Universidad Veracruzana

UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
Región Poza Rica – Tuxpan

Reporte de laboratorio “Practica 19”

Curva de calibración
Presenta:
Luis Rojas Rendon
s21005922

Profesor:
Solís Maldonado Carolina
EE:
Química analítica y métodos instrumentales
Fecha:
11 de Diciembre 2022
 Universidad Veracruzana

INTRODUCCION
El día de hoy en esta práctica titulada “Curva de calibración”
analizaremos una muestra de colorante, a través de los siguientes
métodos y su longitud de onda, obtendremos una absorbancia y
transmitancia que nos ayudaran llegar a una curva de calibración.
Fundamentos

La mayor parte de los métodos analíticos son relativos, es decir, el

contenido del analito en la muestra se obtiene a través de un patrón o
estándar de referencia certificado. A partir de éste, es posible preparar
una disolución de concentración exactamente conocida denominada
solución madre. Luego, utilizando la solución madre, se preparan un
conjunto de soluciones a distinta concentración para la obtención de
una curva de calibración. En este sentido, para un análisis instrumental,
por ejemplo, utilizando cromatografía, lo que se busca es obtener una
respuesta instrumental proporcional a la concentración del analito.
 Universidad Veracruzana

De esta forma, una curva de calibración es la representación gráfica

que relaciona una señal instrumental en función de la concentración
de un analito y define un intervalo de trabajo en el cual, los resultados
a informar tienen una precisión y exactitud conocida que ha sido
documentada en la validación de cada método. La etapa de
calibración analítica, se realiza mediante un modelo, que consiste en
encontrar la recta de calibrado (expresión matemática) que mejor
ajuste a una serie de “n” puntos experimentales, donde cada punto se
encuentra definido por una variable “x” (variable independiente,
generalmente concentración del analito de interés) y una variable “y”
(variable dependiente, generalmente respuesta instrumental). La recta
de calibrado se encuentra definida por una ordenada al origen (b) y
una pendiente (m), mediante la ecuación y = mx + b. Conjuntamente,
los datos experimentales permiten calcular y justificar la linealidad
mediante el coeficiente de determinación (R2), este último debe ser
mayor a 0,995 (R2 >0,995). Luego, al momento de realizar la medición
de una muestra, lo que se obtiene es una respuesta instrumental que
se interpola en la recta de calibración, esto último permite obtener la
concentración del analito.
 Universidad Veracruzana

Curva de barrido
1 Preparar soluciones de los colorantes
a estudiar (rojo, amarillo, azul ó 2
colores secundarios).

2 Pesar 0.1 gramos del colorante y aforar

a 100 mL con agua desionizada (solución
stock= 1000 ppm)
De la solución madre del colorante tomar
0.1 mL y aforar a 100 mL (1 ppm del
colorante).
De la solución madre del colorante tomar
0.2 mL y aforar a 100 mL (2 ppm del
colorante).
De la solución madre del colorante tomar
0.3 mL y aforar a 100 mL (3 ppm del
colorante).
De la solución madre del colorante tomar
0.4 mL y aforar a 100 mL (4 ppm del
colorante).
De la solución madre del colorante tomar
0.5 mL y aforar a 100 mL (5 ppm del
colorante).
No olvide tener 100 mL de solo agua
desionizada como blanco.

3 Encender el espectrofotómetro UV-

Visible.

4 Seleccionar la función SCAN

LONGITUD DE ONDA

5 Hacer click en la pestaña PREPARAR

y seleccionar los siguientes
parámetros:
 Universidad Veracruzana

6 Modo: longitud de onda.

7 Unidad: absorbancia o trasmitancia.

8 Velocidad de barrido: medio.

9 Seleccionar el rango en que se hará el

barrido (400 a 800 nm).

10 Colocar el blanco dentro de la celda

11 Leer el blanco hasta que la respuesta

del aparato sea O.

12 Colocar la muestra dentro de la

celda.

13 Hacer doble click en INICIAR.

14 Remover la celda del compartimiento

y repetir los pasos 10 a 12 para las
demás soluciones coloreadas.

15 Tomar nota de la longitud de onda

donde se registro la mayor
absorbancia, graficar e interpretar.

16 Cuando todas las mediciones sean

completadas, apagar el
espectrofotómetro.
 Universidad Veracruzana

Curva de calibracion
1 Utilizar las soluciones estándares
previamente preparadas de O a 5ppm de
colorante vegetal.

2 Leer en el espectrofotómetro la
absorbancia y transmitancia de cada
solución. De acuerdo al procedimiento
siguinete:

3 Encender el equipo, e ir a menu y

seleccionar "LONGITUD DE ONDA
UNICA"

4 En el boton de opciones seleccionar el

simbolo de longitud de onda (2), teclear
el valor de la longitud de onda obtenida
en la curva de barrido y dar "OK".

5 Colocar la celda con la solución

blanco y seleccionar "CERO".

6 Después leer cada una de los

estándares de la curva de calibración,
seleccionando el boton que dice
"MEDICIÓN".

7 Tomar nota de las absorbancias

obtenidas para cada estándar.

8 Lavar celda con una solucion de

acetona, secar con una toallita muy
suave y entregarla.

9 Apagar equipo y desconectar de la

corriente eléctrica.
 Universidad Veracruzana

Materiales y Equipo
Matraz volumétrico de 100 mL con tapón
1 Pipeta volumétrica de 1 mL
Vaso de precipitado
Toallitas suaves
Espectrofotómetro

Reactivos
Agua desionizada
Colorante vegetal

Cálculos

1000𝑚𝑙
| 1𝑔
|
0.1330 1000𝑚𝑔 1000𝑚𝑙
1𝐿
|=1330ppm muestra patron:133ppm

1ml 2ml 3ml 4ml 5ml

(133)(1) (133)(2) (133)(3) (133)(4)
= 1.33ppm = 2.66ppm =3.99ppm =5.32ppm
100𝑚𝑙 100𝑚𝑙 100𝑚𝑙 100𝑚𝑙
(133)(5)
=6.65ppm
100𝑚𝑙

Resultados
ppm abs %T
0 0.000 0
1.33 0.005 98.9
2.66 0.005 98.8
3.99 0.005 98.8
5.32 0.006 98.7
6.65 0.006 98.7
La curva de calibración no es posible llevarla a cabo ya que el
analito que estamos analizamos se encuentra muy diluido y no es
posible formar una curva de calibración a través de los datos
obtenidos.
 Universidad Veracruzana

Conclusión
Concluimos esta práctica con la obtención de absorbancia y
transmitancia a través de un espectrómetro también
obteniendo nuevos conocimientos para su manejo. Reforzando
los conocimientos sobre la curva de calibración y sus formulas
para obtenerlas ya sea manuales o a computadora.

Referencias
A, S. D. (2008). Fundamentos de Química. Mexico: 8ª edición.

LUMITOS leds to succes. (1997-2022). QUIMICA.ES. Obtenido de QUIMICA.ES:

https://www.quimica.es/enciclopedia/Soluci%C3%B3n_Est%C3%A1ndar.html#:~:text=Un
%20patr%C3%B3n%20primario%20tambi%C3%A9n%20llamado,Tienen%20composici%C3
%B3n%20conocida.

Oscar Jaramillo . (3 de Mayo de 2007). Definiciones e ideas fundamentales. Obtenido de

Definiciones e ideas fundamentales:
https://www.ier.unam.mx/~ojs/pub/Termodinamica/node6.html