Segundo MEDIOS DE

Parcial CULTIVO
Todos los microorganismos requieren:
• Agua
• Fuente de energía (carbono, nitrógeno)
• Minerales
• Posiblemente vitaminas
• Oxigeno (aerobia)
A pequeña escala es relativamente simple
desarrollar un medio de cultivo que
contenga componentes puros y que soporte
satisfactoriamente el crecimiento celular,
pero a gran escala podría se inapropiado.
A gran escala el uso de fuentes de nutrientes es
normalmente utilizado para formular un medio de
cultivo, por lo que es necesario conocer algunos
criterios para su utilización:
• El rendimiento máximo de producto o biomasa
por gramo de sustrato utilizado.
• La concentración máxima de producto o biomasa
obtenida.
• La máxima velocidad de formación de producto
• Cual será el mínimo rendimiento de productos
indeseables.
• Los problemas que pudiera causar durante su
elaboración y esterilización.
Algunas fuentes de Carbono:
• Remolacha de caña
• Granos de cereal
• Almidón
• Glucosa
• Sacarosa
• lactosa

Algunas fuentes de Nitrógeno

• Sale de amonio
• Urea
• Nitratos
• Licor de maíz
• Soya
 La preparación de medios para el desarrollo de
procesos de fermentación es una etapa fundamental
a) Sintéticos Quimicamente
para la productividad de los mismo.
definidos
Medios de cultivo
b) complejos
Presentes un C,N,S,
De origen animal, cantidades P,K,Mg
peptona, extracto de a) Macronutrientes considerables
levadura, macerado (gr/l)
de maiz, etc

Fe,
Presentes Mn,
b) Micronutrientes en Mo,
componentes cantidades Ca,
traza Zn,
Co,
Autotrofo Obtienen el carbono del
CO2
c) Factores de Presentes en Vitaminas,
Metabolismo celular crecimiento pequeñas aminoácidos,
heterotrofo cantidades ácidos
grasos
De compuestos
orgánicos obtienen el
carbono
 Formulación del
Transferencia de oxigeno
medio
La formulación del medio de cultivo es una El crecimiento de un organismo
etapa esencial para el diseño exitoso de un aerobio en el cultivo requiere oxígeno
proceso a nivel laboratorio y/o escala piloto. disuelto en el medio. El oxígeno debe
Los constituyentes de un medio deberá ser suministrado continuamente ya
satisfacer las necesidades elementales para el que solo es escasamente soluble en
crecimiento celular y la producción de un solución acuosa
Establecida por las
metabolito, además de suministrar un una condiciones de operación y la
fuente de energía adecuada para la biosíntesis naturaleza fisicoquímica del
y mantenimiento celular. En todo sistema medio de cultivo.
fermentativo
aerobio se presenta
el juego de la oferta
y la demanda. Por el microorganismo y sus
condiciones especificas de
crecimiento
 Mecanismos de transferencia de
oxígeno

La solubilidad del • Presión parcial de

oxigeno atmosférico en
agua dulce a una oxigeno en el gas
presión de 14,7 lb/in2 • Temperatura del agua
de presión total varia de
14,6 mg/l a 0ºC, hasta • Concentración de
aproximadamente 7
mg/l a 36ºC sólidos disueltos

El proceso completo es impulsado por la diferencia de

concentración de oxigeno en el gas y el microorganismo
 Presión parcial de Efecto de la temperatura
oxigeno

Temperatura (ºC) 0 5 10 15 20 25 30 35 40

H (L atm/g O2) 14,34 16,36 18,39 20,47 22,55 24,63 26,72 28,52 30,01

Valores de la constante de Henry a diferentes temperaturas

Efecto de los solutos
disueltos
Se ha encontrado que la rapidez de
transferencia de oxígeno a bajas
concentraciones, es proporcional a la
El efecto que presentan los diferencia de concentraciones del mismo
solutos disueltos sobre la
solubilidad del oxigeno en agua, Na= KLa (C* - C)
se puede explicar mediante el
efecto conocido como «Salting
out», por lo que a mayor
concentración de solutos, menor
será la solubilidad del oxígeno en
agua.
 Conociendo el comportamiento de KLa permite
la operación de los biorreactores en condiciones Determinación del coeficiente volumétrico de
en las cuales el oxígeno no es un factor limitante transferencia de oxígeno
para el microorganismo
Las determinaciones
experimentales mas utilizadas
Presión de aire se basan en un balance de
El termino Kla depende oxígeno y en todas ellas se
de las propiedades Tamaño de la evalúa KLa
fisico-quimicas del
medio y de las burbuja
propiedades físicas y
condiciones de Temperatura
operación del
biorreactor Viscosidad del La fiabilidad del valor del coeficiente
dependerá de en que medida se haya
conseguido esta similitud. Este
medio método utiliza la ecuación, sin el
termino de consumo
 Cinética microbiana

Un proceso de crecimiento celular

implica el consumo de sustratos que
suministren la energía y la materia
prima necesaria para la síntesis de
material celular y demás productos
del metabolismo.
Estequiometria del crecimiento Para poder calcular los coeficientes
Desde un punto de vista cuantitativo, las cantidades estequimetricos es necesario conocer la
necesarias de los nutrientes pueden determinarse a composición elemental del microorganismo.
partir de la estequiometria del crecimiento y
formación de productos, ya que un crecimiento
Microorganism Nutriente Fórmula
microbiano puede expresarse en forma de reacción o limitante empírica
química:
Aerobacter CH1,78N0,24O0,33
aerogenes
Klebsiella Glicerol CH1,74N0,22O0,33
aerogenes
Candida utilis Glucosa CH1,84N0,2O0,56
Fuente de Biomasa
carbono Candida utilis Etanol CH1,84N0,2O0,55
Fuente de Productos
nitrógeno
Saccharomyces Glucosa CH1,7N0,17O0,46
cerevisiae
 Rendimientos
Uno de los principales parámetros en Conviene aclarar que el termino DS se
una fermentación es el «Rendimiento refiere al sustrato total consumido
(Y)».

Consumo para Consumo para la

crecimiento formación de
celular
producto
Consumo para
mantenimiento
celular
 Microorganismo Condiciones de ms (g/g/h)
crecimiento

Aerobacter Aerobico. Limitado 0.094

cloacae por glucosa

Coeficiente de Saccharomyces Anaerobico 0.036 – 0.04

mantenimiento celular cerevisiae

Saccharomyces Anaerobico+ NaCl (1 0.36

La cantidad de sustrato cerevisiae mol)
consumida por unidad de masa
celular por unidad de tiempo
Multiplicando por m Klebsiella Aerobico 0.04
aerogenes
 
Klebsiella Anaerobico 0.5
aerogenes
Velocidad especifica de
consumo de sustrato
 En las etapas tempranas de la fermentación en
la que el alimento es suficientemente grande,
el crecimiento celular no tiene barreras que lo
limiten, por tal razón , se puede considerar que
la velocidad especifica de crecimiento es
constante o maxima.

       

td= tiempo de duplicación

1.- Fases de adaptación
2.- Fase de crecimiento ordenado
3.- Fase estacionaria En consecuencia, el número de
4.- Fase de muerte duplicaciones, n, despúes del tiempo t,
esta dado por:
Se deduce que la densidad celular (X) después
Cinética de formación de
del tiempo, t, se relacionaría con la densidad producto
presente originalmente (Xo) Las fermentaciones se pueden clasificar
en tres tipos de acuerdo a la formación de
productos:
1. Asociada al crecimiento
  2. No asociada al crecimiento
3. Parcialmente asociada al crecimiento

 
1

m
3
2
 
 
El modelo mas ampliamente utilizado para
describir la cinética de formación de
producto es el de Luedeking y Piret, el cual
Esta ecuación representa una línea recta cuya
establece lo siguiente:
pendiente es a y la ordenada es b

a b
Asociada al crecimiento  
No asociada al crecimiento
 
  Parcialmente asociada al crecimiento
   

 
Cinética de consumo de Para obtener los parámetros , basta con
sustrato linealizar la misma ecuación y de la
pendiente y la ordenada se calculan dichos
parámetros:

Demostrar