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PRACTICA N° 6
El agua viaja desde las zonas donde el potencial hídrico es mayor (menos negativo) hacia las
zonas donde este es menor (más negativo). El potencial hídrico se define según la ecuación: Ψw
= p – s donde “Ψw” es el potencial hídrico; “p” es la presión de turgor o la fuerza hidrostática
ejercida en la célula vegetal contra la pared celular y es de signo (+), y “s” es la presión
osmótica, que es una medida de la concentración de los solutos (Taiz y Zeiger, 2006 en:
Moreno, 2009).
La principal fuerza motora que impulsa al agua en su viaje a la parte aérea es la pérdida de agua
en las hojas por transpiración.
El potencial hídrico está constituido por varios potenciales que influyen sobre el movimiento del
agua, que pueden actuar en las mismas o diferentes direcciones. Dentro de complejos sistemas
biológicos, estos factores de potencial juegan un rol de importancia. Por ejemplo, la adición de
solutos al agua disminuye su potencial hídrico, haciéndolo más negativo, como también un
incremento en la presión aumenta su potencial, haciéndolo más positivo. Si es posible, el agua
fluirá desde un área de alto potencial hídrico hacia un lugar con potencial menor. Un ejemplo
muy común es el agua que contiene sal disuelta, como el agua de mar o la solución dentro
de células vivas. Estas soluciones generalmente tienen potenciales hídricos negativos, en
relación al agua pura de referencia (con potencial igual a cero). Si no hay ninguna restricción en
el movimiento, las moléculas de agua fluirán desde el agua pura hacia el menor potencial
hídrico de la solución. Este flujo continúa hasta que la diferencia en el potencial soluto se
equilibre con otra fuerza, como puede ser, el potencial presión.
El potencial hídrico hace referencia a la energía potencial del agua, o sea, la energía libre que
poseen las moléculas de agua para realizar trabajo. Cuantifica la tendencia del agua de fluir
desde un área hacia otra debido a ósmosis, gravedad, presión mecánica, o efectos mátricos como
la tensión superficial. Es un concepto generalmente utilizado en fisiología vegetal que permite
explicar la circulación del agua en las plantas; como así también en los animales y el suelo. Se
representa comúnmente con la letra griega Ψ (Psi).
2. Objetivos
1. Observar los cambios de turgencia que ocurren en las células vegetales cuando están en
contacto con medios hipertónicos, hipotónicos e isotónicos.
2. Determinar el potencial hídrico de tejidos vegetales mediante los métodos gravimétricos y
densitométrico.
3. Evaluar cada método en busca de fuentes de error.
4. Calcular el contenido hídrico de un tejido celular.
5. Diferenciar entre contenido de agua y potencial hídrico.
3. Procedimiento
Experimento Nº 1
Cambios de turgencia celular.
Si
un
tejido vegetal se introduce en una solución, sus células se pueden encontrar en tres
estados osmóticos diferentes dependiendo de cual sea el potencial de solutos de ese
medio externo
Turgencia Célula plasmolizada
Fotografía de células
de Elodea plasmolizadas tras
haber sido sumergidas en una
solución concentrada de sacarosa.
Experimento 2
a) Método volumétrico: se basa en la medida de los cambios de las dimensiones lineales de las
células cuando estas se colocan en soluciones de diferente potencial osmótico.
b) Método gravimétrico: se basa en la medida de los cambios de peso que experimentan trozos
de tejido al ser colocados en soluciones de distinta concentración de sacarosa u otro soluto
apropiado. La solución en que no cambie de peso se considera que tiene un potencial hídrico
que corresponde al tejido.
c) Método refractométrico: consiste en sumergir fragmentos de tejidos en soluciones de
potencial osmótico variable y determinar mediante un refractómetro, la solución en que no hay
un cambio de concentración.
d) Métodos de presión de vapor: Psicrómetros. Se basan en el hecho de que la presión de
vapor de la atmósfera que circunda a un tejido colocado en una cámara cerrada se halla en
equilibrio con el potencial agua del tejido. En dicha cámara se halla instalada una pequeña
termocupla. Se utiliza el llamado efecto Peltier para la medición del potencial agua de la
atmósfera de la cámara en equilibrio con el tejido. Una débil corriente electrónica enfría la
termocupla, determinando la condensación de una pequeña cantidad de agua depositada en ella.
Cuando se interrumpe la corriente el agua condensada se evapora de la termocupla con mayor o
menor velocidad, según sea la presión de vapor de la atmósfera de la cámara.
Técnica operatoria
Colocar dos series de 12 tubos de ensayo cada una, numerarlos y añadir a cada uno de ellos 10
ml de la solución de sacarosa correspondiente a su número de acuerdo a lo indicado en la
siguiente tabla:
Experimento 3
El método de Chardakov para la determinación del potencial hídrico se basa en el hecho de
que un tejido vegetal no pierde ni gana agua cuando se introduce en una disolución que tiene su
mismo potencial hídrico. Si un tejido se introduce en una disolución de menor potencial hídrico,
las células perderán agua y consecuentemente, la disolución se diluirá y se hará menos densa.
Si, por el contrario, el tejido se introduce en una disolución de mayor potencial hídrico (menos
negativo), sus células ganarán agua y consecuentemente, la disolución se hará más concentrada
y por tanto más densa.
MÉTODO
Se preparan dos series de 5 tubos de ensayo con diferentes concentraciones de sacarosa, de
modo que tengan distinto potencial hídrico (-0.1; -0.3; -0.5; -0.7 y -0.8 Mpa). A cada uno de los
tubos gruesos se les añaden 15 ml de solución de sacarosa sin teñir. A cada uno de los 5 tubos
de ensayo normales se les adicionan 3 ml de las diferentes soluciones, en este caso teñidas con
azul de metileno.
Transcurridos entre 1.5 y 2 horas, se retiran los cilindros de sus respectivos tubos y se procede
de la siguiente manera: Añadir 2-3 gotas de cada una de las disoluciones que contienen azul de
metileno en la correspondiente a la serie con el material vegetal y observar su movimiento
ascendente o descendente. Aquella solución en la que la gota ni suba ni baje tendrá un potencial
osmótico (y un potencial hídrico) equivalente al potencial hídrico del tejido.
CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es el potencial hídrico del tejido vegetal?
El potencial hídrico es proporcional al trabajo requerido para mover un mol de agua pura a
temperatura y presión ambiental a otro estado a la misma temperatura. En concreto el
potencial hídrico se refiere al estado del agua en las plantas.
2. ¿Por qué el tejido gana o pierde masa? ¿Qué ocasiona este comportamiento?
Este método consiste en que si el tejido no cambia su peso este está en una
solución que corresponde a su potencial hídrico, por lo tanto que si su peso se incrementó la
solución no corresponde al potencial hídrico de dicho tejido.
Lo que ocasiona ese comportamiento es debido a que la solución comienza a entrar al interior
de las células.
7. ¿Cómo se modifica el potencial hídrico celular y cada uno de sus componentes cuando
las células se encuentran en contacto con un medio iso, hiper e hipotónico?
A medida que se produce el ingreso de agua a través de la pared celular y la membrana
citoplasmática, aumenta el total de agua presente dentro de la célula, la cual ejerce una presión
hacia afuera que está contenida por la rigidez estructural de la pared celular. Ejerciendo esta
presión, la planta puede mantener su turgencia, y por lo tanto, la rigidez de la planta. Sin la
turgencia, la planta pierde su estructura y se marchita.
8. ¿Qué similitudes y diferencias existen entre los métodos evaluados para determinar el
potencial hídrico de un tejido vegetal?
Se puede realizar mediante métodos volumétricos o gravimétricos: normalmente con tiras
finas de patata, se observa el cambio en su peso o volumen.