SIEMBRA Y AISLAMIENTO DE BACTERIAS

NOMBRE

Rodríguez Pérez, Liduvina Gisellyta

1. INTRODUCCIÓN

Sembrar es la acción deponer una bacteria en contacto con un medio adecuado

o sustrato que permita el desarrollo de colonias. Los objetivos de la siembra
pueden ser para aislamiento y para trasplante.

La siembra por aislamiento se realiza cuando se desea estudiar la muestra. Por

lo común ésta presenta una mezcla de bacterias por lo que es preciso separar los
microorganismo.Generalmente se utiliza la técnica de agotamiento en superficie
sólida o aislamiento en estría simple. Cuando se desea contar el número de
bacterias se utiliza la técnica de placa vertida.

La siembre por trasplante puede ser:

 De un medio sólido a otro medio sólido

 De un medio sólido a un medio líquido
 De un medio líquido a otro medio líquido
 De un medio líquido a un medio sólido.

2. OBJETIVOS

 Describir la metodología para obtener un cultivo puro de bacterias

 Diferencia la siembra por agotamiento en superficie sólida o aislamiento
en estría simple.

3. METODOLOGÍA

3.1 Agotamiento en superficie sólida

- Con el ansa bacteriológica en anillo previamente esterilizada, tomar una

alícuota (inóculo) de la muestra biológica y depositarla en uno de los

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 extremos de la placa de Petri (con medio de cultivo servido y controlado).
Con el ansa realizar estrías
- (8-10) muy juntas en el primer tercio de la placa para agotar el inóculo y
después realizar estrías separadas de un extremo hacia otro de la placa, sin
levantar el ansa hasta terminar la siembra. Incubar por 24 horas a 30°C, 37°C
o 40°C, según la temperatura requerida por el microorganismo.
-

Figura 1. Separación por agotamiento en superficies sólidas.

3.2 Difusión en placa o placa vertida.

Depositar 0,1mL (0,5mL, 1mL) de la muestra en el centro de una placa de

Petri previamente esterilizada, agregar 10mL de medio de cultivo fluidificado y
enfriado (45-50°C), homogenizar por movimientos de rotación de la placa de
Petri para lograr la dispersión más o menos homogénea de los
microorganismos. Incubar según la temperatura requerida durante 24 horas y
realizar el recuento de las colonias desarrolladas.

Figura 2. Separación de microorganismo por placa vertida

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 3.3 Obtención de cultivo puro

Procedimiento

 Se realiza la técnica preferencial de agotamiento en superficie sólida.

 Una vez que aparecen las colonias, entonces siembro sólo una porción de
ellas.
 Hago una siembra nueva con esa porción de colonia ( hago una estría)
 Incubo a 30° C por 24 horas.
 Ese viene a ser mi cultivo puro.
 Una vez obtenido puedo ver cómo son las colonias, realizo la tinción de
Gram, prueba de catalasa, pruebas en medios diferenciales, entre otros.

Figura 3. Forma de las colonias, Tinción de Gram, Prueba catalasa en cultivo puro

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4. CONCLUSIONES

- Al realiza la técnica de agotamiento y estriado se debe realizar con el asa

bacteriológica previamente esterilizada y no alejar el procedimiento de la
llama del mechero.
- Para la incubación, adaptamos la temperatura adecuada de acuerdo con el
microorganismo que estamos estudiando.
- Tanto el aislamiento por agotamiento como el de placa vertida tiene
como objetivo principal lograr un cultivo puro de microorganismos.

5. BIBLIOGRAFÍA

Tortora, G., Funke, B., Case, C. (2007).Introducción a la microbiología. España,

Madrid: Médica Panamericana S.A.