroscopy/uvvis-spectroscopy-
explained.html
[5] Nieves, A. (s.f.). Departamento de
Bioquímica y Biología Molecular.
Obtenido de
https://www.uco.es/dptos/bioquimi
ca-biol-
mol/pdfs/08_ESPECTROFOTOMETRIA.
pdf

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