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– Laboratorio III Fisiología forestal

Determinación del potencial hídrico en tejidos


de Solanum tuberosum mediante los métodos
de Chardakov y gravimétrico

Viviana Parra Vargas1, Juan Valero Ortiz1.

Parra Vargas, V., Valero Ortiz, J. (2023).

Recepción: 5 de septiembre 2023

RESUMEN.  ABSTRAC. 
Una de las medidas útiles para conocer el estado hídrico de One of the useful measures to know the water status of plants
las plantas puede ser el potencial hídrico (Ψw), el cual se can be the water potential (Ψw), which is largely influenced
encuentra en gran medida influenciado por tres factores la by three factors: the concentration of solutes (osmotic
concentración de solutos (potencial osmótico, Ψπ), la potential, Ψπ), the electrostatic pressure (potential of
presión electroestática (potencial de presión) y la gravedad pressure) and gravity (gravity potential). In the present
(potencial de gravedad). En el presente laboratorio se realiza laboratory, the determination of the water potential in the
la determinación del potencial hídrico en el tejido de tissue of Solamun tuberosum is carried out with the
Solamun tuberosum con método gravimétrico (cambio de gravimetric method (mass change) and the Chardakov
masa) y el método de Chardakov mediante gravimetría en method by gravimetry as a function of the changes, when
función de los cambios, al ser sometidas a una serie de subjected to a series of solutions with sucrose concentrations.
soluciones con concentraciones de sacarosa diferente, se differently, a tabulation of the mass change in percentage is
presenta una tabulación del cambio de masa en porcentaje presented together with a graph in which the water potential
junto con una gráfica en la cual se explica el potencial of S. tuberosum is explained.
hídrico que tiene S. tuberosum.
KEYWORDS: Sucrose concentration, mass change,
PALABRAS CLAVE: Concentración de sacarosa, cambio percentage change.
de masa, porcentaje de cambio.

1 Curso de fisiología forestal, Universidad Distrital Francisco José de Caldas.


Bogotá , Colombia. Códigos: 20191710007, 20192010001.
Observación de la célula vegetal – Laboratorio I
Fisiología forestal
Parra Vargas, V. Valero Ortiz, J.

INTRODUCCIÓN La gravedad (Ψg), causa que naturalmente el


El agua es el componente químico más agua tienda a moverse hacia abajo.  
abundante en las plantas, representando Por lo anterior, Ψw se puede expresar en
entre un 80 y 95% del peso total de los función de estos tres factores como:
tejidos activos. Sus propiedades físico -
químicas, como su pequeño tamaño de Ψw=Ψπ +Ψp +Ψg Ecuación 1
molécula y su naturaleza dipolar, su alta
polaridad y capacidad para formar puentes En donde Ψg es solo considerado por encima
de hidrógeno, su alto calor específico y de 10 m de altura y Ψπ=-RTCs según la
punto de ebullición, su capacidad para ecuación de van’t Hoff (Azcón-Bieto & Talón,
disolver sales iónicas, y su alta adhesión, 2008; Taiz & Zeiger, 2002). 
cohesión y tensión superficial que permiten
la capilaridad y la fuerza tensil, ( Barceló et al., La importancia del potencial hídrico en las
2014); (Campbell et al., 2014), explican su plantas radica en varios aspectos clave como
capacidad para desempeñar una amplia la absorción de agua ya que la dirección del
variedad de funciones en las plantas. El flujo de agua en las plantas. Las raíces de las
citoplasma de la célula vegetal está plantas toman agua del suelo hacia las partes
constituido por agua, esta es el disolvente de superiores de la planta, y esto ocurre porque
gases, iones y nutrientes que se encuentran el potencial hídrico en las raíces es menor
distribuidos por toda la planta (Barceló et que en otras partes de la planta, creando un
al., 2014), el agua se involucra en los gradiente que impulsa el movimiento del
procesos metabólicos, en el mantenimiento agua. También influye en el crecimiento ya
de la turgencia y de la temperatura que, si las células están bien hidratadas, se
mediante la transpiración.  vuelven turgentes y contribuyen al
La relación continua de suelo-planta- crecimiento y la rigidez de la planta. Si el
atmósfera está regida por gradientes de potencial hídrico disminuye
potencial hídrico (Ψw), de mayor potencial a significativamente, las células pueden perder
menor potencial, dicho potencial nos turgencia, lo que puede llevar a la marcha y
permite comprender como las plantas afectar el crecimiento de la planta (Giménez
interactúan con el agua en su entorno y et al. 2018). Así mismo, esta relacionada con
cómo regulan su estado hídrico, elemento la resistencia al estrés hídrico, así, cuando las
crucial en su crecimiento, desarrollo y condiciones ambientales se vuelven secas o
supervivencia. estresantes, las plantas pueden ajustar su
En sí, Ψw es una medida del potencial potencial hídrico para conservar agua,
químico del agua; es decir, de la cantidad de cerrando los estomas y reduciendo la pérdida
energía libre asociada a esta, dividido entre de agua por transpiración (Giménez et al.
el volumen molal parcial del agua, y 2018).
usualmente expresado en mega Pascales
(MPa) (Taiz & Zeiger, 2002). La En esta práctica se determinó el potencial
concentración de solutos, la presión y la hídrico en tejidos de Solanum Tuberosum
gravedad son los principales influenciadores mediante los métodos de Chardakov y
en el potencial hídrico, la representación del gravimétrico, logando identificar las
efecto de solutos disueltos sobre Ψw es la concentraciones de sacarosa en las cuales el
concentración de solutos, la presión tejido se encontraba en soluciones
hidrostática o potencial de presión (Ψp), hipotónicas, hipertónicas e isotónica.
puede ser positivo si se trata de la presión
de turgor o negativo si se trata de tensión. MATERIALES Y MÉTODOS
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concentraciones.
Materiales
Marcador Sharpie negro, bisturí, regla, Determinación del potencial hídrico de
pinzas, gotero, 20 tubos de ensayo, 1 caja Solanum tuberosum a diferentes
Petri, 1 gradilla para tubos de ensayo, agua concentraciones de sacarosa.
destilada, azul de metileno, 10 probetas de
1. Dividir los tubos de ensayo en dos series de 10
100 ml, pinzas, solución molal de sacarosa
tubos cada una. (Serie A y serie B).
(0.05, 0.1, 0.2, 0.25, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7). 2. Numerarlos del 1 al 10. Agregar a cada tubo de
cada serie 10 ml de cada solución de sacarosa de
Equipo concentración molal creciente (Cuadro 1).
Balanza analítica. 3. Serie A. Agregar a cada tubo una gota de la
solución concentrada de azul de metileno tapar
PROCEDIMIENTO los tubos con parafilm y agitar.
4. Serie B. Extraer rectángulos homogéneos de
Preparación de las soluciones a diferentes papa, sólo sí es necesario semisecarlos con papel
concentraciones. absorbente, pesar cada rectángulo y colocar dos
Para preparar una solución 0.1 molal de sacarosa de ellos en cada uno de los tubos de la serie B,
se emplea la siguiente formula: cuidando que queden dentro de la solución. Evitar
maltratar o desecar los tejidos del material
moles de soluto biológico durante el experimento (use la caja de
m= Ecuación 2 Petri). Es decir que se debe trabajar rápidamente
kg solvente pesarlos y colocarlos en los tubos.4
5. Dejar reposar de 1 a 1 hora 30 minutos.
Donde m es molalidad (Pedreros, M. 2020).
6. Transcurrido este tiempo, retirar
Ya que la masa molar de la sacarosa es
cuidadosamente los trozos de papa con las pinzas
aproximadamente 342,3 g/mol, asumiendo que
y secar ÚNICAMENTE el exceso de líquido
los moles de soluto equivalen a 0.1 moles y
superficial con papel absorbente. Posteriormente,
despejando de la ecuación 2 “kg de solvente”, se
pesar los trozos de papa.
logra determinar que se requieren 34.23 g de
7. Verificar qué le ocurrió a la concentración de
sacarosa para preparar una solución 0.1 m.
las soluciones, introduciendo una gota de las
En la balanza analítica se pesan 34.23 g de
soluciones de la serie A con azul de metileno, en
sacarosa, estos son trasvasados a un matraz al
el tubo respectivo de la serie B.
que se le agrega agua destilada hasta que
8. Observar lo que ocurre con la gota y observar
alcanza un volumen total de 1 litro. Finalmente
su movimiento ascendente o descendente. Tenga
se agita la solución cuidadosamente para
en cuenta lo siguiente: aquella solución en la que
asegurar que la sacarosa se disuelva
la gota ni suba ni baje tendrá un potencial
completamente en el agua. En la siguiente tabla
osmótico (y un potencial hídrico) equivalente al
se presentan los pesos de sacarosa para preparar
potencial hídrico del tejido. NOTA: Agregar la
las diferentes concentraciones.
gota de la solución de la serie A en la serie B
(después de sacar el tejido) con sumo cuidado
CONCENTRACIÓN MASA DE SACAROSA
evitando que salga con fuerza de la pipeta.
MOLAL (G)
9. Reporte los resultados: Calcular el potencial
0.05 17.115 osmótico de cada una de las soluciones de
0.1 34.23 sacarosa con la siguiente fórmula:
0.2 68.46
0.25 85.575
Ψ s=−CiRT Ecuación 3
0.3 102.69
Donde; Ψs es potencial hídirco; C, concentración
0.4 136.92
molal de sacarosa; i, constante de ionización; R
0.5 171.15
constante de los gases (0.00831 kg*MPa/mol*K) y
0.6 205.38
T es la temperatura en Kelvin (Azcón, 2000).
0.7 239.61
Tabla 1. Masa de sacarosa para diferentes
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8. Determine el cambio de masa en porcentaje,


mediante la fórmula: % Δ masa vs Ψ
masa final−masainical 8.00
% Δ masa= ∗100 Ecuación
masainicial 6.00
4 4.00

% masa
2.00
0.00
RESULTADOS -2.00
-4.00
[] MASA MASA Δ MASA %Δ Ψ -6.00
SACARO INICIAL FINAL MASA
SA (G) (G) -8.00
0,00 0,8129 0,8668 0,0539 6,63 0,00 -10.00
0,05 0,7298 0,7685 0,0387 5,30 -0,12 -12.00
-1.80 -1.60 -1.40 -1.20 -1.00 -0.80 -0.60 -0.40 -0.20 0.00
0,10 0,8274 0,8803 0,0529 6,39 -0,24
0,20 0,8911 0,9125 0,0214 2,40 -0,48
Potencial Hídrico
0,25 1,0776 1,0908 0,0132 1,22 -0,60
Figura 2. Concentración molal vs cambio de masa de
Solanum tuberosum.
0,30 0,8189 0,8155 -0,0034 -0,42 -0,72
0,40 0,7808 0,7246 -0,0562 -7,20 -0,96
0,50 1,0160 0,9186 -0,0974 -9,59 -1,20
0,60 0,8190 0,7071 -0,1119 -13,66 -1,44
0,70 0,8500 0,7646 -0,0854 -10,05 -1,68

Tabla 2. Potencial hídrico de Solanum tuberosum


diferentes concentraciones. Figura 3. Azul de metileno en las distintas
concentraciones de sacarasa con papa.

ANALISIS DE RESULTADOS
[ ] vs % Δ masa Antes de iniciar con el análisis de los datos es
necesario establecer que los datos para la
8.00
concentración de 0.1 y 0.6 molal fueron omitidos
6.00
para el análisis, ya que estos presentaban
4.00 inconsistencias ya que se supone, el cambio de
2.00 masa debería estar dentro menor que el anterior
% Cambio de masa

0.00 y mayor al siguiente, este error se pudo deber a


-2.00 un error en la toma del peso por parte del
investigador.
-4.00
El método seleccionado para medir el potencial
-6.00 hídrico tiene por finalidad establecer el medio
-8.00 hipertónico, el medio isotónico y el medio
-10.00 hipotónico, aquí se va a resaltar la condición
-12.00 isotónica, aquella solución donde las condiciones
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 externas e internas sean iguales y que
corresponden al potencial hídrico del tejido
[ ] molar
vegetal. En la figura 1 se representan los cambios
de peso que experimento los tejidos de Solanum
Figura 1. Concentración molal vs cambio de masa de Tuberosum sometidos a las diferentes
Solanum tuberosum. concentraciones de sacarosa, las variaciones del
porcentaje cambio de peso con respecto al
potencial hídrico de solución, por encima de cero
se deben comprender como una ganancia en masa
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con respecto a la masa original; en ese sentido, 0.3 el azul de metileno queda arriba,
los valores menores a cero están indicando la contrario en las concentraciones de 0.4 a 0.7
pérdida de masa con respecto a la inicial. en donde se ve como se distribuye a lo largo
Lo ocurrido constata lo mencionado en la de la columna, lo que indica que estas
literatura (Barceló et al. 2014)(Azcón, 2000)
últimas el tejido perdió peso, lo que es
(Melgarejo, 2010), que básicamente resumen
que conforme el potencial hídrico es más
consecuente con los datos presentados en la
negativo, se tienen soluciones hipertónicas en las tabla 2, en la que se aprecia como a partir de
cuales la concentración de solutos es mayor en el concentraciones de 0.3 m, la columna de
medio en el que esta que en la célula, ella cambio de masa es negativa.
empieza a liberar agua para compensarse; es
decir, se plasmolisan, y si pierden agua pierden CONCLUSIONES  
peso; cuando las soluciones tienen un potencial Se determinó el potencial hídrico en tejidos
hídrico mayor sucede lo contrario, el medio es de Solanum Tuberosum mediante los métodos
hipotónico, aquí el agua del medio lo recibe la de Chardakov (densimétrico) y gravimétrico,
célula y está ganando masa. En el punto más logando identificar las concentraciones de
cercano a cero, 0.3 molal, el cambio de peso fue
sacarosa en las cuales el tejido se encontraba
mínimo, allí es el medio o punto isotónico, en
otras palabras, está en equilibrio, de acuerdo en soluciones hipotónicas, en este caso el
con la tabla 2, el potencial hídrico para este tejido gano agua desde concentraciones de 0
punto es de 0.72 MPa. a 0.25 m; hipertónicas, es decir, que el tejido
La figura 2 sirve para presentar lo expuesto vegetal perdió agua, en concentraciones de
arriba; sin embargo, emplea a cambio de la 0.4 a 0.7 m e isotónica alrededor de 0.3 m.
concentración de la solución de sacarosa, el
potencial hídrico, al comparar la figura 1 con Como se evidenció, existe una relación
la figura 2, podemos ver que estas presentan inversa entre potencial hídrico y
una curva igual, aunque reflejada por un eje concentración molal, así, a mayor
en y, esto simplemente nos muestra la concentración menor potencial.
proporcionalidad inversa entre la
concentración y el potencial osmótico, ya Se pudo constar mediante el método
que, a mayor concentración, menor gravimétrico como con el densimétrico, que
potencial osmótico. la concentración isotónica para el tejido
En la figura 3 se observa el método vegetal es de 0.3 m.
densimétrico, este método de tanteo
permite identificar el potencial hídrico de REFERENCIAS
una solución agregando azul de metileno en  Ausiovisuales UNED, 2021. Universidad
una solución de sacarosa de concentración Estatal a Distancia de Costa Rica. Costa
Rica.
conocida, posteriormente de esta solución se
le agrega una gota a una nueva disolución  Azcón J. y Talón M. (2000). Fundamentos
de fisiología forestal. McGRAW-HILL -
con igual concentración de sacarosa en la
INTERAMERICANA DE ESPAÑA, S. L.
que previamente hubo tejido vegetal, en  Barceló, J., G. Nicolás, B. Sabater & R.
este caso tejido de Solanum tuberosum, si la Sánchez. (2014). Fisiología Vegetal.
gota se distribuye a lo largo de la columna Ediciones Pirámide. Madrid, España.
de disolución entonces el potencial vegetal y
 Bidwell, R.G.S. 1993. Fisiología Vegetal.
del agua son iguale, por el contrario si la AGT editor, S.A. México.
gota sube quiere decir que el tejido perdió
 Giménez Daniel O. (2018). Fisiología
agua, por lo tanto su potencial hídrico es vegetal, curso 2018. Economía del agua.
menor (Audiovisuales UNED, 2021), como se Universidad de ciencias agrarias y
observa, en las en concentraciones de 0.5 a forestales. La Plata. Argentina.
Observación de la célula vegetal – Laboratorio I
Fisiología forestal
Parra Vargas, V. Valero Ortiz, J.

 Melgarejo, Luz Marina (2010).  Pedreros M. 2020. Molalidad y fracción


Experimentos en Fisiología Vegetal, mol. Colegio concepción San Pedro.
Universidad Nacional de Colombia. Santiago de Chile. Chile.

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