UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MANABÍ

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE LABORATORIO QUÍMICO

PRÁCTICA No. 7
DETERMINACIÓN DE CREATININA EN SUERO
SANGUÍNEOHUMANO

Asignatura: Bioquímica I

Nivel: Cuarto

Malla Curricular: Malla 2017 (Rediseño 2019)

Departamento: Ciencias Biológicas

Profesora: Dra. Ligbel Sánchez

Estudiantes: Delgado Moran Julio Cesar, Chavez Vélez Ingris

Corina, Logroño Macias Adrián Homero,

Periodo académico: Octubre 2022 – febrero 2023

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Determinación de creatinina en suero sanguíneo sanguíneo

Resumen
En esta práctica se realizó la determinación de creatinina en suero sanguíneo a través del
análisis de espectrometría de absorción utilizando como reactivo el Acido pícrico y el
Hidróxido sódico y mediante la mezcla de estos dos reactivos se llevó a cabo el estudio de la
muestra empleando 3 tubos de ensayos para el blanco, patrón y muestra los cuales fueron
puestos en el equipo de espectrometría de absorción uno por uno para su respectivo estudio los
cuales dieron como resultado un el valor de 1,42mg/dl lo cual sería el valor total de la
creatinina del paciente; en base al resultado obtenido se llevaron a cabo las respectivas
discusiones teniendo en cuenta los valores referenciales del Laboratorio lo cual determino que
el paciente sea de sexo femenino o masculino posee un nivel de creatinina elevado, dicha
concentración de creatinina en sangre denota el estado de la función renal del organismo del
paciente puesto que, si los riñones no funcionan bien, la creatinina no podrá ser eliminada
provocando una acumulación de esta en la sangre, pudiéndola llevar a convertirse en una
patología renal.

Palabras clave: Creatinina; suero sanguíneo; plasma; picrato alcalino; acido pícrico.

Introducción

La presente practica sobre la determinación de creatinina en suero sanguíneo; la cual

es un compuesto orgánico que resulta de la degradación de la creatina, la cual se
concentra en el tejido muscular. Dicho compuesto es sumamente difusible y se elimina
por filtración renal del organismo su determinación en suero, constituye a parámetros
importantes para el diagnóstico de diversas afecciones renales. La estructura de la
creatinina es muy similar a la de los aminoácidos puesto que la creatina es un derivado
de los mismos cuya fórmula molecular es la 2-amino-1-metilimidazolidin-4-
ona(C4H7N3O).
La creatina posee propiedades terapéuticas tales como el de servir de suplementos
nutricionalesa deportistas adolescentes, que desean tener mayor energía muscular. Una
vezabsorbida, la creatina se descompone de forma natural en el cuerpo humano a partir
de los aminoácidos, en el riñón y el hígado.
Se calcula que cerca del 95% de la creatina que absorbe el cuerpo se queda
depositada en el músculo esquelético.
La principal función de la creatinina en sangre es de ofrecer energía a los músculos de
forma rápidaademás de regenerar la masa muscular, transportar las células originadas en
el músculo, equilibriodel PH en la musculatura y regular la energía a nivel muscular.

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Objetivos de la práctica
Objetivo General
Determinar la concentración de creatinina en suero sanguíneo humano.
Objetivos específicos
 Determinar la concentración de creatinina en suero por
espectrometría de absorción molecular.
 Analizar los resultados obtenidos asociados a la concentración de creatinina.

Recursos para realizar la práctica de laboratorio

Materiales, equipos y reactivos

➢ Materiales
-Tubos de ensayo.
-Guantes.
-Gradilla
-Pipetas P1000, P100-10
-Puntillas amarillas y azules.

 Equipos

- Espectrofotómetro de absorción molecular UV-Visible.

➢ Reactivos
- Reactivo 1: Acido pícrico. Acido pícrico 17,5 mmol/L
- Reactivo 2: Hidróxido sódico 0,29 mol/L
- Patrón primario acuoso de Creatinina 2 mg/dL.

➢Muestra
- Suero o plasma heparinizado.

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Metodología
Significado Clínico de Creatinina
La creatinina es el resultado de la degradación de la creatina, componente de los músculos
y puede ser transformada en ATP, fuente de energía para las células. La producción de
creatinina depende de la modificación de la masa muscular. Varía poco y los niveles suelen
ser muy estables. Se elimina a través del riñón. En una insuficiencia renal progresiva hay
una retención en sangre de urea, creatinina y ácido úrico. Niveles altos de creatinina son
indicativos de patología renal. El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta
todos los datos clínicos y de laboratorio.

Principio del método

La creatinina reacciona con el picrato alcalino (reacción de Jaffe) y en condiciones de
alcalinidad reacciona con los iones picrato con formación de un complejo rojizo. La
velocidad de formación del complejo medido a través del aumento de la absorbancia en un
intervalo de tiempo prefijado es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra.

pH > 12
Creatinina + Acido pícrico Complejo de adición
rojo 37°C

Procedimiento

1. Primero tomamos todas las medidas de bioseguridad necesarias ya que

vamos a manipular reactivos de colores que nos pueden machar o hacer
daño en caso que sean peligrosas.

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2. Procedemos a preparar el reactivo de trabajo mezclando volúmenes iguales
de R1 Reactivo Pícrico y de R2 Reactivo hidróxido de sodio.

3. Luego del reactivo que hicimos de la mezcla anterior de los 2 reactivos

preparamos 3 tubos de ensayo tomando con una pipeta 500ml cada 1 para el
blanco, patrón y la muestra, cabe recalcar que se descarta la puntilla cada vez
que se utilize y se toma una nueva.

4. Los 3 tubos de ensayo listos los llevamos cerca al equipo; primero ajustamos
la pantalla del equipo se escoge la prueba de creatinina (cr) que es la de
spinreat le damos enter aquí están todos los datos del programa y
estabilizamos la temperatura del equipo y lo primero que nos pide es el
blanco del agua le damos enter para que absorba y limpiamos el capilar.

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5. Después tomamos el blanco del reactivo y le damos enter y aquí debemos
quedarnos el minuto y medio de la absorción, primero hasta 30s y la de 90 s
y el equipo mismo resta el automaticamente y luego nos da la absorvancia
total.

6. Ahora para analizar el patrón se toman 100 microlitros del patrón con una
pipeta se mezcla bien y se pone enter en el equipo para que absorba y se
debe tener hay hasta que se muestren los resultados y se limpia el capilar.

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7. Así mismo se analizó la muestra tomando 100 microlitros con la pipeta de la
muestra que es el suero sanguíneo se mezcla y se da enter en el equipo para
que absorba y se empieza a leer la muestra una vez listo se limpia el capilar
nuevamente.

8. Cuando se termina de hacer todos los análisis en el equipo se le da escape

dos veces y se lava con agua.

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Resultados y Discusión

0,022
x 2 = 1,42 mg/dL
0,031
Teniendo en cuenta los resultados de la absorbancia de la muestra la cual nos dio 0,022 y la absorbancia
del patrón la cual fue 0,031 por 2 mg/dl de concentración patrón, llevándolo a la formula nos arrojó un
resultado de 1,42 mg/dl. Una vez que obtenemos los resultados de la muestra, comparamos con los
valores referenciales en el caso de ser de un paciente de género masculino observamos que su nivel de
creatinina esta levemente elevado, pero si la muestra es de un paciente de género femenino el nivel de
creatinina está bastante elevado, lo cual podría deberse al consumo excesivo de carne o debido a la
ingesta de algún medicamento u otros factores que podrían alterarlo y convertirlo en patologías renales.

Valores de referencia según el inserto de Laboratorio SpinReact

Suero o plasma

Hombre: 0,7 – 1,4mg/dl 61,8 – 123,7 umol/l

Mujeres: 0,6 – 1,1 mg/dl 53,0 -97,2 umol/l

Conclusiones
 La creatinina es de gran importancia en nuestro cuerpo, niveles superiores al rango normal nos
pueden ocasionar enfermedades graves.
 Las instrucciones dadas por la doctora nos permitieron conocer las técnicas exactas para hacer
el procedimiento correcto de la determinación de creatinina en suero sanguíneo.
 Aplicando la formula correcta logramos obtener el valor exacto de la creatinina del paciente por
medio del análisis en espectrometría de absorción molecular.
Agradecimiento
Le agradecemos a la Dra. Ligbel Sánchez por habernos instruido con sus
conocimientos sobre la determinación de creatinina en suero sanguíneo humano ya que
sin su ayuda no hubiese sido posible la realización de la presente práctica.

Conflictos de interés
Los autores declaran no tener conflictos de interés.
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Referencias Bibliográficas

1. Víctor W Rodwell, David A. Bender, Peter J. Kennelly, Robert K. Murray.

Bioquímica Ilustrada de Harper. 30 Ed. 2018. McGrawHill EDUCATION.

2. Creatinina. Jaffé. Colorimétrico – cinético. Laboratorio SPINREACT.

https://www.spinreact.com/files/Inserts/SERIE_SPINLAB_180/Bioquimica/BSIS6
2_Crea-J_2016.pdf