UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO

ESCUELA DE MEDICINA HUMANA

GUÍAS DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

ALUMNO:
GAMBOA MENDIETA, Andry Marcelo
DOCENTES:
MEJÍA DELGADO, ELVA MANUELA
CURSO:
INMUNOLOGÍA PRÁCTICA
TURNO:
MIÉRCOLES 2:20 PM

2020-20
 SEMANA 11: HIPERSENSIBILIDAD TIPO I – SHOCK ANAFILÁCTICO
Esquematice y explique la fase sensibilizante y la fase desencadenante

FASE SENSIBILIZANTE FASE DESENCADENANTE

FASE INICIAL FASE TARDÍA
El Ag ingresa al organismo mediante la piel o las Tras una nueva exposición al Ag, Se desarrolla sin la
mucosas, es captado por las CPA (células se produce la unión a los Ac fijados existencia de una
dendríticas), las cuales a través del CMH-II son a las células, lo cual genera la nueva exposición al
presentadas a los LTH0 que se transforman en activación y liberación rápida de Ag y ocurre entre 2-
LTH2. Estos liberan citocinas como la IL-4, IL-5, IL- diversos mediadores vasoactivos 24 horas posteriores
6, IL-10 y IL-13 que estimulan la selección clonal e inflamatorios (histamina, a la exposición inicial.
de LB, lo cual hace que se formen células leucotrienos, entre otros)
plasmáticas con IgM e IgD, y mediante un cambio responsables de la
de isotipo se convierten en IgE, específica para el sintomatología.
Ag.
Finalmente, los Ac IgE producidos en respuesta a
un Ag se unen a receptores de membrana de los
mastocitos y/o basófilos.
 SEMANA 12: ELISA Y PRUEBA DE EMBARAZO
Con esquemas, explicar el fundamento de los distintos tipos de ELISA
mencionados.
ELISA CARACTERÍSTICAS PROCEDIMIENTO
DIRECTO Más simple y rápido 1. El Ag se inmoviliza sobre una placa
Un Ac primario marcado 2. Se añade un Ac primario marcado con una
con una enzima se una de enzima que se une al Ag de interés
forma directa al Ag de 3. Se añade el sustrato que al reaccionar con la
interés permitiendo la enzima, proporciona una señal visible que
detección y/o permite la detección y/o cuantificación del
cuantificación del mismo. Ag de interés.

INDIRECTO Permite amplificar la 1. El Ag se inmoviliza sobre una placa

señal obtenida 2. Se añade un Ac primario sin marcar, que se
Se utilizan dos Acs uno une al Ag.
primario y otro 3. Se añade un Ac secundario marcado con una
secundario, este último enzima, que se une al Ac primario
es el que va conjugado a 4. Se añade el sustrato que al reaccionar con la
una enzima enzima proporciona una señal visible que
permitirá la detección y/o cuantificación de
dicho Ag
SANDWINCH El Ag queda inmovilizado 1. El Ac de captura se inmoviliza sobre una placa
entre dos Acs, uno de 2. Se añade la muestra que contiene el Ag de
captura y otro de interés, que se une al Ac de captura
detección, también 3. Se añade el Ac de detección que se une al Ag
conocidos como pares de unido, a su vez, al Ac de captura
Acs, los cuales se unen a 4. En caso de que el Ac de detección vaya
dos epítopos distintos de conjugado a una enzima, se procede
un mismo Ag. directamente con el siguiente paso. En caso
contrario, se necesita añadir un Ac
secundario marcado con una enzima que se
unirá al Ac de detección
5. Se añade el sustrato que al reaccionar con la
enzima proporciona una señal visible que
permitirá la detección y/o cuantificación del
Ag
COMPETITIVO Variante más compleja 1. El Ag de referencia se inmoviliza sobre la
(Inhibición) de la técnica ELISA placa
Uso de Ag de referencia 2. Por otro lado, un exceso de Ac primario sin
que competirá con el Ag marcar se incuba con la muestra que
de la muestra para unirse contiene el Ag de interés, dando lugar a la
al Ac primario. formación de complejos Ag-Ac
Se utiliza para detectar 3. Se añade la mezcla Ag-Ac a la placa, donde el
y/o cuantificar Ags Ag competirá con el Ag de la muestra por
presentes en muy bajas unirse al Ac
cantidades. 4. Se lava la placa eliminando los complejos Ag-
Ac solubles
5. Se añade a la placa un Ac secundario marcado
con una enzima que se unirá al Ac primario
anclado al Ag de referencia
6. Se añade el sustrato que al reaccionar con la
enzima proporciona una señal visible que es
inversamente proporcional a la cantidad de
Ag de interés presente en la muestra.
SEMANA 13: PRUEBAS RÁPIDAS DE DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO
ESQUEMA DE PRUEBA RÁPIDA PARA DIAGNÓSTICO DEL EMBARAZO: EXPLIQUE SU
FUNDAMENTO

La prueba es un inmunoensayo cromatográfico para la detección cualitativa de la HCG en orina

o suero. La membrana se encuentra recubierta con Acs de captura anti-HCG en la zona de
prueba (T) y de cabra anti-ratón en la zona de control (C). Durante la prueba, la muestra
reacciona con las partículas de oro coloidal cubiertas con Ac monoclonales de ratón anti-HCG.
La mezcla migra por la membrana por capilaridad. Si el resultado positivo, se formará una
banda coloreada con la partícula compleja en la zona de prueba. La ausencia de la banda
coloreada en la zona de prueba indica un resultado negativo como control de procedimiento,
siempre aparecerá una banda de color en la zona de control independiente de la presencia de
HCG en la muestra.