MANUAL DE PRACTICAS DE FISIOLOGIA VEGETAL

Facultad de Ciencias Agropecuarias - UNER

Autores: Lallana, V.H. y Lallana Ma. del C. (2001)

RELACIONES HIDRICAS DE CELULAS Y TEJIDOS

Contenido:

A. Plasmólisis y turgencia

B. Medición del potencial hídrico

C. Absorción de agua en relación con el potencial agua del medio

D. Estomas y transpiración

a una presión de 1 atmósfera y a una elevación y temperatura (generalmente 25 ºC) que pueden especificarse. bares ó J. La difusión se produce desde la zona de mayor potencial agua (ya) a la de menor potencial agua (ya). del C. En el caso del potencial agua el estado de referencia es el agua pura (Ψw = 0).m-1 por lo que puede despreciarse. colocamos un disolvente puro (por ej. a menos que la solución se coloque en un osmómetro. Pascal (Pa): Pa = 1 N m-2 = 1 Jm-3 = 10-5 bares. presión. interacción con otras sustancias. etc. expresándose en unidades SI. Para el caso de las plantas. es preferible usar el término "potencial osmótico".A. estableciendo un sistema continuo en toda la planta.Lallana. Como toda energía potencial.kg-1) que es equivalente a las de presión. representa la presión ejercida por la pared celular (puede asumir valores positivos en células turgentes o puede llegar a 0 en células fláccidas). es decir su capacidad de realizar trabajo. el valor del Ψw es negativo. se define en relación a un nivel de energía arbitrario o estado de referencia. Como no se origina una presión real. Pero lo que realmente da una idea y una medida de cómo el agua puede desempeñar estas funciones es su capacidad para realizar trabajo.H. La Presión Osmótica se puede definir como el exceso de presión hidrostática que debe ser aplicado a la solución para lograr un potencial hídrico igual al del agua pura. excepto en árboles de gran altura). con el objeto de contrarrestar el desequilibrio generado en ambos medios. ⇒ 25 . Presión Osmótica.87 atm). observaríamos el pasaje del disolvente puro hacia la solución. H2O).01 MPa. representa el potencial derivado de la presencia de solutos (nunca es superior a 0. Por lo tanto la determinación del potencial agua resulta de la suma algebraica de los distintos componentes. Ψg = potencial gravitacional representa la influencia del campo gravitatorio (es de sólo 0. y una solución (en el mismo disolvente) de una sustancia que no pase a través de la membrana. disolvente de gases. efecto del campo gravitatorio. El agua que forma parte de cualquier sistema puede hallarse sometida a diversas condiciones de temperatura. participa en algunas reacciones directamente como metabolito (por ejemplo en la reacción de Hill). Manual de Prácticas de Fisiología Vegetal . y la fuerza que lo produce. El potencial agua se puede expresar en: atmósferas. Ψm ó τ = potencial matricial. mantiene la turgencia celular dando la rigidez que normalmente se observa en los órganos herbáceos. por lo que toma valores negativos). PLASMOLISIS Y TURGENCIA Introducción: El agua en las planta cumple varias funciones: constituyente del citoplasma. que junto con las macromoléculas coloidales determina su estructura y grado de agregación. iones y solutos. (2003) Pág.Edición digital . El Ψw tiene dimensiones de energía por unidad de masa o volumen (J. representa los efectos mátricos (asume valores negativos de importancia en células jóvenes y se hace despreciable en células maduras). Estas condiciones modifican su estado energético. y Lallana Ma. Los valores en la célula son del orden de megapascales (MPa = 10 bares = 9. V. Si separados por una membrana semipermeable. Existe un parámetro que expresa esa capacidad: el potencial agua (Ψa ó Ψw) Es decir que el agua en una célula se halla sometida a la influencia de dos o más de estas condiciones. Ψp ó P = potencial de presión.kg-1. Este proceso se denomina ósmosis. Los componentes del potencial agua y su simbología a nivel celular son: Ψa = Ψo + Ψp +Ψm + Ψg Ψa ó Ψw = potencial agua Ψo ó π = potencial osmótico.

pared celular. En este c aso el potencial agua es el mismo a través de todo el sistema. Sin embargo dado que la planta permanentemente está perdiendo o ganando agua. el agua entra y sale de ella en igual proporción. plasmalema. Entonces cuanto mayor sea la concentración o p. Esquema de una células plasmolizadas y turgente: Referencias: v. mientras que en la pared se debe a las fuerzas mátricas y en pequeño grado a las osmóticas. V. En el citoplasma de una célula turgente son importantes tanto el Ψo como el Ψm y el Ψp. y normalmente se encuentra en un medio isotónico.Toda célula tiene una determinada y constante Ψo. vacuola. orgánulos y vacuola. es decir un medio que tiene igual Ψo que la del contenido celular. Pa. Cuando una célula se encuentra en un medio isotónico no sufre modificación alguna.Edición digital . es decir el interior de Manual de Prácticas de Fisiología Vegetal . PLASMOLISIS y TURGENCIA El fenómeno de plasmólisis se produce cuando un grupo de células ha sido colocado en el interior de una disolución hipertónica (mayor concentración de solutos que el jugo celular). hacia la región de mayor concentración de soluto. Al reducirse el volumen vacuolar por la pérdida de agua. A mayor concentración de solutos. En la vacuola el Ψa se debe principalmente a las fuerzas osmóticas y de turgencia. Este proceso se denomina plasmólisis. citoplasma. y Lallana Ma. osmótica.H. mayor será el grado de plasmólisis que experimenten dichas células. osmótica.Lallana. que tenga la solución que rodea la célula. mayor p. protoplasma. disminuye al mismo tiempo. Los esquemas 1 a 4 indican distintos tipos de plasmólisis y el 5 la misma célula turgente. del C. habrá difusión neta de agua del medio. ⇒ 26 . es decir en la pared celular. la presión de turgencia hasta valores insignificantes por lo tanto las células pierden turgencia y el contenido protoplasmático (citoplasma y núcleo) se contrae y comienza a separarse de la pared celular. que en este caso es hipotónico. los componentes del Ψa pueden diferir en los compartimentos celulares. Pl. (2003) Pág. Por el contrario si colocamos la célula en agua pura o en una solución muy diluida (de menor concentración que el jugo celular). Pr. el jugo celular pierde agua pasando ésta a la disolución que la rodea (exósmosis). A.

evaporación.Edición digital . por agua de grifo. Dibujar lo observado.la célula (endósmosis). Objetivo: Observar el fenómeno reversible de plasmólisis. c) Método refractométrico: consiste en sumergir fragmentos de tejidos en soluciones de potencial osmótico variable y determinar mediante un refractómetro. por ejemplo por la liberación de las tensiones del tejido. Es difícil aunque no imposible determinar el potencial hídrico del jugo vacuolar en una planta multicelular intacta y puesto que el potencial puede cambiar de inmediato tras el corte. Sustituya la disolución que causó plasmólisis. explicarlo y redactar el informe correspondiente.Lallana. las medidas que se hacen sobre grupos de células aisladas no son más que groseras aproximaciones de los valores reales in situ. MEDICION DEL POTENCIAL HIDRICO Introducción: Casi todos los métodos que calculan el potencial hídrico consisten en la determinación de éste en un medio en donde una célula ni absorbe ni pierde agua. Técnica operatoria: Coloque algas verdes sobre un portaobjetos o trozos de epidermis de Roheo. ⇒ 27 . alcanzando la presión de turgencia un valor máximo. Se utiliza el llamado efecto Peltier para la medición del potencial agua de la Manual de Prácticas de Fisiología Vegetal . La absorción o pérdida de agua por los tejidos se puede calcular por los siguientes métodos: a) Método volumétrico: se basa en la medida de los cambios de las dimensiones lineales de las células cuando estas se colocan en soluciones de diferente potencial osmótico.. En dicha cámara se halla instalada una pequeña termocupla. b) Método gravimétrico: se basa en la medida de los cambios de peso que experimentan trozos de tejido al ser colocados en soluciones de distinta concentración de sacarosa u otro soluto apropiado. B. La solución en que no cambie de peso se considera que tiene un potencial hídrico que corresponde al tejido. mojando bien el material vegetal y observe el tiempo necesario para que la plasmólisis desaparezca. De este modo la célula sufrirá un aumento de volumen. El proceso continúa hasta que la pared celular (poco elástica) no cede más. d) Métodos de presión de vapor: Psicrómetros. la solución en que no hay un cambio de concentración. Observe el estado de turgencia de las células. Se basan en el hecho de que la presión de vapor de la atmósfera que circunda a un tejido colocado en una cámara cerrada se halla en equilibrio con el potencial agua del tejido. Este fenómeno se denomina turgencia. (2003) Pág. completamente turgente.H. La célula se encuentra saturada de agua. del C. verifique el tiempo necesario para que se produzca la plasmólisis. Coloque un grupo de algas (o epidermis de Roheo) en una solución de sacarosa y H2O. etc. y Lallana Ma. V. debido a que el agua pasa en mayor proporción desde el medio (hipotónico) hacia el interior de la célula.

85 Ψo (atm.8.3 . pesar de nuevo y medir su longitud.7 .6 .55 0.6 . y Lallana Ma. numerarlos y añadir a cada uno de ellos 10 ml de la solución de sacarosa correspondiente a su número de acuerdo a lo indicado en la siguiente tabla: Tubo N° 1 2 3 4 5 6 molaridad de la solución 0.35 0.1 Tubo N° 7 8 9 10 11 12 molaridad de la solución 0.1 mm y pesar con una precisión de 1 mg (hacer estas operaciones rápidamente a fin de evitar pérdidas de agua). La solución donde no se produce movimiento da el valor del potencial agua del tejido. f) Método densimétrico: Chardakov: Se basa en encontrar por tanteo una solución cuyo potencial sea igual al potencial agua del tejido.15 0. Cuando un tejido se introduce en agua o en una solución se produce un intercambio de agua hasta alcanzar el equilibrio.40 Ψo (atm. para hacer exudar la savia hacia afuera del tejido.75 0.65 0. según sea la presión de vapor de la atmósfera de la cámara.) . Esto puede medirse apropiadamente utilizando un colorante y observando el movimiento de la gota coloreada.4 .11. del C.1.Edición digital . Colocar uno de estos cilindros en cada tubo de ensayo. considerándose dicha presión igual al potencial agua del tejido. Al cabo de una hora y media tomar un cilindro de tejido vegetal de uno de los tubos.9. e) Método de presión: Bomba de Scholander: Se basa en determinar la presión que es necesario realizarle a una hoja.16 . Manual de Prácticas de Fisiología Vegetal . Medir con la ayuda de una lupa. será igual al potencial hídrico de la solución externa.05 0.19.atmósfera de la cámara en equilibrio con el tejido.45 0. ⇒ 28 . teniendo la precaución de dejar las soluciones tapadas y conservarlas para la segunda parte de la práctica.23.25 0. (2003) Pág.14.) . previo calibrado del aparato.volumétrico y densimétrico.1 . Una débil corriente electrónica enfría la termocupla. determinando la condensación de una pequeña cantidad de agua depositada en ella. con tolerancia de ± 0. cortarlos de la misma longitud.0 . por el método gravimétrico . Técnica operatoria Colocar dos series de 12 tubos de ensayo cada una. El equilibrio se alcanza en unos 15 minutos.H. Repetir a continuación con los otros cilindros. y con la ayuda de cuchillas fijas.12. Cuando se interrumpe la corriente el agua condensada se evapora de la termocupla con mayor o menor velocidad.6 Con la ayuda de un sacabocados obtener cilindros de tejido de papa. El enfriamiento de la termocupla genera una corriente eléctrica que se lee en el microamperímetro.Lallana.27. Dicho valor puede ser transformado directamente en lecturas de ya o en bares o atmósferas.7 .50 0. en ese momento el potencial hídrico del tejido. V. Secar rápidamente en superficie sobre papel de filtro.4.30 0. El objetivo de este trabajo práctico será determinar el potencial agua de un tejido.3 .6.

Los cambios en la densidad de las soluciones utilizadas en el apartado anterior. Dpto. Departamento de Agronomía. A. 41 p. 61 p. "Las plantas y el agua". del C. . 1992. . C. Pág. . y Lallana Ma.Brevedan. 99 p.Edición digital . 1992. Barcelona. J.Chardakov Tomar una serie de 12 tubos de ensayo. Manual de Prácticas de Fisiología Vegetal.Sívori. V. del mismo modo que en la primera parte del trabajo práctico. Registre sus datos y redacte el informe correspondiente. Observar si la gota asciende. Agropecuarias. Manual de Prácticas de Fisiología Vegetal .H. desciende o permanece estacionaria. N. es decir de la misma densidad inicial.. N.. Guía de Trabajos Prácticos de Fisiología Vegetal.Sutcliffe. C.Monerri. E. 158 p. para que la solución adquiera un color azul claro. El potencial hídrico del tejido es igual al potencial osmótico de la solución en el que la gota no se mueve en ningún sentido. Cs. Guía de Trabajos Prácticos de Fisiología Vegetal. U. Omega. Univ.S. 681 p. Curvetto. U. . Ledesma. Hemisferio Sur. 322-332.1984. y otros. J. y otros. Cap. Cuadernos de Biología.Lallana. Bahía Blanca. J. Biología Vegetal. y Guardiola.N. una gota de la solución coloreada con azul de metileno del mismo número. R. XI. se determinan colocando en el centro de cada tubo con la ayuda de una micropipeta. Fac. Politécnica de Valencia. "Fisiología Vegetal". 1980. Añadir en cada caso unos pocos mg de azul de metileno. (2003) Pág.Arguello. Lecturas complementarias: . ⇒ 29 . 1996. y otros.

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