UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MANABÍ

Facultad de Ciencias de la Salud

Escuela de Medicina
Informe de Práctica de Laboratorio
Segundo Nivel
Responsables:

Mera Bermúdez Sashari Yustin

Ruiz Tuárez Érika Tatiana

Docente:

Johan Urdaneta MSc. PhD.

Asignatura:

Bioquímica II

Paralelo:

“B”

Tema:

Determinación cuantitativa de glucosa en suero sanguíneo

Periodo académico:

Abril 2019 / Agosto 2019

Portoviejo, miércoles 5 de junio de 2019

1. Introducción
La glucosa es una fuente importante de energía para la mayoría de las células del
cuerpo, incluidas las del cerebro. Los carbohidratos que se encuentran en las frutas,
los cereales, el pan, la pasta, el arroz, se transforman rápidamente en glucosa en el
cuerpo, lo que eleva el nivel de dicho azúcar en la sangre; es por esto que la glucosa
cumple un rol fundamental en los procesos metabólicos que se desarrollan en el
organismo. Las hormonas producidas en el cuerpo llamadas insulina y glucagón
ayudan a controlar los niveles de glicemia1.
La determinación cuantitativa de la glucosa es un proceso mediante el cual se puede
descartar o diagnosticar trastornos o patologías asociadas a la misma, siendo la
diabetes mellitus una de las más comunes, razón por la que hay que conocer los
valores normales de su concentración en la sangre que varían según en el periodo
en que se encuentre la persona: en ayuna van desde 70 y 100 mg/dL y en estado
postprandial no deberían ser mayores a 125 mg/dL.
2. Principio del método
La glucosa oxidasa (GOD) cataliza la oxidación de glucosa a ácido glucónico. El
peróxido de hidrógeno (H2O2), producido se detecta mediante un aceptor
cromogénico de oxígeno, fenol-ampirona en presencia de peroxidasa (POD):

β-D-glucosa + O2 + H2O GOD

→ Ácido glucónico + H2O
→ Quinona + H2O
H2O2 + Fenol + Ampirona POD

La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de glucosa

presente en la muestra estudiada.

3. Objetivo
Establecer la importancia de la determinación de glucosa en suero sanguíneo a
través del método cuantitativo, y la eficiencia en el análisis de su concentración para
la ayuda de diagnósticos de patologías o trastornos.
4. Recursos utilizados
4.1. Materiales: Alcohol, algodón, jeringa, torniquete, guantes, gradilla, tubos de
ensayo, agua destilada, micropipetas.
4.2. Equipos: Espectrofotómetro, incubadora, centrífuga.
4.3. Reactivos: Reactivo 1 (tampón: Tris pH 7, fenol), reactivo 2 (enzimas:
glucosa oxidasa, peroxidasa, 4-aminofenazona), reactivo 3 (patrón primario
acuoso de glucosa 100 mg/dL).
5. Procedimiento
Se tomó la muestra de sangre por extracción venosa a una persona en estado de
ayuna y se la colocó en reposo durante 20 minutos para que se coagule, luego fue
colocada en una centrifugadora durante 12 minutos a 3000 rpm para la separación
del suero del coágulo resultante. Después, se preparó el reactivo total (RT), que se
obtuvo de la mezcla del R1 y el R2; inmediatamente, se rotularon tres tubos de
ensayos: muestra blanco y patrón. A cada uno se le agregó 2ml de RT, y con otra
micropipeta, se añadió 20 μL del patrón base al patrón con RT, y 20 μL de la muestra
problema a la muestra con RT. Posteriormente, después de mezclar la muestra, esta
fue llevada a incubar por 5 minutos a una temperatura de 37°C. Por último, se tomó
lectura en el espectrofotómetro, previamente calibrado a una longitud de onda de 505
nm y ajustado a cero frente al agua destilada, donde se pudo determinar la
absorbancia del patrón y la muestra contra el blanco de reactivo en el
espectrofotómetro, y se obtuvo los valores respectivos de glicemia.
6. Resultados de cálculos
El resultado del examen de glicemia del estudiante en ayuna, se identificó con la cifra
de 81 mg/dL.
7. Discusión de los resultados
Una vez que se obtuvo el valor de la glucosa en ayuno se determina que los valores
normales en este periodo de tiempo se sitúan entre los 70/100 ml/dl, exponiendo que
la cifra del estudiante 81 ml/dl se encuentra entre los valores estándar, descartándolo
de cualquier posible enfermedad relacionada con la alteración de glucosa en la
sangre. En caso de que el estudiante haya presentado un nivel de 100- 125 ml/dl se
determinaría una posible alteración de la glucosa en ayuna, volviéndolo más
vulnerable a padecer de enfermedades como la diabetes tipo II.2 Sin embargo si éste
no hubiera presentado valores altos sino bajos dentro del rango normal 70 m/dl, se
puede considerar una hipoglucemia, donde las personas que lo padecen presentan
síntomas como la somnolencia, aturdimiento, entre otros. 3
8. Conclusiones
Gracias a práctica del examen de determinación de glucosa se logró determinar que
el estudiante y su nivel se glicemia se encuentra en un rango normal, es decir, no es
idóneo en padecer alguna enfermedad por la alteración de glucosa en la sangre por
el momento. De esta manera se analiza y se establece que este análisis es de
carácter importante, ya que, ayuda a diagnosticar posibles patologías que aún no se
han descubierto alertando a la sociedad e incentivándolos a un cuidado en su salud.
9. Referencias bibliográficas
1. García G. Determinación de glucosa [Internet]. Universidad Roosevelt. 2014
[consultado el 2 de junio de 2019]. Disponible en:
https://www.academia.edu/11623903/PRACTICA_DE_LABORATORIO_N
RO._2
2. Medline Plus. Examen de glucemia [Internet]. 2018 [consultado el 2 de junio de
2019]. Disponible en:
https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003482.htm
3. National Institute of Diabetes and Digestive and Kidney Diseases. Bajo nivel de
glucosa en la sangre. [Internet]. 2016 [consultado el 2 de junio de 2019].
Disponible en: https://www.niddk.nih.gov/health-information/informacion-
de-la-salud/diabetes/informacion-general/prevenir-
problemas/hipoglucemia