TEMA 5. ENZIMAS.

Las enzimas son sustancias de naturaleza proteica que aceleran las reacciones.

Producción de enzimas por técnicas recombinantes

 Capacidad de producción más elevada que en sistemas naturales.

 Posible toxicidad de las enzimas debido a su sobreexpresión en medios naturales.
 Reducción de los riesgos higiénicos (producción más limpia).
 Incremento de la seguridad del proceso (Fermentación de organismos S1)
 Más baratas y respetuosas con el medio ambiente.
 Optimización de la actividad enzimática más fácil para usos técnicos.

Enzimas por técnicas recombinantes, por ejemplo, la modificación del almidón para obtener el
jarabe de fructosa (HPCS). Un producto que es lo que va a edulcorar las bebidas gaseosas.

1. Almidón en fructosa, que requiere el uso de alpha- amilasa y glucoamilosa para romper las
moléculas y después de la glucosa isomerasa.
pH ácidos y temperaturas elevadas. Estas enzimas son más concretas y son introducidas en el
proceso.

El jarabe de fructosa es mucho más endulzande, facil de transportar al ser poco viscosa, más facil de
producir y barato que la sacarosa. También se conserva más tiempo.

La hidrólisis ácida del almidón se está reemplazando por procesos enzimáticos:

 La alpha-amilasa descompone la amilosa en unidades de D-glucosa.

 La glucoamilasa descompone las unidades de D-glucosa, los oligosacáridos provenientes de
la acción de la alfa amilasa sobre la amilopectina.
MUTAGÉNESIS DIRIGIDA

El cambiar un aminoácido va a cambiar la conformación especial, que si no se modifica el centro

activo a a seguir la misma acción. Se puede modificar el DNA para que produzca la misma proteína
pero que puede tener unas condiciones de resistencia mejores.

Los aminoácidos del centro activo no se pueden modificar porque sino la enzima no funcionaría.

Con esto se cambiaron varios aminoácidos con las que se observó que se consiguió que la proteína
fuese más resistente, en diferente medid según mas mutaciones realizadas.
Hoy en día cada año las enzimas son más resistentes, aunque esas modificaciones realizadas no son
públicas.

Para degradar el almidón también se necesita glucoamilasa.

No toda la glucosa se convierte en fructosa, aproximadamente el 50%.

SACARIFICACIÓN DEL PAPEL

También se puede obtener glucosa a partir de celulosa. En est caso se necesitan 4 enzimas y los
costes son bastante más altos que con el almidón.
1. Endoglucanasa
2. Exoglucanasa
3. Celobiohidrolasa
4. Beta glucosidasa

Las enzimas también se utilizan para mejorar los piensos para animales.
Los piensos están enriquecidos con fitasa que le permite degradar los grupos fosfato.

INMOVILIZACIÓN DE BIOCATALIZADORES

La inmovilizacion de enzimas o celulas es un proceso en el que los localizamos en un lugar concreto.

El atrapamiento puede ser en polímeros.
La inmovilización de enzimas es un proceso en el que se confina o localiza una enzima en una región
definida del espacio, para dar lugar a formas insolubles que retienen su actividad catalítica y que
pueden ser reutilizadas repetidamente.
Proceso por el cual se restringen, completa o parcialmente, los grados de libertad de movimiento de
enzimas, orgánulos, células, etc por unión a un soporte.

Ventajas
 El aumento de la estabilidad de la enzima
 La posible reutilización del derivado, por lo que disminuyen los costes del proceso.
 La posibilidad de diseñar un reactor enzimático de fácil manejo y control, adaptado a la
aplicación de la enzima inmovilizada.
Inconvenientes
 La alteración de la conformación de la enzima respecto a su estado nativo.
 La gran heterogeneidad del sistema enzima-soporte donde pueden existir distintas
fracciones de proteínas inmovilizadas con un diferente número de uniones al soporte.
 Siempre suele haber una pérdida de actividad de la enzima durante la inmovilización.
 El biocatalizador es mas caro que la enzima nativa
El alginato es soluble en agua, y una vez que se solubiliza es estable. En presencia de iones calcio
solidifica instantánea. Vamos a tener un cultivo de sacaromices cerivisae, levadura para hacer pan.

Tenemos un recipiente con el alginato disuelto en agua y lo vamos a suspender con sacaromices. Por
otro lado hacemos una disolución de cloruro cálcico y con una jeringilla vamos a echar el alginato
con cerevisae en la disoluciión de CaCl2.

Con las células inmovilizadas no se pueden reproducir.

Al dividirse la célula de la levadura por gemación. Aproximdamete la célula se reproduce unas 7
veces y luego se muere. Si no se puede reproducir al estar inmovilidad va a durar más tiempo.

En un matraz con azucar vamos a echar sacaromices disuelto y en otro las sacaromices
inmovilizadas.

Al poner un globo en la boca del matraz. Como se prodece tambiẃen co2, se sabe al ser equimolar la
cantidad de etanol que se produce
Las células que se inmovilizan son mucho más facil de recuperar. Si las células están sueltas se
necesita un procedimiento más complejo. inmovilizadas, las células tienen menor disponibilidad de
sustrato.