Tema-14-Tecnicas-luminiscentes.

pdf

mmhhvv2

Química Analítica en la Industria

2º Grado en Ingeniería Química

Facultad de Ciencias
Universidad Autónoma de Madrid

Reservados todos los derechos.

No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
 Tema 14. Técnicas luminiscentes
Índice: Introducción. Respuesta analítica. Factores que afectan a la fluorescencia. Instrumentación.
Propiedades, aplicaciones y quimioluminiscencia.

14.1. Introducción
La desexcitación del estado excitado hasta el nivel vibracional fundamental del estado excitado se
desactiva por choques (calor), pero no emite radiación. Aunque es cierto que hay algunas moléculas
que emiten radiación después del estado fundamental. La longitud de onda va a ser mayor que la de
excitación, de manera que se puede establecer que, a menor energía, mayor longitud de onda.
𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑒 𝑟𝑎𝑑𝑖𝑎𝑐𝑖ó𝑛 → 𝑅𝑒𝑙𝑎𝑗𝑎𝑐𝑖ó𝑛 → 𝐷𝑒𝑣𝑢𝑒𝑙𝑣𝑒 𝑟𝑎𝑑𝑖𝑎𝑐𝑖ó𝑛

En fluorescencia, si se quita la fuente de radiación se dejará de emitir la fluorescencia. Sin embargo,

en la fosforescencia, se seguirá emitiendo (por ejemplo, se ve después de apagar la lámpara). En
ambas técnicas luminiscentes se excita con radiación. La fosforescencia es más lenta ya que se
requiere un paso previo y tiene una mayor longitud de onda, es decir, menor diferencia energética.
𝑋 → 𝑋 ∗ → 𝑋 + 𝑐𝑎𝑙𝑜𝑟 + ℎ𝜈
en donde:
− hυ = espectro de emisión

Excitación Método
Fluorescencia Absorción de fotones Fotoluminiscente
Fosforescencia Absorción de fotones Fotoluminiscente
Quimioluminiscencia Reacción química Luminiscente

En el campo octaédrico habrá un estado singulete (S1, M = multiplicidad = 1 y S = 0) y un estado

triplete (T1, M = multiplicidad = 3 y S = 1).

− Singulete excitado = fluorescencia = emisión de un fotón de S1 a S0 inmediatamente después

de la excitación.
𝜆𝑓𝑙𝑢𝑜𝑟𝑒𝑠𝑐𝑒𝑛𝑐𝑖𝑎 > 𝜆𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑐𝑖ó𝑛

− Triplete excitado = fosforescencia = emisión de un fotón del triplete al singulete fundamental.

La fosforescencia se ve si se apaga la fuente de excitación, aunque no de forma inmediata.
𝜆𝑓𝑜𝑠𝑓𝑜𝑟𝑒𝑠𝑐𝑒𝑛𝑐𝑖𝑎 > 𝜆𝑓𝑙𝑢𝑜𝑟𝑒𝑠𝑐𝑒𝑛𝑐𝑖𝑎 > 𝜆𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑐𝑖ó𝑛

a64b0469ff35958ef4ab887a898bd50bdfbbe91a-6714145

Reservados todos los derechos. No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
 Como el triplete excitado es menos energético que el singulete excitado, el paso de singulete a
singulete va a ser más favorable que el paso de singulete a triplete. Por esta razón, el tiempo de vida
del triplete es mayor.

14.2. Respuesta analítica

La respuesta analítica viene dada por la siguiente ecuación,

Reservados todos los derechos. No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
𝐼𝐹 = 𝑘 × 𝜙𝐹 × 𝑃0 × 2,3 × 𝜀𝑏𝑐

en donde:
− k = constante que depende de los parámetros instrumentales
𝑛∘ 𝑓𝑜𝑡𝑜𝑛𝑒𝑠 𝑒𝑚𝑖𝑡𝑖𝑑𝑜𝑠
− ϕF = rendimiento cuántico de la fluorescencia =
𝑛∘ 𝑓𝑜𝑡𝑜𝑛𝑒𝑠 𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑖𝑑𝑜𝑠
− P0 = potencia de la fuente electromagnética
− ε = absortividad molar
− b = camino óptico / anchura de la celda
− c = concentración
Si la señal es muy pequeña, habrá que aumentar la potencia para poder mejorar/aumentar la
intensidad. Sin embargo, a altas concentraciones se pierde linealidad a causa de:
− Autoabsorción: se da porque cuando hay muchas partículas, el resto pueden llegar a absorber
la emisión de otros.
− Autoatenuación: se da porque al haber muchas partículas juntas, las moléculas chocan y se
desactivan.
− Formación dímeros o agregados: se forman y absorben.

14.3. Factores que afectan a la fluorescencia

Son varios factores los que van a afectar a la fluorescencia:
1. La estructura molecular de las sustancia es uno de los factores ya que, por ejemplo, los
compuestos orgánicos saturados no producen fluorescencia, mientras que los hidrocarburos
aromáticos, sí (debido al efecto de los sustituyentes en el anillo aromático).
𝑛 → 𝜋 ; 𝜋 → 𝜋 ∗ (𝑝𝑟𝑒𝑓𝑒𝑟𝑖𝑏𝑙𝑒)

Además, cuanto más rígida sea la molécula, más favorable será la fluorescencia ya que hay
menos vibración, es decir, menor desactivación. Las moléculas más rígidas son aquellas que
contienen un halógeno, un átomo de número atómico elevado o grupos dadores/aceptores de
electrones.
2. Los factores medioambientales como la influencia del disolvente, del oxígeno disuelto, de la
temperatura y el pH son el otro factor que va a afectar a la fluorescencia porque:
− Influencia de disolvente: cuanto más polar sea, la fluorescencia se desplazará a mayores
longitudes de onda.
− Influencia del oxígeno disuelto: cuanto más oxígeno haya, menor fluorescente será ya que
se favorece el cruce entre sistemas.
− Influencia de la temperatura: cuanto mayor sea la temperatura, menor será la
fluorescencia.
− Influencia del pH: fluorescencia en UV (en medios ácidos) y fluorescencia en VIS (en
medios básicos).

a64b0469ff35958ef4ab887a898bd50bdfbbe91a-6714145

si lees esto me debes un besito

 14.4. Instrumentación
En la imagen viene representados los componentes básicos de un fluorímetro en donde, para obtener
el espectro de emisión, se fija una longitud de onda ( λ ) en el cromador de excitación. Además, como
fuente continua de radiación se suele utilizar una lampara de arco de seno.
Si no hay bajas temperaturas no habrá fluorescencia debido a la existencia de un triplete que desactiva
el choque.

Reservados todos los derechos. No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
14.5. Propiedades, aplicaciones y quimioluminiscencia
Respecto a las propiedades analíticas se va a tratar la sensibilidad y selectividad de las técnicas
luminiscentes y de las técnicas espectrofotométricas. Tanto la sensibilidad como la selectividad en
las técnicas luminiscentes va a ser mayar que a las de las técnicas espectrofotométricas.
𝐿𝑢𝑚𝑖𝑛𝑖𝑠𝑐𝑒𝑛𝑐𝑖𝑎 > 𝐸𝑠𝑝𝑒𝑐𝑡𝑟𝑜𝑓𝑜𝑡𝑜𝑚é𝑡𝑟𝑖𝑐𝑎

Sensibilidad luminiscentes Sensibilidad espectrofotométricos

Detecta una señal positiva frente al ruido de
Detecta diferencias entre 2 grandes señales
fondo
Al aumentar P0 aumentará P proporcionalmente,
S es mejorable al aumentar Pv
pero A no

Selectividad luminiscentes Selectividad espectrofotométricos

Los interferentes serán todos aquellos que Los interferentes son aquellas especies que
emitan luz absorben

Será más fácil encontrar interferentes en absorción porque es más fácil encontrar especies que
absorben.
La fluorescencia se usa en análisis fluorimétricos de especies inorgánicas (formación de un quelato
fluorescente → ión metálico + ligando orgánico) y orgánicas. También se utiliza para la detección de
huellas digitales.
La quimioluminiscencia es un tipo de técnica luminiscente en la cual se llega al estado excitado por
medio de una reacción química. Un ejemplo de ellas serían las luciérnagas o la sangre en las escenas
de un crimen.
𝐴 + 𝐵 → 𝐶∗ + 𝐷

en donde:
− 𝐶 ∗ = 𝐶 + ℎ𝜈

a64b0469ff35958ef4ab887a898bd50bdfbbe91a-6714145

si lees esto me debes un besito