INTRODUCCIN

Las enzimas son biocatalizadores pero tambin pueden considerarse como aditivos altamente especficos para aplicaciones en alimentos.

EL MICROORGANISMO
Seleccin del microorganismo adecuado para el desarrollo de un sistema de produccin de enzimas. 1. El microorganismo no debe ser patgeno, ni estar asociado con la produccin de toxinas.

Salmonella

Escherichia coli

Staphylococcus aureus

EL MICROORGANISMO
2.

Se prefiere que la enzima sea producida extracelularmente.

En los procesos de recuperacin un extracto crudo de una enzima intracelular, contiene al menos 1500 enzimas y protenas mientras que el de una enzima extracelular contiene solo unas cuantas.

EL MICROORGANISMO
3.

La enzima debe ser producida con altos rendimientos.

El desarrollo del microorganismo implica algn tipo de mutacin clsica con rayos UV o bien agentes nitrogenados.

EL MICROORGANISMO
4.

El costo de produccin debe ser razonable.

Implica que el microorganismo pueda crecer rpidamente, en sustratos grado industrial, consumindolos totalmente y con pocos requerimientos especficos. Se prefiere a las enzimas constitutivas con respecto a las que requieren algn tipo de inductor en el medio

EL MICROORGANISMO
5.

La seleccin del microorganismo puede hacerse igualmente en trminos de las caractersticas deseadas para la enzima.

Ejemplo: la seleccin de microorganismos termoflicos con objeto de obtener enzimas termoestables.

MECANISMOS DE BIOSNTESIS

Para el control de sntesis de enzimas, las clulas microbianas disponen de los mecanismos de induccin y represin.

1.

Enzimas inducibles.
Requieren de una sustancia, generalmente el sustrato de la enzima, como inductor.

MECANISMOS DE BIOSNTESIS
ENZIMA

Algunos ejemplos de enzimas inducibles.

MICROORGANISMO INDUCTOR

Dextransacarasa Dextranasa -amilasa

Leuconostoc mesenteroides Penicillium funiculosum Bacillus subtilis

Sacarosa Dextranas Dipalmitato de isomaltosa Almidn Maltosa Naringina Maltosa Monopalmitato de sacarosa Xilosa

Naringinasa Pululanasa Invertasa Glucosa isomerasa

Aspergillus niger Klebsiella pneumoniae Pullularia pullulans Bacillus coagulans

Pectinasa
Tirosinasa

Aspergillus niger
Neurospora crassa

Pectina
D-tirosina, L-tirosina

MECANISMOS DE BIOSNTESIS
2.

Mecanismos de represin.
Represin catablica. Inhibe la sntesis de enzimas (inducibles) por intermediarios producidos en el rpido catabolismo de la fuente de carbono.

Retrorepresin, Reprime la sntesis de enzimas mediante la presencia de productos finales de biosntesis.

MECANISMOS DE BIOSNTESIS enzimas sujetas a represin Ejemplos de algunas

catablica
ENZIMA MICROORGANISMO REPRESOR

Invertasa Lactasa Dextransacarasa Celobiasa Glucosa isomerasa Proteasas Catalasa -amilasa

Neurospora crassa Eschericchia coli Leuconostoc mesenteroides Tricodema viride Streptomyces phaechromogenes Bacillus subtilis Rhodotorula mucilaginosa Bacillus stearothermophilus

Glucosafructosa Glucosa Sacarosa Celobiosa Glucosa Glucosa Glucosa Fructosa

MECANISMOS DE BIOSNTESIS
3.

Mejoramiento gentico.
Una vez conocidos los mecanismos para la produccin de una enzima, se podr mejorar la productividad a travs de procesos de mutacin y seleccin o bien mediante el adecuado manejo del medio ambiente.

MECANISMOS DE BIOSNTESIS
Estrategias en la sobreproduccin de enzimas microbianas. ENZIMAS INDUCIBLES
Obtencin de mutantes con necesidades reducidas o nulas de inductor

ENZIMAS SUJETAS A AUTORETROREPRESIN

Evitar la presencia de productos finales en el medio de cultivo.
Evitar la acumulacin de producto final mediante la adicin de algn inhibidor de la ruta metablica.

Eliminacin de los productos finales (dilisis, ultrafiltracin) Obtencin de mutantes no sujetos a represin por productos finales.

ENZIMAS SUJETAS A REPRESIN CATABLICA

Evitar el uso de la fuente de carbono que ocasiona la represin, sustituyndola por otra de ms lenta asimilacin.
Limitar el crecimiento del microorganismo: cultivo o fermentacin retroalimentada.

Obtencin de mutantes resistentes a la represin catablica.

MECANISMOS DE BIOSNTESIS
4.

Actividad enzimtica.
Cuando el producto de la fermentacin es una enzima, la produccin se cuantifica en trminos de la actividad cataltica

disponible.

unidad de actividad la cantidad de enzima que transforma

1 micromol de sustrato por minuto bajo condiciones definidas.

La cintica se describe mediante el modelo de Michaelis Menten:

vi = Vmx S Km + S

MECANISMOS DE BIOSNTESIS de actividad enzimtica basada en una Algunos ejemplos de definicin

consecuencia de la accin de la enzima.

ENZIMAS METODOLOGIA
Proteasas Capacidad para coagular la leche. Liberacin de algn aminocido especfico soluble en cido tricloroactico (tirosina) Accin sobre pelculas fotogrficas (cualitativas).
Prdida de la capacidad de formacin de complejos coloridos entre yodo y amilosa. Disminucin de la viscosidad inicial. Incremento del poder reductor. Capacidad de clarificar jugo de manzana. Disminucin de la viscosidad inicial. Incremento en el poder reductor. Disminucin del precipitado alcohlico del medio de reaccin. Disminucin de la viscosidad inicial. Incremento en el poder reductor. Solubilizacin de papel.

-amilasas

Pectinasas

Celulasas

CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS PROCESOS DE FERMENTACIN PARA LA PRODUCCIN DE ENZIMAS MICROBIANAS.

En trminos generales las fermentaciones pueden llevarse a cabo de dos formas: en cultivo semislido o en cultivo sumergido.

1.

Tcnicas de fermentacin en cultivo semislido.

Comnmente llamado fermentacin semislida o sistema Koji.

Ventajas.
Resulta en altas productividades por unidad de volumen de fermentacin. Menores consumos energticos. Baja contaminacin por aguas residuales.

CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS PROCESOS DE FERMENTACIN PARA LA PRODUCCIN DE ENZIMAS MICROBIANAS. Desventajas: Difcil control en las condiciones ambientales que influyen en la produccin (gradientes y variaciones de pH,
temperatura, humedad, etc.)

Dificultades

as como el frecuentemente limitada por fenmenos de transferencia de masa.

para

la

esterilizacin,

ser

NOTA:

El salvado de trigo, es el sustrato mas utilizado por su alto contenido de nutrimentos, as como su estructura fsica.

CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS PROCESOS DE FERMENTACIN PARA LA PRODUCCIN DE ENZIMAS MICROBIANAS. Algunos ejemplos de enzimas producidas por cultivos semislidos. ENZIMA MICROORGANISMO SUSTRATO

Amiloglucsidas -amilasa
Celulasas Proteasas Pectinasas

Rhizopus sp. Aspergillus oryzae Aspergillus niger Trichoderma viride Aspergillus niger Aspergillus oryzae Aspergillus soyae

Salvado de trigo Salvado de trigo Arroz Salvado de trigo Salvado de trigo

Salvado de trigo

CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS PROCESOS DE FERMENTACIN PARA LA PRODUCCIN DE ENZIMAS MICROBIANAS.

2.

El cultivo sumergido.
Los procesos de fermentacin en cultivo sumergido, son aquellos en los que nutrimento y microorganismo se encuentran en fase acuosa.

Ventajas:

La homogeneidad que establecer en el cultivo.

es

posible

No existen gradientes de temperatura, pH o de concentracin de nutrimentos en el sistema.

CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS PROCESOS DE FERMENTACIN PARA LA PRODUCCIN DE ENZIMAS MICROBIANAS.

Temperatura y pH de fermentacin.

Generalmente, la T y pH de ptimo crecimiento del m.o. productor, coinciden con los de produccin de la enzima (sin
embargo, la T de mximo crecimiento puede no ser la adecuada dada la estabilidad de una cierta enzima).

1.
2. 3. 4.

En trminos de pH es necesario distinguir entre 4 valores, que no necesariamente coinciden: El pH de mximo crecimiento del microorganismo productor. El pH de mxima produccin de la enzima. El pH de mxima estabilidad de la enzima. El pH de mxima actividad de la enzima.

CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS PROCESOS DE FERMENTACIN PARA LA PRODUCCIN DE ENZIMAS MICROBIANAS.

El medio de cultivo.

Necesidad de inductores, seleccin de la fuente de carbono tomando en cuenta los mecanismos de represin catablica, formulacin de un medio con importante poder amortiguador, etc. En el caso de algunas enzimas, se requiere de ciertos iones en el medio de fermentacin para una eficiente produccin. En algunos casos estos iones juegan un papel importante en la actividad (metaloenzimas) y en otros en la estabilidad.

CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS PROCESOS DE FERMENTACIN PARA LA PRODUCCIN DE ENZIMAS MICROBIANAS.

Algunos ejemplos de medios de cultivo para la produccin de enzimas, donde la fuente de carbono es sustrato de la enzima.

ENZIMA
-amilasa
Celulasas Dextranasa Glucoamilasa Dextransacarasa Naringinasa Lactasa

FUENTE DE CARBONO
Almidn
Celulosa Dextrana Almidn Sacarosa Naringina Lactosa

MICROORGANISMO
Bacillus subtilis
Trichoderma viride Penicillium funiculosum Aspergillus niger Leuconostoc mesenteroides Aspergillus niger Kluyveromyces lactis

Levansacarasa
Glucosa oxidasa

Sacarosa
Glucosa

Bacillus subtilis
Aspergillus niger

CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS PROCESOS DE FERMENTACIN PARA LA PRODUCCIN DE ENZIMAS MICROBIANAS.

Se prefieren como fuente de carbono los almidones y desde luego las protenas como fuente de nitrgeno.

Principales fuentes de nitrgeno empleadas en medios de cultivo para la produccin de enzimas microbianas.

Fuentes inorgnicas
Sulfato de Amonio Nitratos (potasio, calcio)

Fuentes orgnicas no proteicas

Urea Bases nitrogenadas

Fuentes proteicas microbianas

Extracto de levadura

CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS PROCESOS DE FERMENTACIN PARA LA PRODUCCIN DE ENZIMAS MICROBIANAS.

Principales fuentes de nitrgeno empleadas en medios de cultivo para la produccin de enzimas microbianas.

Fuentes proteicas vegetales Fuentes proteicas animales

Pasta de soya Pasta de girasol Casena Protenas de suero de leche

Pasta de algodn
Salvado de trigo Salvado de arroz Agua de cocimiento de maz Diversos hidrolizados Malta (cebada)

Peptonas
Hidrolizado de pescado Hidrolizado de carne

CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS PROCESOS DE FERMENTACIN PARA LA PRODUCCIN DE ENZIMAS MICROBIANAS.

La adicin de agentes surfactantes, especficamente el Tween 80 o el Triton, aumenta la produccin de un gran nmero de enzimas extracelulares.

Efecto de la adicin de tensoactivos al medio de cultivo (Tween 80 al o.1%) en la produccin de enzimas microbianas.
Enzima Microorganismo
Relacin de produccin Medio + tensoactivo Medio solo

Celulasa Invertasa Dextranasa Alternansacarasa Pululanasa

Thricoderma viride Pullularia pullulans Penicillium funiculosum Leuconostoc mesenteroides Aerobacter aerogenes

20 16 2 2 1.5

CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS PROCESOS DE FERMENTACIN PARA LA PRODUCCIN DE ENZIMAS MICROBIANAS.

La aireacin.
1.

2.
3. 4.

Los procesos fermentativos pueden dividirse en trminos de requerimiento de oxgeno en: Aerobios Microaerobios Anaerobios Anaerobios estrictos El KLa (coeficiente de transferencia de masa en la fase liquida) es el criterio con que se caracteriza y se escala una fermentacin, debido a la baja solubilidad del O2 en el medio de fermentacin.

CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS PROCESOS DE FERMENTACIN PARA LA PRODUCCIN DE ENZIMAS MICROBIANAS.

Cintica de produccin de enzimas.

No existe un modelo cintico gral. para la sntesis de enzimas microbianas. El modelo mas utilizado es el desarrollado por Luedeking-Piret para el cido lctico y extendido para otros productos de fermentacin.

dP

dt

dX

dt

+ X

Donde se plantea que la velocidad de sntesis de producto es proporcional al crecimiento del microorganismo (primer trmino) y a la cantidad de clulas presentes en el medio (segundo trmino).

OPERACIONES DE RECUPERACIN

Dentro de las operaciones de recuperacin uno de los principales objetivos es eliminar agua al menor costo posible. El grado de purificacin depende del rea de aplicacin final del producto enzimtico: alimentos, farmacia, industria textil, industria curtidora, industria papelera, etc., y de la forma en que va a ser aplicado (por ejemplo, diagnstico, aditivo en alimentos, medicamento, catalizador en la industria, etc.).

OPERACIONES DE RECUPERACIN

Las principales etapas involucradas en la recuperacin son:

1.

2.
3. 4. 5. 6. 7. 8. 9.

Extraccin Ruptura celular Separacin de slidos Ultrafiltracin Precipitacin Extraccin lquido-lquido Cromatografa Estabilizacin, secado y formulacin Evaluacin del proceso de purificacin

OPERACIONES DE RECUPERACIN
1.

Extraccin.

En ciertos casos es posible extraer la enzima que se encuentra ligada a la pared celular o a alguna membrana, mediante:

Tratamientos especficos de autolisis. Solventes.

Isobutanol es el ms indicado para enzimas ligadas a membranas.

Tratamiento enzimtico de las clulas:

lisozima, lipasas, fosfolipasas, proteasas, quitinasas o glucanasas pueden ser agregadas para degradar parcial o totalmente la pared celular.

OPERACIONES DE RECUPERACIN
2.

Ruptura celular.
Existen diversas tcnicas a nivel laboratorio pero solo 2 mtodos mecnicos son empleados a gran escala:

El homogenizador de alta presin y II. El molino de esferas de alta velocidad.

I.

En ambos casos el fluido debe pasar varias veces por el equipo, dependiendo de la dureza de la clula, y de la ubicacin de la enzima (periplasmticas, citoplasmticas, etc.).

OPERACIONES DE RECUPERACIN
Ruptura celular La optimizacin para obtener la mxima extraccin, sin que la enzima pierda actividad por calentamiento y sin reducir demasiado el tamao de clulas (dificulta la separacin), consiste en :
I. II. III.

Determinar el nmero mnimo de pasos por el equipo, Determinar la mxima concentracin de alimentacin, y Determinar las condiciones de ruptura (tiempo de molido o presin).

OPERACIONES DE RECUPERACIN
3.

Separacin de slidos.
La eliminacin de clulas al final de la fermentacin, la eliminacin de residuos celulares despus de la ruptura y la recuperacin o eliminacin de precipitados se efecta por centrifugacin o por filtracin.

I.

La seleccin del equipo depende de varios factores:

El tamao de partcula, II. La diferencia de densidades entre las fases a separar III. La viscosidad del medio IV. La aglomeracin y caractersticas pegajosas del precipitado.

OPERACIONES DE RECUPERACIN
4.

Ultrafiltracin.
Separacin de molculas
peso molecular inferior a 200 Uso de membranas sujetas a presiones de hasta 2000 psi.

Clasificacin en trminos de tamao:

Tcnica
smosis inversa

Ultrafiltracin

peso molecular entre 400 y Uso de membranas y 50000. fibras porosas sujetas a presiones no mayores a 25 psi Micropartculas que van desde virus hasta levaduras

Microfiltracin

Filtracin tradicional

OPERACIONES DE RECUPERACIN

Ultrafiltracin. Se basa en el diseo de membranas o fibras con una estructura de poros pequeos (50 a 500nm) por lo que molculas pequeas podrn atravesar, mientras que las grandes sern retenidas. El sistema permite: Concentrar al eliminar agua, Dializar (las sales atraviesan las membranas
continua o intermitentemente el agua filtrada)

I. II. III. IV.

y es posible sustituir

Purificar parcialmente

(las protenas de peso molecular inferior al peso molecular de corte del sistema tambin sern eliminadas).

Cambiar el sistema buffer durante el proceso de purificacin.

OPERACIONES DE RECUPERACIN

Ultrafiltracin.

Ventajas: I. No cambia la fase de la enzima, II. Puede operarse a bajas temperaturas, III. No se agregan sustancias ajenas al sistema, IV. Tiene bajos requerimientos energticos, V. Es fcilmente operada. Desventajas: I. Mantenimiento y cuidado de las fibras o membranas.

OPERACIONES DE RECUPERACIN
5.

Precipitacin.
Los mtodos para precipitar enzimas consisten en causar una reduccin de la solubilidad, y son:

I. II.

Adicin de sales: Desalado (salting-out). Se precipita la

enzima al disminuir su grado de hidratacin.

Adicin de solventes poco polares (modificacin de la

cte. dielctrica). Se precipita la enzima al aumentar la atraccin
entre molculas.

III.

Precipitacin isoelctrica mediante ajuste del pH.

OPERACIONES DE RECUPERACIN
6.

Extraccin lquido-lquido.
La formacin de dos fases lquidas puede ser inducida en funcin de la incompatibilidad de dos polmeros, que termodinmicamente no son estables disueltos en una misma fase. La enzima migra a una de las fases logrndose una concentracin-purificacin. Los polmeros usados son: polietilenglicol y dextranas o fosfatos.

OPERACIONES DE RECUPERACIN
7.

Cromatografa.

Es la tcnica ms potente de que se dispone para purificar enzimas y protenas en general. Clasificacin de los mtodos de acuerdo a la caracterstica de la enzima.

Tcnica

Carga Tamao Estructura

Cromatografa de intercambio inico HPLC Cromatografa de permeacin en gel Cromatografa de adsorcin Cromatografa hidrofbica Cromatografa de apareamiento de iones Cromatografa de intercambio de ligandos Cromatografa de afinidad

Caract. bioqumicas

OPERACIONES DE RECUPERACIN
9.

Estabilizacin, secado y formulacin.

Las preparaciones enzimticas son secadas generalmente. en secadores de espreas, mientras que cuando la actividad es inestable o la preparacin de pequeos volmenes y de manejo estril, se emplea la liofilizacin. En la formulacin del producto es necesario tomar en cuenta varios factores en relacin con la dosis de enzima en la aplicacin final para facilitar su uso y evitar grandes diluciones.

OPERACIONES DE RECUPERACIN
Generalmente las preparaciones lquidas contienen: I. Agentes estabilizantes (glicerol, sorbitol, polietilenglicol, etc.) II. Agentes de preservacin (benzoatos, sorbatos, etc.)

El material inerte consiste de: I. Azcar (glucosa, lactosa, etc.) II. Slidos de almidn (adicionados antes del secado tienen un efecto protector sobre la enzima), III. Sal (preparaciones de papana para ablandamiento de carnes) IV. Talco

OPERACIONES DE RECUPERACIN

I.

Evaluacin del proceso de purificacin.

Rendimiento de la etapa. La cantidad o unidades de
enzima que se recuperaron despus de la operacin.

Y=

Unidades o cantidad despus de la operacin Unidades o cantidad antes de la operacin

OPERACIONES DE RECUPERACIN
I.

Pureza del producto. Requiere de la determinacin de

protena y se reporta como actividad especfica.
unidades
E= ml de medio mg de protena P= ml de medio E unidades

Ae =
P

=
mg de protena

Donde: E = Actividad enzimtica

P = Protena

Ae = Actividad especfica

OPERACIONES DE RECUPERACIN
III.

Factor de purificacin. Definido como el numero de veces

que la enzima fue purificada al efectuarse la operacin de purificacin.
Ae (antes de la operacin) Ae (despus de la operacin)

Factor de purificacin o veces = de purificacin

III.

Factores econmicos. La determinacin de los parmetros

anteriores permite establecer la factibilidad tcnica de la operacin de purificacin.

ALGUNOS EJEMPLOS DE PRODUCCIN INDUSTRIAL DE ENZIMAS MICROBIANAS

Amilasas
Microorganismo
bacterias del gnero Bacillus

Amilasa
-amilasa.

Usos o actividad
licuefaccin o sacarificacin Son metaloenzimas que requieren calcio.

-amilasa. Amiloglucosidasa .

Bacillus polymyxa bacterias del gnero Aspergillus

Produccin de maltosa a partir de almidn Produccin de glucosa a partir del extremo no reductor de amilosa y amilopectina Hidrolizan pululano

Pululanasa.

Cepas Aerobacteraerogenes

ALGUNOS EJEMPLOS DE PRODUCCIN INDUSTRIAL DE ENZIMAS MICROBIANAS

Proteasas.
Tipos: Endoproteasas y exopeptidasas.

Microorganismos: todos aquellos que pueden crecer en un

medio de cultivo con protenas como fuente de nitrgeno. Los ms empleados son Bacillus y Aspergillus.

Usos: En la industria quesera como sustituto de renina o

cuajo microbiano. En la industria de alimentos para la sntesis de aspartamo.

ALGUNOS EJEMPLOS DE PRODUCCIN INDUSTRIAL DE ENZIMAS MICROBIANAS

Glucosa isomerasa.
Microorganismos:
Bacillus coagulans, Streptomyces phaechromogenes, S. olivaceus, S. olivochomogenes, S. wedmerensis, S. albus, Arthobacter, Actinoplants misseuriensis.

Usos: Produccin de jarabes fructosados a partir de jarabes

glucosados.

ALGUNOS EJEMPLOS DE PRODUCCIN INDUSTRIAL DE ENZIMAS MICROBIANAS

Celulasas y -glucanasas.
Tipos: Endoglucanasas, celobiohidrolasas y -glucosidasa o
celobiasa.

Microorganismos:

Thricoderma reesei, Chaetomium thermophile, Sporotrichum thermophilicum (alta temperatura de operacin), A. awamori, A. niger, A. phoemicis (alta actividad -glucosidasa).

Usos: degradacin de celulosa, las -glucanasas se

emplean en cervecera.

ALGUNOS EJEMPLOS DE PRODUCCIN INDUSTRIAL DE ENZIMAS MICROBIANAS

Pectinasas.
Se denomina a un complejo de enzimas que se clasifican de acuerdo con el sustrato (pectina o cido pctico), del tipo de reaccin (hidrlisis o transeliminacin) y del mecanismo (endo, exo), incluyndose adems a la pectinesterasa.

Microorganismos: Aspergillus niger, produce una endo y

una exopoligalacturonasa, una endo polimetril galacturonasa y una endo pectin liasa.

ALGUNOS EJEMPLOS DE PRODUCCIN INDUSTRIAL DE ENZIMAS MICROBIANAS

Lipasas.
Se reprime en presencia de mono y disacridos en el medio as como glicerol.

La produccin se incrementa al adicionar al medio lpidos (aceite de oliva, aceite de almidn) cidos grasos (oleico) o lecitina.

Microorganismos:

Mucor mihei, A. niger, Geotricum candidum, Candida cilindraceae, Pseudomons sp., Rhizopus oryzae y R. niveus.

ALGUNOS EJEMPLOS DE PRODUCCIN INDUSTRIAL DE ENZIMAS MICROBIANAS

Dextranasa.
Microorganismos: Penicillium funicilosum, P. lilaceum y
Chaetonium gracilae.

Usos: Ingenios azucareros.

Inductor: Dextranas.

Invertasa.
-fructofuranosidasas o -glucosidasas.

Microorganismos: S. cerevisae, S. carlsbergensis. Inductor: Sacarosa.

ALGUNOS EJEMPLOS DE PRODUCCIN INDUSTRIAL DE ENZIMAS MICROBIANAS

Lactasa.
Tambin conocida como -galactosidasa, hidroliza la lactosa en glucosa y galactosa. Microorganismos: Hongos y levaduras. A. oryzae y A. niger,
kluyveromyces lactis, K. fragilis y Cndida pseudotropicallis. Hongos. Producen enzimas extracelulares, con alta estabilidad trmica y pH de actividad (2.5-4.5), se utilizan sustratos como maltosa o salvado. Levaduras. Producen enzimas Intracelulares, con baja estabilidad trmica, pH de actividad (6.0-7.0), se utiliza como inductor la lactosa.

ALGUNOS EJEMPLOS DE PRODUCCIN INDUSTRIAL DE ENZIMAS MICROBIANAS

Glucosa oxidasa.
Microorganismos: A. niger, Penicillium amagaskiense, P.
vitae.

Usos: Se emplea en combinacin con catalasa o peroxidasa.

Acil Tanino Hidrolasa.

Microorganismos: A. niger. Usos: manufactura de t instantneo.