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TOXICOLOGIA Y LEGISLACIÓN ALIMENTARIA

INFORME DE LABORATORIO

ABSORCIÓN DE SUSTANCIAS

I. INTRODUCCION

Se denomina absorción, cuando las sustancias pasan a la circulación


desde el exterior del organismo.
Vías de absorción, son los lugares de penetración de sustancias. Es
importante conocer la absorción de sustancias porque de su velocidad
depende la rapidez de la acción, la vida de administración depende de la
absorción.

II. FUNDAMENTO

La penetración de las sustancias en el organismo puede realizarse a


través de las vías mediatas o indirectas y de las vías inmediatas,
directas o parenterales.
Las membranas corporales que las sustancias tienen que atravesar para
actuar están representadas por el epitelio gastrointestinal, cutáneo,
respiratorio, el endotelio capilar y la membrana celular.
Las sustancias se absorben en estado de solución y en estado gaseoso
por la vía pulmonar, los mecanismos que rigen este paso son de dos
tipos: transporte pasivo y transporte especializado.

La absorción es el mecanismo natural por el cual las sustancias pasan a


través de los recubrimientos del cuerpo para entrar en este. Una vez que
son absorbidas, se distribuyen por todo el cuerpo a todas las células o
bien a uno o varios lugares de almacenamiento específicos. Toda
sustancia absorbida puede experimentar también una transformación
metabólica en diversas partes del cuerpo. La excreción es una suerte de
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proceso opuesto a la absorción: es el traslado de sustancias fuera del


cuerpo y los seres humanos tienen varios mecanismos para hacerlo.

Al estudiar la toxicidad de las sustancias transportadas por el aire, es


importante comprender los mecanismos de destoxificación del cuerpo.
La acción biológica de una sustancia tóxica puede terminar en el
almacenamiento, la transformación metabólica o la excreción; esta
última es la más común.

Se muestran las distintas vías por las cuales los procesos ADME
transportan sustancias por todo el cuerpo.

Otro factor que interviene en el transporte de sustancias a través de las


membranas es la composición de la membrana en sí. Las membranas
biológicas contienen lípidos y, por consiguiente, son sumamente
permeables a las moléculas solubles de lípidos y muy impermeables a
todas las moléculas solubles en agua, excepto las más pequeñas.

La piel

La presentación anterior sobre las vías de exposición humana a los


contaminantes tóxicos del aire demostró que algunas sustancias
transportadas por el aire pueden atravesar la barrera de la piel. La
mayoría de sustancias químicas absorbidas de esta manera pasan a
través de la piel misma, las células epidérmicas. Las glándulas
sudoríferas y los folículos del pelo, a pesar de proporcionar acceso fácil
al cuerpo, son muy pocos y se encuentran muy distanciados como para
producir alguna consecuencia.

La absorción a través de la piel depende de varios factores:

 Las propiedades de la sustancia química misma.


 El espesor de la capa exterior de la piel.
 La difusividad de la capa exterior. Por ejemplo, las sustancias tóxicas
cruzan fácilmente la piel del escroto, la cual es sumamente delgada y
tiene alta difusividad. (¿Recuerda la gran incidencia de cáncer del

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escroto entre los limpiadores de chimeneas en la Inglaterra del siglo XIX,


de la que hablamos en una lección anterior?) En contraste, las
sustancias tóxicas atraviesan la planta del pie con mucha dificultad: a
pesar de que esta área presenta la mayor difusividad, también tiene la
capa exterior más gruesa de la piel.

 Estado de la capa exterior (es decir, si está intacta o dañada).


 Contenido de agua de la capa exterior (la alta hidratación incrementa la
absorción).

A pesar de la gran incidencia de contacto entre la piel y los


contaminantes tóxicos del aire, muy pocas sustancias químicas tienen
las propiedades necesarias para entrar al cuerpo por esta vía.

Aparato digestivo

Debido a que las sustancias atrapadas por la cobertura de mucosa del


aparato respiratorio pueden ser ingeridas con el tiempo, el aparato
digestivo constituye una vía posible de exposición para los
contaminantes tóxicos del aire bajo la forma de partículas (líquidas o
sólidas). La absorción puede realizarse a lo largo de todo el aparato
digestivo, incluida la boca y el recto, pero el intestino delgado es la zona
principal donde ella puede ocurrir. En el intestino delgado, así como en
las partes más profundas de los pulmones, la zona superficial se
maximiza y la distancia hacia la circulación general se minimiza. Aunque
la mayor parte de la absorción ocurre por difusión sencilla, algunas
sustancias tóxicas se absorben activamente por medio de mecanismos
de transporte intestinal diseñados para la captación de nutrientes
fundamentales, como el hierro y el calcio. 

Todo lo absorbido a través del intestino delgado se desplaza primero al


hígado para ser procesado, con lo cual este se convierte en un enlace
vital para otros procesos toxicocinéticos de distribución, metabolismo y

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excreción. Los procesos que puede iniciar el hígado posteriormente


incluyen los siguientes:

 almacenamiento;
 secreción dentro de la bilis;
 descarga en la circulación general.

Una vez que una sustancia es absorbida, se puede distribuir a distintas


partes del cuerpo de diversas maneras. Ahora centremos nuestra
atención en el segundo proceso toxicocinético de distribución.

Distribución

Una vez que una sustancia es absorbida dentro del torrente sanguíneo,
puede alcanzar virtualmente cualquier parte del cuerpo. Sin embargo,
todavía deberá dejar el torrente sanguíneo y entrar en las células
corporales. La tasa de distribución a un tejido depende principalmente de
dos factores:

 El flujo sanguíneo a través del tejido.


 La facilidad con que la sustancia química atraviesa la membrana capilar
y penetra las células del tejido (es decir, la capacidad que tiene para

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atravesar las membranas celulares). Generalmente, la alta


liposolubilidad es buena conductora para efectuar el transporte a través
de membranas biológicas.

Algunas sustancias no atraviesan fácilmente las membranas celulares (a


menos que sean transportadas activamente) y, por consiguiente, tienen
una distribución limitada. Las sustancias que pasan fácilmente a través
de las membranas celulares se distribuyen por todo el cuerpo.

A menudo, después de la exposición, la distribución de una sustancia


varía con el tiempo. Por ejemplo, poco después de la absorción, la
mayor parte del plomo inorgánico se localiza en el hígado, los riñones y
los glóbulos rojos. Sin embargo, dos horas después, 50 por ciento se
encuentra en el hígado y un mes después, 90 por ciento del plomo
restante en los huesos.

Eso trae a colación el tema del almacenamiento. Algunas sustancias


presentan afinidades a ciertos tejidos o componentes tisulares. El
almacenamiento a menudo ocurre cuando la tasa de absorción de una
sustancia es mayor que su tasa de metabolismo o excreción. El
siguiente cuadro indica en qué momento diversas sustancias químicas
tienden a acumularse en el cuerpo y dónde tienden a ejercer sus efectos
tóxicos.

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Cuadro 1. Acumulación de sustancias químicas en el cuerpo 

Sustancia Lugar de Zonas


química almacenamient principales
o de toxicidad
Cadmio Riñones, tejido Riñones,
pulmones
Monóxido Sangre Sangre
de carbono
DDT Sangre Tejidos
nerviosos
Dieldrín Grasa Desconocida
(insecticida s
)
Fluoruro Hueso Hueso
Plomo Hueso Tejidos
blandos
Paraquat Pulmón Pulmón
Estroncio Hueso Hueso

Un lugar de almacenamiento puede o no ser el lugar donde ocurre la


acción tóxica. Si no lo es, el almacenamiento se puede considerar un
mecanismo protector, porque generalmente cuando un contaminante
circula libremente origina los efectos más perjudiciales. Las sustancias
químicas almacenadas pueden permanecer en el cuerpo durante años
sin efecto adverso evidente (por ejemplo, el DDT), o bien su
acumulación puede producir efectos adversos de desarrollo lento, como
la intoxicación crónica por cadmio.

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Metabolismo (biotransformación)

El tercer proceso de la secuencia ADME, el metabolismo, también es


conocido —quizá más descriptivamente— como biotransformación.
Comprende la suma de los procesos por los cuales un organismo vivo
somete a una sustancia extraña a un cambio químico. La
biotransformación de sustancias tóxicas en el cuerpo busca que las
sustancias lipofílicas sean más hidrofílicas o solubles en agua. Los seres
humanos cuentan con un arsenal variado de procesos enzimáticos que
promueven esta conversión beneficiosa, que ayuda a la excreción de las
sustancias nocivas. 

Algunos puntos básicos relacionados con la biotransformación son los


siguientes:

 El compuesto de origen se puede integrar o descomponer para formar


nuevos compuestos llamados metabolitos.
 Los metabolitos pueden ser más o menos tóxicos que el compuesto de
origen.
 El órgano principal de la biotransformación es el hígado; también ocurre,
vía reacción enzimática, en el plasma de la sangre, los riñones, los
pulmones, el aparato digestivo, la piel, las gónadas y la placenta.
 Algunas sustancias químicas (por ejemplo, los insecticidas
organoclorados como el DDT, ciertos herbicidas y diversos
hidrocarburos poliaromáticos [PAH, por sus siglas en inglés] como el
benzopireno) aumentan la cantidad y actividad de las enzimas
microsómicas. Como resultado, estos inductores químicos incrementan
su propio metabolismo, lo cual podría ser protector si dicho metabolismo
fuera destoxificante, pero podría ser perjudicial si el metabolismo
aumentara la toxicidad (por ejemplo, el incremento de toxicidad del
tetracloruro de carbono que sigue a la inducción enzimática por el DDT).

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 Algunas sustancias químicas (por ejemplo, los insecticidas


organofosfatados, el tetracloruro de carbono, el ozono y el monóxido de

carbono) inhiben las enzimas microsómicas. Esta inhibición puede dar


lugar a la persistencia de alguna sustancia que, en condiciones
normales, se metabolizaría.

Excreción

Las sustancias pueden salir del cuerpo o excretarse de diferentes


maneras. Las cantidades reducidas de sustancias se pueden eliminar
mediante las secreciones de sudor, lágrimas, saliva y leche; sin
embargo, así como la piel es una vía insignificante de absorción, las
mencionadas secreciones constituyen vías menores para la excreción de
sustancias tóxicas.

Una vía algo más significativa son los pulmones, que constituyen la vía
principal de eliminación para las sustancias que se encuentran en forma
gaseosa a la temperatura del cuerpo. El tetracloruro de carbono, incluso
cuando se ingiere en forma líquida, se puede excretar parcialmente por
los pulmones bajo la forma de vapor.

Como se mencionó anteriormente, el hígado se encuentra en primera


línea en la eliminación de las sustancias tóxicas porque procesa toda la
sangre que proviene directamente del intestino delgado. Los tóxicos se
pueden secretar en la bilis dentro del intestino delgado para eliminarse
en las heces. Esta es la vía primaria de excreción para muchos metales
traza como el cadmio, el mercurio y el plomo, y para ciertas moléculas
grandes, como los plaguicidas.

Los riñones son los órganos principales en la remoción de las sustancias


tóxicas del torrente sanguíneo. El proceso comprende la filtración, la
difusión y la secreción activa, al igual que con el procesamiento de los
productos finales del metabolismo. Como hemos visto, generalmente la
biotransformación convierte los tóxicos en sustancias más solubles en

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agua, las cuales no tienden a reabsorberse y son más fácilmente


excretables por los riñones. 

III. MATERIAL Y EQUIPO

Observa el material empleado, entre ellos:

- D. Letal
- Bisturí
- Ratones
- carbón activo

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IV. METODOLOGÍA DE LA ABSORCIÓN

 Pesar una rata en ayunas (24 horas) e inyectar intraperitonealmente


pentabarbital sódico.

 Situar al animal en posición dorsal en una tabla de disección y fijarla


con esparadrapo.

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 Hacer una incisión media abdominal y localizar la región pilórica


duodenal.

 Perforar el mesenterio en esa zona y pasar por debajo del intestino


un pedazo de seda de aproximadamente 15cm. Hacer sobre el
intestino una pequeña incisión en forma de V.

 Medir a partir de esa zona 15 a 20cm de asa duodenal y repetir lo


anterior.
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 Introducir una jeringa con solución de Locke a 38°C por la incisión en


V superior y lavar la porción del intestino.

 Ligar el intestino con la seda por encima de la incisión en V interior


 Introducir por la incisión superior una jeringa con solución Locke CO2
a 38°C y tratar de que el segmento se llene de forma homogénea y
que sus paredes no queden demasiado distendidas por un exceso de
volumen de solución y patrón

 Cerrar la ligadura superior por debajo de la incisión

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 Colocar las vísceras de nuevo en el interior del animal y bañarle


frecuentemente con solución Locke a 38°C durante 30 minutos.

 Extraer el segmento intestinal, secado en un papel filtro y vaciar su


contenido en un tubo de centrifuga. Centrifugar a 5000 rpm durante
5min.

 Coloque al animal y observe cuales son los efectos en cada roedor.


 Registre los efectos de cada sustancia en función a la vía de
administración de acuerdo a la siguiente tabla. 
 Luego proceda a sacrificar a la rata y realice la disección y observe
los órganos.

Determinar la concentración de CO2 en el sobrenadante y en la solución Loche


original mediante las técnicas de Somogyi – Nelson de la siguiente forma:

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 Colocar en un tubo de ensayo 0.4ml de sobrenadante y en otro 0.4 ml de


solución Locke CO2.
 Añadir a cada tubo 9.6 ml de solución Locke y 1ml de reactivo de
Nelson.
 Calentar ambos tubos durante 20min a baño maría a 100°C.
 Dejar enfriar y añadir a cada uno 1 ml de arsenomolibdato. Comparar la
colocación y determinar si la glucosa ha sido absorbida o no por el
intestino.

V. OBSERVACIONES

Tomamos la rata y lo pesamos:

Peso -------220gr

Dosis de anestesia:

1ml por cada 2.5kg

2500gr-------1ml

220gr--------- x

x= 0.088 ml

1. Se inyecta a la rata:

- La anestesia general halatal hace efecto a los 10


minutos perdiendo la sensibilidad al dolor.

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- Se procede a amarrar a la rata a una superficie acondicionada


para sujetarla
- Se hace una incisión media abdominal y se localiza la región
pilórica duodenal.

2. Absorción con Ringer

- Se inyecto 3 ml de solución Ringer al intestino de la rata


previamente limpiado.
- Luego se le aplico solución de cloruro de sodio
- Después de 20 minutos fue absorbida a 3,2 ml

VI. CONCLUSIONES

 En esta práctica de laboratorio se pudo aprender el procedimiento


paso a paso de absorción de sustancia en una rata, inyectando
soluciones de Ringer y cloruro de sodio.
 Aprendimos también a observar los órganos interiores, pudimos
observar cómo están conectados los órganos entre sí y su
distribución, además comprendimos la similitud con los órganos
del ser humano.
 Por lo que podemos deducir que los órganos, tanto de la rata
como los del ser humano, son extremadamente diferentes en
cuanto a tamaño, pero realmente muy parecidos en cuanto a
funcionamiento y aspecto.

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VII. CUESTIONARIO

1. Relacione la presente práctica con intoxicaciones alimentarias.

- Ocurre cuando uno ingiere alimento o agua que


contiene bacterias, parásitos, virus o toxinas producidos por estos
microorganismos. La mayoría de los casos de intoxicación
alimentaria se dan a raíz de bacterias comunes como el
estafilococo o la Escherichia coli (E. coli.)

La intoxicación alimentaria puede afectar a una persona o a un


grupo de personas que hayan ingerido todo el mismo alimento
contaminado. Se presenta más comúnmente después de
consumir alimentos en comidas al aire libre, cafeterías de
escuelas, grandes reuniones sociales o restaurantes.

Los microorganismos pueden ingresar al alimento que uno


consume (llamado contaminación) de diferentes maneras:

- La carne de res o de aves puede entrar en contacto con las


bacterias normales de los intestinos de un animal que se está
procesando.
- El agua que se utiliza durante el cultivo o embarque puede
contener estiércol o desechos humanos.
- Inapropiada manipulación o preparación de alimentos en tiendas
de abarrotes, restaurantes o casas.

La intoxicación alimentaria con frecuencia ocurre por comer o beber:

- Cualquier alimento preparado por alguien que no use las técnicas


apropiadas de lavado de las manos.

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- Cualquier alimento preparado usando utensilios de cocina, tablas


de cortar y otras herramientas que no estén totalmente limpias.
- Productos lácteos o alimentos que contengan mayonesa (como
ensalada de col o de papa) que hayan permanecido fuera del
refrigerador por mucho tiempo.
- Alimentos congelados o refrigerados que no se guarden a la
temperatura apropiada o que no se recalienten adecuadamente.
- Pescados u ostras crudas.
- Frutas o verduras crudas que no se hayan lavado bien.
- Jugos de verduras o frutas crudas y productos lácteos (busque la
palabra "pasteurizado", lo cual significa que el alimento ha sido
tratado para prevenir la contaminación).
- Carnes o huevos mal cocidos.
- Agua proveniente de un pozo o arroyo, o agua de una ciudad o
pueblo que no haya sido tratada.

2. ¿Cuál es el mecanismo de la absorción intestinal?

El proceso de absorción de nutrientes se produce principalmente y


con una extraordinaria eficacia a través de las paredes del intestino
delgado, donde se absorbe la mayor parte del agua, alcohol,
azúcares, minerales y vitaminas hidrosolubles así como los
productos de digestión de proteínas, grasas e hidratos de carbono.
Las vitaminas liposolubles se absorben junto con los ácidos grasos.

La absorción puede disminuir notablemente si se ingieren sustancias


que aceleran la velocidad de tránsito intestinal, como la fibra
dietética ingerida en grandes cantidades y los laxantes. Igualmente,
la fibra y el ácido fítico pueden reducir la absorción de algunos
minerales, como el hierro o el zinc, por ejemplo. En la enfermedad
celíaca (o intolerancia al gluten), la destrucción de las vellosidades
intestinales puede reducir significativamente la superficie de
absorción.

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En el intestino grueso, donde se reabsorbe una importante cantidad


de agua del residuo que llega del intestino delgado, se almacenan
las heces hasta ser excretadas por el ano. Las heces, además de los
componentes no digeridos de los alimentos, contienen gran cantidad
de restos celulares, consecuencia de la continua regeneración de la
pared celular.

Una vez absorbidos los nutrientes son transportados por la sangre


hasta las células en las que van a ser utilizados.

Los ácidos grasos que pasan a la pared intestinal son transformados


inmediatamente en triglicéridos que serán transportados hasta la
sangre por la linfa. La grasa puede ser transformada posteriormente
en el hígado y finalmente se deposita en el tejido adiposo, una
importante reserva de grasa y de energía.

Los hidratos de carbono en forma de monosacáridos pasan a la


sangre y posteriormente al hígado desde donde pueden ser
transportados como glucosa a todas las células del organismo para
ser metabolizada y producir energía. La insulina es necesaria para la
incorporación de la glucosa a las células. Los monosacáridos
también pueden ser transformados en glucógeno, una fuente de
energía fácilmente utilizable que se almacena en el hígado y en los
músculos esqueléticos.

Los aminoácidos de las proteínas pasan igualmente a la sangre y de


ésta al hígado. Posteriormente pueden pasar a la circulación general
para formar parte del pool de aminoácidos, un importante reservorio
que será utilizado para la síntesis de proteínas estructurales y
enzimas. Los aminoácidos en exceso también pueden ser oxidados
para producir energía.

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3. ¿Qué sustancia se absorben en el intestino?

Se absorben agua, alcohol, azúcares, minerales y vitaminas


hidrosolubles así como los productos de digestión de proteínas,
grasas e hidratos de carbono. Las vitaminas liposolubles se absorben
junto con los ácidos grasos.

4. ¿Cuáles son las sustancias que no se absorben en el intestino?

La fibra no se puede digerir y pasa por el tracto digestivo sin ser


transformada por las enzimas. Muchos alimentos contienen fibra
soluble e insoluble. La fibra soluble se disuelve fácilmente en agua y
adquiere una textura blanda, como un gel, en el intestino. La fibra
insoluble, por el contrario, pasa por el intestino casi sin modificación.

VIII. BIBLIOGRÁFIA

Kaiser H., Wied. Ann (1881). Adsorción de sustancias. Editorial


Acribia, pag.14, 451.
McBain J. W., Phys Chem (1909). Adsorción. Editorial
Zaragoza.pag.38, 471.
http://www.bvsde.paho.org/cursoa_toxaire/lecc3/lecc3_7.html

http://webs.ucm.es/info/nutri1/carbajal/manual-13.htm

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