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PRÁCTICA 5: DETERMINACIÓN DE LA VELOCIDAD DE FERMENTACIÓN DE ALGUNOS

CARBOHIDRATOS.

Gerson Andrés Rodríguez -220071062, Weldry Jhulieth Lopez Muñoz – 221195027, Jefferson
Fernando Ortega Melo – 219195283

Universidad de Nariño, Licenciatura en Ciencias Naturales y Educación Ambiental

jhuliweldry29@hotmail.com

Resumen: En este experimento se evaluaron las velocidades de fermentación de distintos tipos de azúcares
como glucosa, fructosa, sacarosa, lactosa y almidón con la levadura. Se registró el volumen de dióxido de
carbono generado midiendo el volumen de agua que se desplazaba en una bureta y el tiempo que duró. El
objetivo de este experimento era establecer un sistema de respiración anaerobia. Los resultados mostraron que
la glucosa y la sacarosa fueron los azúcares que presentaron una mayor capacidad de desplazamiento de agua
con el dióxido de carbono generado, con 8,7 y 8,2 ml respectivamente. La fructosa, por su parte, produjo 5,3 ml,
mientras que la lactosa y el almidón solo desplazaron 1,2 y 3,6 ml, respectivamente. Estos resultados
demuestran que la levadura tiene una preferencia por los azúcares simples, como la glucosa y la sacarosa, que
pueden ser metabolizados más fácilmente. Los azúcares complejos, como la lactosa y el almidón, requieren de
enzimas adicionales para ser descompuestos, lo que ralentiza la velocidad de fermentación.

Introducción: La respiración celular es un La fermentación es otra forma anaeróbica


proceso también llamado glucólisis, que se (que no requiere oxígeno) de descomponer la
divide en dos partes, en primer lugar, glucosa que ocurre en muchos tipos de
encontramos la parte aeróbica, que tiene lugar células y organismos. En la fermentación, la
en presencia de oxígeno y consta de única forma de liberar energía es la glucólisis,
glucólisis, descarboxilación oxidativa del que finaliza con una o dos reacciones más.
piruvato, ciclo del ácido cítrico y fosforilación La fermentación y la respiración celular
oxidativa. Por otro lado, encontramos la parte comienzan de manera similar con la
anaeróbica, esta es la vía catabólica utilizada glucólisis. Sin embargo, el piruvato producido
por varios tipos de células para descomponer por la glucólisis durante la fermentación no se
la glucosa sin oxígeno, y consta de dos tipos oxida más ni se dirige hacia el ciclo del ácido
de fermentación, láctica y alcohólica. [1] cítrico, y la cadena de transporte de
electrones no funciona.[2]
La característica principal de esta vía
metabólica es que funciona como el último Debido a que la cadena de transporte de
aceptor de electrones en la cadena de electrones no funciona, el NADH producido
transporte mitocondrial además de la durante la glucólisis no puede entregar allí
producción de ácido láctico en las células sus electrones para regresar al NAD. Por lo
musculares o la producción de etanol en la tanto, el propósito de las reacciones
levadura. Finalmente, es necesario y adicionales en la fermentación es persuadir
oportuno señalar que en este proceso solo se a un portador de electrones para que done
producen dos moléculas de ATP por cada mol su electrón a una molécula orgánica (como
de glucosa. Las levaduras utilizan energía el piruvato, el producto final de la
durante su ciclo de vida. Esta energía se glucólisis). Esta reserva permite que
obtiene a partir de azúcares que se continúe la glucólisis, asegurando un
descomponen y liberan a su vez dióxido de suministro constante de NAD. Durante la
carbono y etanol, un concepto muy conocido fermentación del ácido láctico, transfiere
en la industria cervecera. La levadura utiliza sus electrones directamente al piruvato y se
el ciclo glucolítico (EMP), más comúnmente obtiene lactato como producto de
conocido como fermentación alcohólica, que degradación. El lactato, la forma
implica reacciones de glucólisis con dos desprotonada del ácido láctico, da nombre
reacciones adicionales añadidas para permitir al proceso. Las bacterias que componen el
la regeneración de NAD a través de la yogur fermentan el ácido láctico al igual que
conversión de piruvato en etanol y CO2. los glóbulos rojos de su cuerpo, que
carecen de mitocondrias y, por lo tanto, no Levadura:
pueden llevar a cabo la respiración
V.f. (ml CO₂/s) = ( 4 ml - 0,1 ml ) / 360 s
celular.[3]
= 0,0108
Resultados y discusión:
Glucosa:
Tabla 1. Volumen de CO2 generado durante la V.f. (ml CO₂/s) = ( 8,7 ml - 0,3 ml ) / 360 s
fermentación de diferentes carbohidratos.
= 0,0233

Fructosa:

V.f. (ml CO₂/s) = ( 5,3 ml - 0,1 ml ) / 360 s

= 0,0144

Sacarosa:

V.f. (ml CO₂/s) = ( 8,2 ml - 0,2 ml ) / 360 s

= 0,0222

De los resultados obtenidos se puede deducir Lactosa:


que la levadura tiene una preferencia por la
V.f. (ml CO₂/s) = ( 1,2 ml - 0,1 ml ) / 360 s
glucosa como fuente de carbohidrato. Esto se
debe a que la glucosa es un monosacárido, es = 0,0030
decir, la forma más simple de carbohidrato.
Como tal, puede ser metabolizada por la Almidón:
levadura de forma rápida y eficiente, liberando
V.f. (ml CO₂/s) = ( 3,6 ml - 0,4 ml ) / 360 s
energía en forma de dióxido de carbono
(CO2). = 0,0088
En cambio, la lactosa y el almidón son Gráfico 1. Formación de C02 en el proceso
carbohidratos complejos que requieren de fermentativo de la levadura con diferentes
enzimas adicionales para ser descompuestos. carbohidratos con relación al tiempo.
La lactosa es un disacárido, formado por dos
monosacáridos, glucosa y galactosa. El
almidón es un polisacárido, formado por
muchas unidades de glucosa unidas entre sí.

La descomposición de la lactosa y el almidón


requiere de enzimas específicas que la
levadura produce en cantidades limitadas. Por
lo tanto, la producción de CO2 a partir de
estos carbohidratos es menor y más constante
que la producida a partir de la glucosa.

Para ejemplificar, en la experimentación se


observó que la glucosa desplazó 8.7 ml de En el gráfico podemos observar la
CO2, mientras que la lactosa y el almidón solo fermentación de diferentes tipos de
desplazaron 1.2 ml y 3.6 ml respectivamente. carbohidratos que muestra resultados
variados según el tipo de azúcar que se
Velocidad de fermentación utilice. La velocidad de fermentación, es decir,
la cantidad de CO2 producido por unidad de
Fórmula general: tiempo, depende de varios factores, como la
Velocidad de fermentación (ml CO₂/s) = estructura del carbohidrato, la temperatura y la
(Volumen final de CO₂ - Volumen inicial de concentración de azúcar.
CO₂) / Tiempo La glucosa y la sacarosa son los
carbohidratos que presentan una mayor
velocidad de fermentación. Esto se debe a sacarosa o la lactosa. La glucosa se
que son monosacáridos, es decir, la forma metaboliza más rápidamente que los otros
más simple de carbohidrato. Como tales, carbohidratos porque no requiere ser
pueden ser metabolizados por las levaduras hidrolizada en sus monosacáridos
de forma rápida y eficiente, liberando energía constituyentes" [8]
en forma de CO2.
La velocidad de fermentación de los
El almidón y la fructosa son los carbohidratos carbohidratos por levadura depende de varios
que tienen una menor velocidad de factores, tales como:
fermentación. El almidón es un polisacárido,
formado por muchas unidades de glucosa La estructura química del carbohidrato: La
unidas entre sí. La fructosa es un glucosa es un monosacárido, mientras que la
monosacárido, pero es menos metabolizable sacarosa y la lactosa son disacáridos. Los
por las levaduras que la glucosa. monosacáridos son más sencillos de
descomponer que los disacáridos, por lo que
Otros carbohidratos, como la lactosa, tienen su fermentación es más rápida.
una velocidad de fermentación constante y
moderada. La lactosa es un disacárido, La concentración del carbohidrato: A mayor
formado por dos monosacáridos, glucosa y concentración de carbohidrato, mayor será la
galactosa. La levadura requiere de enzimas velocidad de fermentación.
específicas para descomponer la lactosa, por Las condiciones ambientales: La temperatura
lo que la velocidad de fermentación es y el pH también afectan a la velocidad de
constante y moderada. fermentación.
Tabla 2. Velocidad de fermentación de la En el caso de la levadura sin ningún
levadura usando diferentes carbohidratos. carbohidrato, la fermentación es lenta porque
la levadura necesita energía para realizar sus
procesos metabólicos. Sin embargo, la
fermentación es significativamente mayor que
al añadir algunos carbohidratos, como en este
caso la lactosa. Esto se debe a que la lactosa
es un carbohidrato complejo que requiere más
La levadura al tener la capacidad de realizar la
tiempo y energía para ser descompuesto.
fermentación alcohólica, una vía metabólica
que transforma los carbohidratos en etanol y
Conclusiones:
dióxido de carbono obtiene energía de los
carbohidratos que consume. La glucosa es el
● Se observa que no todos los
carbohidrato que la levadura metaboliza más
fácilmente, por lo que su fermentación es más carbohidratos presentan la misma
rápida. La sacarosa es un disacárido que se velocidad de fermentación. Tanto la
hidroliza en glucosa y fructosa, dos glucosa como la sacarosa muestran
monosacáridos que la levadura también una velocidad de fermentación
puede metabolizar. La lactosa es un significativa que aumenta con el
disacárido que se hidroliza en glucosa y tiempo. Por otro lado, carbohidratos
galactosa, dos monosacáridos que la levadura como el almidón y la fructosa
metaboliza más lentamente que la glucosa. presentan un crecimiento más lento
en su velocidad de fermentación.
La reacción general de la fermentación
● Existe una relación entre el tiempo y la
alcohólica es la siguiente:
velocidad de fermentación. Los
C6H12O6 → 2 C2H5OH + 2 CO2 carbohidratos como la glucosa y la
sacarosa experimentan un aumento
En esta reacción, una molécula de glucosa
en su velocidad de fermentación a
(C6H12O6) se descompone en dos moléculas
de etanol (C2H5OH) y dos moléculas de medida que pasa el tiempo, lo que
dióxido de carbono (CO2). sugiere que el proceso de
fermentación se intensifica con la
"La velocidad de fermentación de la glucosa duración del proceso.
por la levadura es mayor que la de la
● Los carbohidratos no reaccionan de la CO2)/(1 mol Glu) × (44 g)/(2 mol CO2) × (1
misma manera durante la lit)/(1.83 g) × (1000 ml)/(1 lit) × (1 seg)/(0.0431
fermentación. Mientras algunos, como ml/CO2) × (1 min)/(60 seg )=51.65 min
la lactosa, mantienen una velocidad
de reacción estable a lo largo del Rta: La levadura tarda aproximadamente
tiempo, otros como la sacarosa y la 51.65 min aproximadamente en degradar
glucosa demuestran un aumento en completamente la glucosa.
su velocidad de fermentación.
● La diferencia en la estructura química ●¿Cuántos gramos de CO2 se producen hasta
de los carbohidratos parece influir en degradar completamente el carbohidrato?
su velocidad de fermentación. Densidad CO2 gaseoso = 1,83 g/litro.
Carbohidratos simples como la
glucosa y la sacarosa, que tienen una C6H12O6 → 2 C2H5OH + 2 CO2
estructura más sencilla, presentan una
mayor velocidad de fermentación en 0.5 g Glu×(1 mol Glu)/(180 g) × (2 mol
comparación con carbohidratos más CO2)/(1 mol Glu) × (44 g CO2)/(2 mol
complejos como el almidón. La CO2)=0.24 g CO2
lactosa, a pesar de ser un
Rta: Los gramos que se producen hasta
carbohidrato, muestra una estabilidad
degradar completamente el carbohidrato son
diferente debido a su estructura.
0.24 g CO2.
● En relación a la velocidad de
fermentación se puede concluir que
●¿Qué porcentaje de glucosa se habrá
hay una diferencia marcada entre la
metabolizado a los 15 minutos?
lactosa y el almidón. La lactosa
presenta una velocidad de 15 min × (60 seg)/(1 min) × (0.0431
fermentación que se mantiene ml/CO2)/(1 seg) × (1 lit)/(1000 ml) ×(1.83
constante a lo largo del tiempo,Por g)/(1 lit) × (1 mol CO2)/(44 g) × (1 mol
otro lado, en el caso del almidón se Glu)/(2 mol CO2) × (180 g)/(1 mol Glu
observa que su velocidad de )=0.145
fermentación es comparativamente
más lenta. (0.145 )/(0.5 gr ) ×100%=29%

Cuestionario. Rta: el porcentaje de glucosa metabolizada en


15 min es de 29%.
Resuelva los siguientes cálculos
estequiométricos para glucosa, tenga en ●¿Cuántos ml de etanol puro (100%) se
cuenta: eficiencia de la reacción de 100%, habrán producido a los 15 minutos?
densidad del CO2 gaseoso = 1.83 g/litro,
PMglucosa = 180gr/mol, PMetanol 15 min×(60 seg)/(1 min) × (0.0431
ml/CO2)/(1 seg) × (1 lit)/(1000 ml) ×(1.83
= 46gr/mol, densidad del etanol = 0.789 gr/ml, g)/(1 lit) × (1 mol CO2)/(44 g) × (2 mol
PMsacarosa = 342.3gr/mol, PMCO2, Etanol)/(2 mol CO2) × (46 g)/(1 mol Etanol )×
44gr/mol?. PMATP=507.2 g/mol. Si en el (1 ml Etanol)/(0.789 g )=0.094 ml Etanol puro
experimento se empleó 0.5 gramos de
glucosa, y con la velocidad obtenida para este Rta: En 15 minutos se habrán producido 0.094
carbohidrato, determine: ml Etanol de puro.

●¿Cuántos minutos tardará la levadura en ●¿Cuántos gramos de ATP se habrán


degradar completamente el carbohidrato? producido a los 15 minutos de fermentación?

- Cálculos estequiométricos: 15 min×(60 seg)/(1 min) × (0.0431


ml/CO2)/(1 seg) × (1 lit)/(1000 ml) ×(1.83
0.5 g Glu × (1 mol Glu)/(180 g) × (2 mol g)/(1 lit) × (1 mol CO2)/(44 g) × (2 mol
ATP)/(2 mol CO2) × (507.2 g)/(1 mol ATP positivamente sobre la calidad de la bebida y
)=0.818 g ATP sobre el rendimiento del proceso.[6]

Rta: A los 15 minutos de fermentación se ●¿Qué utilidad industrial se le da al CO2


habrán producido aproximadamente 0.818 producido durante la fermentación etanólica
gramos de ATP. en la producción de cerveza?

●¿Cuáles son los carbohidratos más En la industria cervecera, la emisión del gas
favorables para realizar fermentación carbónico hoy por hoy es vista como una
alcohólica empleando la levadura (S. medida clave de los daños ambientales
cerevisiae)? ¿Qué función cumple la enzima durante la etapa de fermentación de la
invertasa presente en esta levadura? cerveza, su función es sintetizar los
carbohidratos fermentables (azúcares) en
La levadura cerevisiae consume la glucosa a alcohol. El gas forma burbujas que distinguen
mayor velocidad que la fructosa, lo cual a los vinos espumosos de otros vinos
explica que cuando las fermentaciones se llamados tranquilos.[7]
paran, los azúcares residuales que quedan
son fructosa. La invertasa, cataliza la hidrólisis
de la sacarosa en glucosa y fructosa; enzimas
más utilizadas en la industria de alimentos y Bibliografía:
fermentación de melazas para producir
etanol.[4] [1] Pasos de la respiración celular -
https://es.khanacademy.org/science/ap-biology
●¿Qué tratamientos previos deben realizarse /cellular-energetics/cellular-respiration-ap/a/ste
en los carbohidratos que no fueron ps-of-cellular-respiration . recuperado el 27
metalizados, para que puedan ser empleadas julio del 2023.
en procesos fermentativos en la producción
industrial de etanol? [2] Fermentación y respiración anaeróbica -
https://es.khanacademy.org/science/ap-biology
Para los carbohidratos lactosa y almidón el /cellular-energetics/cellular-respiration-ap/a/fer
tratamiento para que pueden ser mentation-and-anaerobic-respiration .
metabolizados por la levadura debe ser la recuperado el 27 julio del 2023.
hidrólisis de estos o monómeros sobre los
cuales la maquinaria celular de la levadura [3] Fosforilación oxidativa -
pueda actuar. Y para la galactosa se https://es.khanacademy.org/science/ap-biology
necesitaría un organismo con la maquinaria /cellular-energetics/cellular-respiration-ap/a/oxi
celular necesaria para metabolizarla.[5] dative-phosphorylation-etc . recuperado el 27
julio del 2023.
●¿Cómo afecta el pH y la temperatura la
fermentación etanólica? [4] Levadura Saccharomyces cerevisiae y la
producción de alcohol -
El pH debe ser ligeramente ácido con el fin de https://www.redalyc.org/pdf/2231/2231484200
que las levaduras puedan realizar su 04.pdf . recuperado el 27 julio del 2023.
actividad, asegurando su estabilidad
microbiológica y las características [5] Materias primas usadas para la producción
organolépticas típicas de la cerveza. Rango de etanol de cuatro generaciones: retos y
óptimo de 4,1 - 4,3. La temperatura de oportunidades -
fermentación no solo afecta el tiempo del https://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sc
proceso y la concentración final de etanol, i_arttext&pid=S1405-31952018000700967 .
sino que puede afectar también las recuperado el 27 julio del 2023.
propiedades organolépticas de la bebida.
Estos factores pueden controlarse para influir [6] Efecto de la temperatura y el pH en la
fermentación -
https://www.redalyc.org/pdf/904/90433839012.
pdf . .recuperado el 27 julio del 2023.

[7] Dióxido de carbono recuperado del


proceso de fermentación -
https://repositorio.continental.edu.pe/bitstream
/20.500.12394/10653/1/IV_FIN_107_TE_M%C
3%A9ndez_Mendoza_2021.pdf .recuperado el
27 julio del 2023.

[8] Burgos-Shary, M.; Jiménez-Sánchez, A.;


Rodríguez-Molina, J. A.Fermentación de
carbohidratos por levadura. Revista
Colombiana de Química, Vol.: 49, No. 2, 2020
https://revistas.unal.edu.co/index.php/rcq/articl
e/view/74227 recuperado el 27 julio del 2023.

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