SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE

REGIONAL DISTRITO CAPITAL

CENTRO NACIONAL DE HOTELERIA, TURISMO Y ALIMENTOS

PRACTICA OBTENCION DE CULTIVOS PUROS Y BIOMASA MICROBIANA

Juan Guillermo Cubillos Hinojosa

Microbiólogo Agroindustrial (c) MSc.

INTRODUCCION

En la naturaleza, la mayoría de los microorganismos no se encuentran aislados, sino

integrados en poblaciones mixtas. Para llevar a cabo el estudio de estos microorganismos y
de sus propiedades, es necesario separar unos de otros y trabajar con especies aisladas,
obteniendo cultivos axénicos o puros.

Un cultivo axénico o puro es aquel que contiene un sólo tipo de microorganismo y que
procede generalmente de una sola célula; el crecimiento de ésta origina, en medio sólido,
una masa de células fácilmente visible que recibe el nombre de colonia.

OBJETIVOS

 Familiarizarse con el manejo de microorganismos y con las técnicas de obtención de

cultivos puro.
 Realizar cultivos para la obtención de biomasa microbiana.

Aislamiento por agotamiento por estrías

Se trata de un método rápido y simple de agotamiento progresivo y continuo del inoculo

sobre el medio solido contenido en una placa Petri. El objetivo es obtener a partir de un
elevado número de bacterias, un número reducido de ellas distribuidas individualmente
sobre la superficie de la placa. Al incubar ésta, cada uno de las bacterias originará una
colonia

Recomendaciones

Debe colocarse la placa en posición invertida sobre la mesa de trabajo y tomando la parte
que contiene el medio de cultivo, levantarla hasta la altura de la llama del mechero. Allí,
con ella en posición casi vertical, se realizará las sucesivas estrías.

Para realizar las estrías oscile el asa de siembra sobre la superficie del agar mediante un
balanceo sucesivo y rápido de la muñeca. No haga más presión sobre el agar que la debida
al propio peso del asa y su mango. Es muy importante emplear un asa de siembra en buen
estado, puesto que una rota o deteriorada rasgará el agar.

PROCEDIMIENTO

1. Esterilizar el asa flameándola en el mechero hasta conseguir un rojo incandescente.

2. Enfriar el asa en el borde del agar y tomar una porción de muestra.
3. Transferir el inoculo a una área pequeña de la superficie de la placa que contiene el
medio de cultivo.
4. Flamear y enfriar el asa.
5. Repetir las estrías de acuerdo al grafico.
6. Tener cuidado al abrir y cerrar la caja Petri, evitando la contaminación.
7. Llevar a incubación a 37°C durante 16 a 24 horas.
Obtencion de cultivo en masa

Los cultivos en masa es un metodo simple que consiste en la obtencion de grandes

cantidades de microorganismos en un medio de cultivo. Se utiliza generalmente para
realizar suspenciones microbianas llevandola a concentraciones deseadas por el analista.

Procedimiento

1. Esterilizar el asa flameandola en el mechero hasta conseguir un rojo incandescente.

2. Enfriar el asa en el borde del agar y tomar una porción de muestra.
3. Transferir el inoculo a una área pequeña de la superficie de la placa que contiene el
medio de cultivo.
4. Distribuir en toda la superficie de la placa.
5. Llevar a incubación a 37°C durante 16 a 24 horas.

DESCRIPCION DE COLONIAS EN MEDIO DE CULTIVO