1.

- Enliste los tipos de sustancias para las cuales sean más adecuados los siguientes métodos de
separación

a) Cromatografía de fluidos supercríticos

Análisis de medicamentos y en el análisis de alimentos, explosivos, petróleo, polímeros y propelentes.
b) Cromatografía de capa fina
Plaguicidas, esteroides, alcaloides, lípidos, nucleótidos, glucósidos, carbohidratos y ácidos grasos.
c) Electroforesis capilar

iones, péptidos, proteínas, carbohidratos, esteroides, ácidos nucleicos, vitaminas, fármacos, células.

2.- Defina

a) Fluido supercrítico
Un fluido supercrítico es una sustancia que se encuentra en condiciones de presión y temperatura
superiores a su punto crítico.
b) Punto critico
límite para el cual el volumen de un líquido es igual al de una masa igual de vapor o, dicho de otro modo,
en el cual las densidades del líquido y del vapor son iguales.
c) Cromatografía de capa fina

Es un método de afinidad que se utiliza para separar los compuestos de una mezcla.

3.- Describa el efecto de la presión sobre la cromatografía de fluidos supercríticos?

En la cromatografía de fluidos supercríticos, a diferencia de la HPLC y el gas, la velocidad de elución no

aumenta con la modificación de la temperatura, sino mediante la aplicación de presión de la fase
estacionaria. Esto hace que surja una mayor interacción en la fase móvil y disminuyan los tiempos de
elución.

4.- ¿En que difieren los instrumentos para cromatografía de fluidos supercríticos, HPLC Y CG?

FSC: Entre los instrumentos que se utilizan para la cromatografía de fluidos supercríticos se encuentra el
hormo termostato que controla la temperatura de la fase móvil y un restrictor o sistema de contrapresión
para mantener la presión de la columna en el nivel deseado.

HPLC: Fase móvil a alta presión a través de la columna. El grado de retención de los componentes de la
muestra depende de la naturaleza del compuesto, de la composición de la fase estacionaria y de la fase
móvil.

CG: Columnas capilares de sílice fundida, columnas empacadas con tierras diatomeas hechas de tubos de
vidrio o metal.
5.- ¿Cuál es el efecto del pH sobre la separación de aminoácidos por electroforesis? ¿Por qué?

Los aminoácidos al situarlos en el medio tamponado de pH característico adquirirán una determinada carga
de acuerdo con la naturaleza ionizable de sus grupos funcionales. Por tanto, la separación de una mezcla de
aminoácidos por electroforesis consistirá en la emigración de los aminoácidos cargados positivamente hacia
el electrodo denominado cátodo (polo negativo), o al electrodo opuesto llamado ánodo (polo positivo) si
están cargados negativamente, o no se desplazarán si la carga neta del aminoácido es nula.

6.- ¿Cuál es el principio de separación para electroforesis?

El principio de la electroforesis consiste en la migración proporcional de las moléculas a través de un gel u

otro tipo de matriz porosa, según su peso molecular o tamaño; movimiento generado por el campo
eléctrico.

7.-Describa el principio de cada uno de los diferentes tipos de electroforesis

a) Electroforesis de frente móvil: Se colocan los electrodos en sendos brazos del dispositivo, entre los
que se crea un campo eléctrico, provocando que las moléculas de la muestra cargadas emigren hacia
los electrodos de polaridad opuesta.
b) Electroforesis de zona (En papel, En acetato de celulosa, En gel; agarosa, poliacrilamida y almidón):
La muestra se desplaza sobre un soporte sólido.
c) Electroforesis capilar: El soporte es distinto, ya que utiliza capilares de sílica fundida, cubiertos
con una capa de poliamina

8.- Enliste los tipos de sustancias para las que se emplean cada uno de los siguientes métodos
cromatográficos Gas-liquido

a) Iónica
Puede ser usado con casi cualquier tipo de molécula cargada, incluyendo ácidos orgánicos y azúcares.
b) Afinidad
Su mayor campo de aplicación se encuentra en la purificación o aislamiento de sustancias de naturaleza
biológica, como proteínas o ácidos nucleicos.
c) Filtración en gel Proteínas

9.- Defina

a) Elución isocrática
Se lleva a cabo con un solo disolvente o con una mezcla de disolventes, constante, en el tiempo de análisis
 b) Elución de gradiente
Se lleva a cabo variando de forma continua la composición de los disolventes de forma que su fuerza vaya
incrementando durante el tiempo de análisis
c) Empaquetamiento fase inversa, normal y enlazada

Inversa: La fase estacionaria tiene una naturaleza apolar y las interacciones que se producen son
inespecíficas.

Normal: La fase estacionaria presenta puntos activos de alta polaridad y las interacciones que se producen
con el soluto son específicas del grupo activo. La fase estacionaria puede ser un sólido adsorbente, o bien,
un soporte al que se unen químicamente moléculas orgánicas que presentan grupos funcionales de alta
polaridad.

Enlazada: la fase estacionaria se une químicamente a la superficie del soporte sólido, el cual casi siempre
está constituido por micropartículas de gel de sílice. Los grupos –OH pueden ser silanizados por reacción
con organocloro u organoalcoxisilanos para formar enlaces siloxano estables