Universidad Autónoma de Chiriquí Facultad de Medicina

Escuela de Tecnología Médica

Técnico Asistente de Laboratorio Clínico Sanitario

Materia:

Tema:

Enzimas

Profesora:

María Ríos De Iglesias

Integrantes:

Adrian Palacios 4-824

Salvador millan4-789-22

Katherine Small 1-766-605

Grupo 1a Año 2023

 Laboratorio Nº 6
ENZIMAS
Elaborado por: MSc María Félix Ríos de Iglesias
Objetivos:
● Demostrar la presencia de la enzima catalasa en tejidos animales y
vegetales y analizar algunas de sus propiedades.
● Comprobar la acción de la temperatura y el pH sobre la actividad de las
enzimas.
● Comprobar la acción hidrolítica de la amilasa.
● Demostrar la acción de la pepsina en la digestión proteica
● Demostrar la acción de la lipasa en la digestión de los lípidos

Introducción:

Las enzimas están constituidas por polímeros de aminoácidos, que actúan como
catalizadores en el metabolismo de los seres vivos. Modulan o influyen en la velocidad de
las reacciones sin alterar su punto de equilibrio. Pueden actuar fuera de la célula. La
sustancia (el o los reactantes) sobre los cuales actúa la enzima se denominan sustratos.

Casi todas las enzimas son mucho más grandes que los sustratos sobre los que
actúan, y solo una pequeña parte de la enzima (alrededor de 3 a 4 aminoácidos) están
directamente involucrados en la catálisis. La región que contiene estos residuos
encargados de catalizar la reacción es conocida como centro activo.

Al igual que las demás proteínas, las enzimas se componen de una cadena lineal
de aminoácidos que se pliegan durante el proceso de traducción para dar lugar a una
estructura terciaria tridimensional de la enzima, susceptible de presentar actividad. Cada
secuencia de aminoácidos es única y por tanto da lugar a una estructura única, con
propiedades únicas. En ocasiones, proteínas individuales pueden unirse a otras proteínas
para formar complejos, en lo que se denomina estructura cuaternaria de las proteínas.

Materiales: Hígado, papa, agua oxigenada (peróxido de hidrógeno), solución de pH 4,

solución de pH 12, termómetro, almidón, benedict, lugol, galletas sin sal, hidróxido de
sodio al 40%, sulfato de cobre al 2%, ácido acético, .pepsina 1%, Biuret, albúmina, HCl
0.2%, solución de bilis, pancreatina (1%), incubadora.

Procedimiento:

A- Reconocimiento de la catalasa.

La catalasa es una enzima que se encuentra en las células de los tejidos animales y
vegetales. La función de esta enzima en los tejidos es necesaria porque durante el
metabolismo celular, se forma una molécula tóxica que es el peróxido de hidrógeno o
agua oxigenada (H202). La catalasa la descompone en agua y oxígeno, por lo que
soluciona el problema.
 a. En un tubo de ensayo, coloque un trocito de hígado, añada 4ml de agua
oxigenada (peróxido de hidrógeno). Observe el burbujeo. ¿A qué se debe esta
reacción Enzima catalasa Cuáles son los productos formados? Agua y se liberó
oxígeno.
b. A otro tubo de ensayo coloque un pedacito de papa de 1 cm cúbico, añada 4 ml de
agua oxigenada. Observe la reacción. ¿Las burbujas formadas ocurrieron con la
misma intensidad que con el hígado? No A qué cree Usted que se debe este
resultado? Primero porque la papa tiene menor cantidad de catalasa que el
hígado, pero también se debe que en la papa hay pared celular.

B- Efecto de la temperatura y el PH en la actividad enzimática:

a- Coloque un trocito de hígado en tres tubos de ensayo. Deje uno a temperatura
ambiente, hierva otro en baño maría por 30 minutos y el último, colóquelo en hielo
por 30 minutos. Pasado ese tiempo, añada a cada tubo de ensayo con una pipeta
3 ml de agua oxigenada. Observe la reacción y compare sus resultados
Que a cada temperatura se forman distintas reacciones el hígado que estuvo
en hielo actúa mas lento, el que estuvo en alcohol actuó un poco mas
acelerado, pero a temperatura ambiente fue la mejor reacción
b- ¿Qué efecto puede tener la temperatura en la actividad enzimática? Mayor
efervescencia a temperatura ambiente, a temperaturas altas las enzimas se
pueden desactivar o desnaturalizarse

Enumere 3 tubos de ensayo y coloque un trocito de hígado en cada uno de ellos. Al nº 1

añada una solución con pH 4; al nº 2 una solución con pH 12 y al nº 3 añada agua
destilada. Espere unos 5 minutos, decante el líquido y añada 3ml de agua oxigenada a
cada tubo de ensayo. Observe los resultados y compare pH 7 o neutro es el óptimo
para la catalasa, en el pH 12 y 4 la actividad enzimática es mas lenta
¿Qué efecto podría tener el pH en la actividad enzimática? Valores de pH extremos
pueden causar la desnaturalización de la enzima.

Reúso de la enzima: En las reacciones enzimáticas, el sustrato se une al sitio activo de

la enzima cambiando su conformación hasta lograr el ajuste entre la molécula sustrato y
el sitio activo, facilitando la liberación de los productos y permitiendo que la enzima
regrese a su conformación original, quedando el sitio activo disponible para admitir otra
molécula de sustrato.
a- A un tubo de ensayo que contiene un pedacito de hígado, agregue 4 ml de
peróxido (agua oxigenada), luego que haya ocurrido la reacción, separe el
hígado de la parte líquida. Agregue al hígado otros 3 ml de peróxido. Observe la
reacción. ¿A qué conclusión llega respecto a la enzima presente en el hígado?

La catalasa que es la enzima del hígado al reaccionar con el sustrato que es el

peróxido forma un burbujeo mayor y luego de botar y agregar de nuevo hay una
mayor cantidad de efervescencia.
 b- A la parte líquida, agregue un pedacito de hígado fresco. ¿Hubo formación de
burbujas? No ¿Por qué? No porque se había hidrolizado

C- Hidrólisis del almidón:

La amilasa salival o ptialina es una enzima que se produce en las glándulas salivales,
actúa sobre el polisacárido almidón, hidrolizando el enlace O- glucosídico, por lo que el
almidón terminará por transformarse en unidades de glucosa.

a- Coloque 4 tubos de ensayo en una gradilla, agregue a cada tubo 5ml de una
solución de almidón preparada al 1 % en agua destilada o una solución de
galletas sin sal. A los tubos 3 y 4, añadir con una pipeta Pasteur, una pequeña
cantidad de saliva, obtenida de la salivación de un alumno del equipo y recogida
en un tubo de ensayo bien lavado. (Para lograr mayor producción de saliva,
piensa en un limón o en algo apetecible al paladar). En el tubo 1 realiza la
prueba de benedict o la reacción de fehling (1ml de fehling A y 1 ml de fehling B,
calentar). En el tubo 2 realiza la prueba de lugol.
Los tubos 3 y 4 que contienen la solución de almidón y saliva, ponerlos en un
vaso de precipitado a baño maría; luego a intervalos de 5 minutos contados a
partir del minuto 0, realice una prueba de benedict hasta alcanzar el punto
acrómico donde la enzima no hace su efecto.

Cuadro 1. Efecto de la amilasa salival sobre la digestión de los carbohidratos.

Tiempo Test de lugol Test de Benedict +/-

5 min
+ -
10 min
+ -
15 min
+ +
20 min
- +
25 min
-
30 min
-
35min
-
 a- ¿A los cuántos minutos se logró el punto acrómico? A los 20 minutos benedict
dio positivo completamente Explique sus resultados: No se obtuvo el punto
acrónico del Lugol.

b- En un tubo de ensayo coloque 10 cc de saliva y realice las siguientes pruebas.

Mezcle con ácido acético: ¿Qué observa? La amilasa es una enzima que ayuda a
digerir los carbohidratos Alcalinice una cantidad de saliva con igual volumen de
Hidróxido de Sodio al 40 % y añada 2 gotas de sulfato de cobre al 2 % o 5%. La
formación de un anillo color violeta indica que la sustancia presente es de
naturaleza proteica.

Cuestionario:

1. Defina los conceptos: enzima, coenzima, apoenzima, holoenzima.

● Enzimas:

Proteína soluble producida por las células del organismo, que favorece y regula las
reacciones químicas en los seres vivos."las enzimas están compuestas principalmente por
proteínas"

 Coenzima:

Las coenzimas son compuestos orgánicos que facilitan la acción de las enzimas y pueden
unirse temporal o permanentemente a una enzima. Las coenzimas pueden catalizar
reacciones, pero no con la misma eficacia que cuando están unidas a una enzima.

● Apoenzima

Una apoenzima es la holoenzima menos algún cofactor (COFACTORES ENZIMÁTICOS)

o grupos prostéticos necesarios para que la enzima sea funcional.

● Holoenzima

Una holoenzima es una enzima que está formada por una apoenzima y un cofactor, que
puede ser un ion o una molécula orgánica compleja unida (grupo prostético) o no (una
coenzima). En resumidas cuentas, es una enzima completa y activa catalíticamente

2. Mencione tres propiedades de las enzimas.

Son proteínas (secuencias de aminoácidos) que pueden tener unido un grupo químico
orgánico.
 Se desnaturaliza por calor al igual que las proteínas.
 Se precipitan con la presencia de etanol o de aumento en la concentración de las
sales inorgánicas como el sulfato de amoniaco.
 No se difunden a través de la membrana semipermeable o selectiva

3. Describa la composición de la saliva, su pH y el papel de los componentes de la

misma en los procesos de digestión.
 El 99% de la saliva es agua mientras que el 1% restante está constituido por moléculas
orgánicas e inorgánicas.el pH normal tiene un valor entre el 6.7 y el 7.4. Es decir, es
relativamente neutro. Al contener amilasa, ayuda a degradar los almidones y facilita la
digestión. Además, hace que la masticación de los alimentos sea más sencilla y
contribuye a la deglución de los mismos.

4. ¿Qué efecto tiene la amilasa sobre los lípidos, carbohidratos y proteínas

● Son proteínas (secuencias de aminoácidos) que pueden tener unido un grupo químico
orgánico.
● Se desnaturaliza por calor al igual que las proteínas.
● Se precipitan con la presencia de etanol o de aumento en la concentración de las
sales inorgánicas como el sulfato de amoniaco.
● No se difunden a través de la membrana semipermeable o selectiva.

5. Mencione el nombre de 10 enzimas que participan en el proceso digestivo, incluya

el sustrato y el producto en cada caso.
 Lipasa: Digieren las grasas, descomponiéndolas en ácidos grasos.
 Proteasa: Rompen los enlaces peptídicos de las proteínas.
 Amilasa: Degrada los almidones y los azucares complejos.
 Ptialina: Actúa en medio básico hasta que se inactiva cuando el alimento
llega al estómago.
 Renina: secretada por las células yuxtaglomerulares del riñón, ayuda a la
secreción de aldosterona qué ayuda al equilibrio hídrico y sales del cuerpo.
 Sacarasa: Conocida como invertasa, convierte la sacarosa en glucosa y
fructuosa.
 Enterocinasa: Enzima qué en presencia de ácidos biliares activa la
conversión de tripsinigeno en tripsina y esta a su vez activa el resto de
proteasas.
 Ribonucleasa: Cataliza la hidrólisis de ARN en componentes más
pequeños.
 Lactasa: Descompone la lactosa qué se encuentra en la leche y productos
lácteos.
 Tripsina: Rompen los enlaces peptídicos de las proteínas mediante
hidrólisis para formar peptidos de menor tamaño y aminoácidos.