INHIBICIÓN Y REGULACIÓN ENZIMÁTICA:

Inhibidores: Moléculas que ralentizan o detienen las reacciones enzimáticas. En algunas

ocasiones han resultado útiles para conocer mas datos sobre el mecanismo de reacción
enzimática, y en la elaboración de fármacos. Por ejemplo, un inhibidor puede actuar sobre una
enzima que esté presente en un organismo patógeno, pero no en el organismo huésped. En
otras ocasiones actúan sobre enzimas con una actividad alterada y que son la causa de la
patología tratada.

Según la reversibilidad del proceso de interacción entre el inhibidor y una enzima, existen:

▪ Inhibidores reversibles: Son moléculas que se unen a la enzima mediante

interacciones no covalentes, más o menos estables, de forma reversible. Tipos:
Inhibición competitiva, no competitiva y acompetitiva.

Inhibición competitiva: El inhibidor se una al mismo sitio que el sustrato, formando el complejo
EI e impidiendo la formación del complejo ES y, por lo tanto, del producto. Suele ser semejante
al sustrato de forma que compiten por unirse al centro activo. Cuando la concentración de
sustrato es elevada es muy poco probable que el inhibidor se una a la enzima, por lo que la
reacción muestra una Vmax normal (Vmax = Vmaxi) pero se necesita más sustrato para
alcanzar la mitad de la Vmax, por lo que la Kmi tiene un valor mayor.

Inhibición no competitiva: El inhibidor muestra afinidad tanto por la enzima libre como por el
complejo ES y la unión se realiza en un lugar distinto del centro activo. Por tanto, su efecto no
se puede evitar aumentando la concentración de sustrato y produce una disminución de la
Vmax ya que el complejo ternario ESI no genera producto. La Vmaxi disminuye por el efecto
inhibidor mientras que, al no unirse en el centro activo, la Km no cambia en presencia de
inhibidor.
Inhibición acompetitiva: Los inhibidores acompetitivos se unen exclusivamente al complejo ES
en un lugar diferente al centro activo. Produce la disminución de Vmaxi y Kmi. Suele darse en
reacciones con varios sustratos.

▪ Inhibidores irreversibles: por enlace covalente e inhibidores suicida.

Covalente: El inhibidor se une sin posibilidad de liberación, covalentemente, en los residuos

imprescindibles para la catálisis de la enzima, impidiendo su función; aunque también pueden
unirse mediante interacciones no covalentes muy estables. Este tipo de inhibidores no tienen
un comportamiento cinético de MM. Su principal utilidad es la creación de fármacos, pero
también se utilizan para conocer el mecanismo de reacción de las enzimas inhibidas.

Suicida: el inhibidor se activa enzimáticamente. Esto es, se une al sitio activo como un sustrato
o un inhibidor competitivo, luego la enzima lo transforma en otra especia sumamente reactiva,
que modifica a la enzima por enlace covalente, inactivándola. Tiene especificidad de inhibidor
competitivo, pero potencia de inhibidor irreversible.
 REGULACIÓN ENZIMÁTICA:

Las enzimas reguladoras, o también denominadas alostéricas, son aquellas que tienen un
mayor efecto sobre la velocidad global de un proceso que se desarrolla de forma secuencial,
donde el producto de una reacción es el sustrato de la siguiente. Estas pueden cambiar su
actividad como respuesta a ciertas modificaciones y suelen catalizar las primeras reacciones de
la secuencia. Se unen de forma reversible no covalente a pequeñas moléculas que regulan su
actividad o pueden sufrir modificaciones covalentes, reversibles o irreversibles, produciendo
cambios en su función.

Se modulan mediante la unión de uno o mas ligandos denominados moduladores: Se unen en

un lugar diferente al centro activo y especifico para cada modulador. Provocan un aumento
(moduladores positivos) o una disminución (moduladores negativos) en la afinidad de la
enzima por el sustrato. Si el mismo sustrato tiene un efecto modulador se denomina
interacción homotrópica, y si el ligando es una sustancia diferente es una interacción
heterotrópica. En las homotrópicas, el centro activo y el sitio regulador son el mismo y casi
siempre son regulaciones positivas, a diferencia de las heterotrópicas que pueden ser positivas
o negativas.

La mayoría de las enzimas alostéricas son oligoméricas y están formadas por varias
subunidades. Aquí, la unión del modulador a una de las subunidades produce un cambio de
conformación que se transmite a las otras subunidades con lo que se consigue un efecto
cooperativo. Esto se explica mediante los modelos secuencial y concertado.

En algunas rutas metabólicas, el producto final de la ruta es la molécula que actúa como
modulador negativo de la enzima que cataliza la primera etapa de la ruta. Esta regulación se
denomina retroinhibición (feed-back).

El comportamiento cinético de estas enzimas difiere del comportamiento descrito por

Michaelis-Menten. En los moduladores homotrópicos hay un descenso en el valor de la Km
(aumento de la afinidad). El efecto cooperativo hace que al representar la [S] frente a la
concentración inicial, se obtenga una curva sigmoidea, ya que la Km va cambiando a medida
que lo hace la concentración de sustrato.

En esta curva sigmoidea hay un valor de [S] que coincide con la mitad de la velocidad máxima y
se denomina K0,5, pero no tiene el mismo significado que Km. El caso mas habitual es que se
modifique el valor de K0,5 sin verse alterada la Vmax.

La curva sin cooperatividad resulta debido a que el sustrato es muy afín a la enzima, por lo que
la velocidad aumenta de repente. Mientras que la curva con cooperatividad es debido a que
los sustratos deben de activarse para poder ser afines, esto se hace de manera secuenciada,
por lo que lleva tiempo y la afinidad aumenta de a poco, por lo tanto, su velocidad lo hace de
la misma manera.

Regulación mediante modificaciones covalentes en su estructura:

Muchas enzimas cambian su actividad como consecuencia de una modificación covalente en

su estructura. Algunas sufren reacción de adición de grupos fosforilo, adenililo, uridililo,
metilo, etc. La modificación puede ser reversible o irreversible.

La fosforilación es la modificación reversible más frecuente que se realiza mediante quinasas

(cada reacción esta catalizada por sus correspondientes enzimas especificas). Puede afecta
tanto a su conformación como a sus posibles interacciones con el sustrato. La modificación es
reversible porque puede darse la eliminación del grupo fosfato mediante fosfatasas. Esto
produce una forma activa e inactiva de la enzima.
Regulación por proteólisis:

La forma activa de una enzima surge tras la ruptura o división de un fragmento de la cadena
polipeptídica de un precursor inactivo denominado zimógeno. Como como las proteasas del
estomago tripsina y quimiotripsina, que se sintetizan como tripsinógeno y quimiotripsinógeno.
Esto hace accesible su centro activo.

Como este tipo de inhibición es irreversible, se necesitan otros mecanismos para la

inactivación de estas enzimas.

Inducción/represión enzimática a nivel génico:

Es un tipo de regulación que se puede dar en pocas horas o días. Un ejemplo son los fármacos
antiepilépticos, alteran la actividad enzima de forma indirecta, aumentando o disminuyendo la
síntesis de la enzima. Estos efectos son denominados inducción (aumentan la síntesis de la
enzima) e inhibición (disminuyen la síntesis) enzimática y consisten en alteraciones en el
patrón de expresión génica.

Isoenzimas:

Se trata de una misma enzima, pero en formas moleculares diferentes, y que han sido
sintetizadas por genes diferentes.

▪ Migran diferente en electroforesis

▪ Tienen diferente estructura primaria
▪ No presentan generalmente el mismo Km ni el mismo Vmax
▪ No se encuentran en el mismo tejido o en el mismo compartimento celular
▪ Catalizan la misma reacción
▪ Sirven como referencias de tejidos dañados en la clínica