FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD

BIOQUÍMICA

"Factores que afectan la actividad Enzimática"

Grupo: 5
INTEGRANTES CORREO PORCENTAJE
Lara Chuquin, Maylin 100113540@cientifica.edu.pe 100%

Sudario Ari, Brissa Fernanda 100121268@cientifica.edu.pe 100%

Quispe Chumbez, Ingrid Evelyn 100112575@cientifica.edu.pe 100%

Quispe Suero Luciana Margarita 100117411@cientifica.edu.pe 100%

León Murrugarra Manuel 100099988@cientifica.edu.pe 100%

Sebastián

Docente: Yojani Bereniz Salazar

Día – Sección: 23/04/2023 - 3k1

2023-1
INTRODUCCIÓN:
Según Cardona Serrate, F. (2020). Las enzimas son moléculas orgánicas que
actúan como catalizadores de reacciones químicas, es decir, aceleran la velocidad
de reacción ,además la actividad catalítica de las enzimas depende de que
mantenga su plegamiento , es decir ,su estructura tridimensional. En esta estructura
tridimensional se forman cavidades ,llamadas “sitios activos”, las cuales demuestran
afinidad por las moléculas específicas (sustratos) que se convierten en productos
.Ramírez, J. R., & Aceves, M. A. (2014).Los factores que afectan la actividad
enzimática son la temperatura, por ejemplo; cuando la temperatura aumenta, lo
hace también la actividad enzimática hasta llegar a un punto máximo, no obstante,
el exceso de calor puede provocar la desnaturalización de la enzima. (Ref: Nelson,
D. L., & Cox, M. M. (2017). Otros factores que afectan son el PH, debido a que las
enzimas tienen un pH óptimo en el que funcionan mejor o peor, finalmente, la
concentración de enzima sustrato juega un rol muy importante en la velocidad con la
cual se obtienen los productos finales.

OBJETIVOS
- Determinar el Km y Vmáx experimental de la pepsina para la albúmina a
partir de la gráfica de Vi contra [S].
- Determinar el Km experimental de la pepsina para la albúmina a partir de
de la gráfica de dobles recíprocas 1/Vi contra 1/[S].
- Explicar la actividad enzimática de la pepsina sobre la actividad de la
pepsina.
- Explicar el efecto de los factores enzimáticos sobre la actividad de la pepsina.

MATERIALES
Materiales en las mesas de los estudiantes
- 01 gradilla
- 17 tubos de ensayo 13x100mm
- 01 piseta con agua destilada
- 04 pipetas graduadas o volumétricas 5 mL
- 04 propipeta

Reactivos en la mesa de los estudiantes

- 01 Solución de albúmina 25 mL
- 01 pepsina 2% frasco 5 mL
- 01 Solución de HCl 1N 5 mL

Materiales en la mesa central de profesor

- 01 baño maría 37°C o plancha de calentamiento
- 01 termómetro
MÉTODOS

- Pepsina al 2%
Pesar 2 g de pepsina en la balanza analítica, luego agregar agua
destilada hasta completar un volumen de 100mL.

- Albúmina [1.3] de Absorbancia a 450 nm

Solución madre: Cocer en un beaker de 1000 ml dos huevos (15 minutos
aproximadamente). Separar la clara y licuar con agua destilada a una
capacidad para 250 ml. Luego filtrar 2 veces con papel toalla.
Realizar una dilución de la solución madre de albúmina a 3.7x (5.40 ml
para cada 20 ml). Verificar con el espectrofotómetro una absorbancia de
1.3 aproximadamente a una longitud de onda de 450 nm.
RESULTADOS
DISCUSIONES :
Las concentraciones de albúmina de la primera tabla ,las obtuvimos usando la
fórmula:
C1.V1=C2.V2

Donde C1 viene a ser la concentración de la albúmina al 5%, V1 es la cantidad de

albúmina que se echa en cada tubo y V2 es la suma de las sustancias agregadas al
tubo. Así pues se necesita hallar C2 por que a través de la fórmula ya mencionada
se estaría obteniendo la concentración de albúmina que después ayudaran a
encontrar el km.
Luego de este proceso encontraremos la actividad enzimática que se obtiene a
través de la lectura final menos la lectura inicial las cuales sacamos del
espectrofotómetro .
Finalmente se obtiene Km a través de la velocidad media por la concentración entre
la velocidad máxima, donde la concentración es de la velocidad máxima y la
velocidad media es la mitad de la velocidad máxima lo que nos da un valor de 2.25,
quiere decir que es el mínimo de sustrato requerido para que la enzima en cuestión
trabaje al 50% de su velocidad.

CONCLUSIÓN
- La pepsina se produce en el estómago el cual es producida primero como una
pro enzima, que es el pepsinógeno, el cual para activarla tiene que encontrarse
en una temperatura adecuada y juntarse con el Ácido Clorhídrico para obtener
su capacidad enzimática, actuando sobre las proteínas para degradarlas,
rompiendo los enlaces peptídicos, pasando proteínas hasta polipéptidos de alto
peso molecular.
- Para que la Pepsina pueda estar activa y cumpla sus funciones, al comienzo en
su estado inactivo, el Pepsinógeno tiene que cumplir 2 factores para activarse
que son poseer una temperatura a 37°C y cantidades de Ácido Clorhídrico.Estos
factores, como es el pH que depende del comportamiento ácido base de la
enzima y del propio sustrato, los cuales pueden contener grupos funcionales
ácidos y básicos, siendo su grado de disociación dependiente del pH. O en el
caso de la temperatura si es baja <35° la relación podría volverse lenta y si es
>45° podría desnaturalizarse.
- Se concluye que las enzimas requieren de ciertas condiciones quesean
adecuadas según su naturaleza para actuar de manera óptima ya sean el pH
del ambiente, la temperatura, la concentración del sustrato o de la enzima entre
otras, ya que sino estas podrían generar su desnaturalización

RECOMENDACIONES
- Utilizar guantes al manejar las sustancias
- Utilizar correctamente el espectrofotómetro
- Agarrar el blanco por las caras rugosas y no por las caras lisas
REFERENCIAS
● Cardona Serrate, F. (2020). Los enzimas. Introducción a la enzimología.
https://riunet.upv.es/bitstream/handle/10251/146362/Cardona%20-%20LOS%
20ENZIMAS.%20INTRODUCCI%c3%93N%20A%20LA%20ENZIMOLOG%c
3%8dA..pdf?sequence=1&isAllowed=y
● Ramírez, J. R., & Aceves, M. A. (2014). Enzimas:¿ qué son y cómo
funcionan?. https://www.ru.tic.unam.mx/handle/123456789/2274
● Nelson, D. L., & Cox, M. M. (2017). Lehninger principles of biochemistry (7th
ed.). Omega.