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1.- INTRODUCCIÓN:
Los tóxicos orgánicos fijos son el grupo más numeroso entre las diferentes sustancias
tóxicas, por lo que involucra un grado de complejidad desde el punto de vista analítico,
abarcando así una metodología más amplia para cubrir las necesidades analíticas que
puedan surgir. Este proceso tendrá dos pasos importantes, la extracción y
desproteinización. Se tiene que tener en cuenta el tipo de análisis a realizar para utilizar
determinadas condiciones en la extracción.
Estas sustancias que son usadas tanto en el ámbito alimentario y medicamentoso,
tendrán diferentes naturalezas, como ácido fuerte, ácido débil, alcalino y neutra. Al
ingresar al organismo sufren cambios metabólicos debido a la biotransformación por lo
que se debe considerar las propiedades fisicoquímicas entre el tóxico y sus metabolitos
al momento de ser analizada.
AISLAMIENTO
1. DESPROTEINIZACION
Se basa en la formación de ácido tunsgstico, el cual hace precipitar proteínas contenidas
en la muestra.
2. EXTRACCIÓN
Los tóxicos orgánicos se extraen con disolventes orgánicos (éter dietílico, cloroformo,
diclorometano, etc.). En este proceso es fundamental el pH del medio en el que se
realiza la extracción, ya que el fundamento de la extracción líquido - líquido consiste en
la diferente solubilidad que cada sustancia tiene en agua y/o disolventes orgánicos en
función del grado de disociación que sufre en función del pH del medio (sin olvidar el
efecto de la mayor o menor liposolubilidad de acuerdo al coeficiente de partición).
Los tóxicos en medio acuoso (como es el caso de las muestras biológicas) se comportan
como ácidos, bases o sustancias neutras.
PARTE EXPERIMENTAL
Materiales:
✓ Muestra problema
✓ Pera de decantación
✓ Soporte universal
✓ Beaker
✓ CHCl3
✓ NH4OH
✓ NaHCO3
✓ HCL
✓ NaOH
AISLAMIENTO ( DESPROTEINIZADO)- METODO DE CURRY
1. Placas cromatografías.
2. El silica gel G 60
3. Cuba cromatografica
4. microcapilares
5. Estufa
6. Campana extractora
7. Cocina eléctrica
8. Pulverizador ( Roceador)
9. Reactivo de Trinder
10. Acetona 5ml
11. Metanol 5ml
2. PROCEDIMIENTO OPERATIVO:
2.1.- PREPARACIÓN:
1. Se recubre la placa cromatografica 20 x 20 cm con el silica gel G 60 ( Fase
estacionaria)
2. Se lleva a la estufa y se le somete a secado a una temperatura de 100 0C. X 20-
30 minutos.
3. Se retira y deja al aire durante 15-30 minutos para que se enfrié.
4. Se traza las líneas 2cm del extremo de la placa, sobre cual se procede al
sembrado de la muestra problema y del estándar, separadas entre sí unos 1.0 a
1,5 cm.; así se puedan analizar con varios estándares y su respectiva muestras
simultáneamente.
5. Para la siembra de la placa, se utiliza un microcapilar de vidrio.
6. La cuba cromatografíca previamente debe contener acetona 5:5 metanol( Fase
móvil).
7. La placa se coloca, sin sumergir el punto de siembra, en la cuba que
previamente posee el solvente a testear x 30 minutos, hasta que suba la altura
apropiada.
8. Una vez sacada la placa, se raya hasta la altura donde ascendió el disolvente.
9. Se retira y seca en la cocina eléctrica o estufa (en campana extractora de
preferencia).
10. Se lleva la placa a la campana extractora y se pulveriza con los reveladores: ej.
RVO. TRINDER .
11. Una vez pulverizada la placa, comienza a aparecer las manchas de color; según
la presencia de toxico.
12. Y por último se mide los valores : Rf standar = Rf Muestra problema (MP)
Con lo que se concluye el ensayo.
CALCULOS:
El Rf debe ser menor de 1.
Residuo acido fuertes ( R1):
Rf( standar)= 8.5/10=0,85……………………………...PARA LA PRACTICA 8.3/10.5
Rf( muestra problema-orina)= 8.5/10=0,85…………. PARA LA PRÁCTICA 8.4/10.5
En el ejemplo el RfSt=RfMP y se puede concluir que hemos identificado salicilatos.
CUESTIONARIO
1. ¿Cómo ingresan los salicilatos al cuerpo por alimentación?
2. Indicar otros compuestos que podemos encontrar en el residuo 1, 2, 3 y 4.
3.- Señale Ud. bajo que forma se encuentra el salicilato en la orina.
4.- Señale Ud. dos método de desproteinizado para el aislamiento de tóxicos orgánicos
fijos.
5.- Bajo que forma se debe encontrar los tóxicos para poder ser extraídos en medio
acido o básico.
6.- Indique los valores normales y tóxicos de salicilatos en sangre y orina.
7.- Señale Ud. Una técnica analítica por HPLC para la determinación de salicilatos en
sangre y orina.
8.- Indique Ud. la relación del concepto de coeficiente de partición lípido/ agua con el
aislamiento de tóxicos orgánicos fijos.
9.- Señale el límite de detección y cuantificación del ensayo de cuantificación de
salicilatos ( rvo de trinder).
10.- Señale si es posible determinar salicilatos por cromatografía de gases –
Espectrometría de masas.
Video
https://www.youtube.com/watch?v=LFr9IK3geIw LABORATORIO DE
TOXICOLOGIA FORENSE-POLICIA NACIONAL DEL ECUADOR
https://www.youtube.com/watch?v=n2um_if7bwk BARBITURICOS Y
BENZODIAZEPINAS PROFESOR DE TOXICOLOGIA UIGV
https://www.youtube.com/watch?v=niMO64YFN3w LABORATORIO DE
TOXICOLOGIA- CIENCIAS FORENSES- FORENSE GUATEMALA
https://www.youtube.com/watch?v=E7hzw7hOHvQ CROMATOGRAFIA EN
CAPA FINA MINISTERIO PUBLICO VENEZUELA
https://www.youtube.com/watch?v=3mOLlsLnOGU
https://www.youtube.com/watch?v=g71IWP2O5pg
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
1. Repetto, Manuel; Repetto, Guillermo. Toxicológica fundamental. 4a ed. Sevilla:
Editorial Díaz de Santos; 2009. 2. Murciasalud.es. (2015). Murciasalud, el portal
sanitario de la Región de Murcia.[online] Available at:
https://www.murciasalud.es/toxiconet.php?iddoc=167081&idsec=4014 [Accessed 15
Oct. 2019].
3. Martínez Cruz Francisco. Dosificación y validación de aspirina (ASA) y derivados en
orina. Rev Cubana Pediatr [Internet]. 1996 Dic [citado 2019 Oct 18] ; 68( 3 ): 177-182.
Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-
75311996000300005&lng=es.
4. COIMBRA D, SÓTER M, FREITAS D. DETERMINAÇÃO DOS TEORES DE
ÁCIDO ACETILSALICÍLICO EM AMOSTRAS DE PLASMA POR
ESPECTROFOTOMETRIA. Revista da Universidade Vale do Rio Verde, Três
Corações. V. 11, n. 2. 2013, p. 251-255