LIC.

CARLA ANDREA ALCOREZA SORIA

BIOQUÍMICA
ESPECIALIDAD: QUÍMICA CLÍNICA
 Stat Fax 1904 es un sistema de fotómetro dicromático compacto, controlado por un
microprocesador, de propósito general con 6 filtros e incubación a 37ºC .
 Incluye 6 filtros, de longitudes de onda 340, 405, 450, 505, 545 y 600 nm
 El diámetro standart apropiado para los tubos utilizados en el instrumento es de 12
mm.
 Posee incubación de 12 estaciones, impresora integrada y pantalla táctil.
 “Stat” hace referencia a la obtención de un resultado inmediato.
 1. Que el estudiante adquiera información actualizada en el manejo de “stat fax”
que le permita resolver todas sus dudas.

2. Que el estudiante adquiera los elementos formativos que le permitan desarrollar

una actitud y pensamientos críticos, y adquiera la capacidad de tomar decisiones
adecuadas en el trabajo.
 LEY DE LAMBER Y BEER

“La ABSORBANCIA de una solución es directamente proporcional a la CONCENTRACIÓN y a la

LONGITUD DEL PASO DE LA LUZ”.
Donde:
I = Blanco (Rvo)
Io= Rvo + Muestra
• Se basa en la luz de la lámpara especial (halógena de tungsteno) que
posee, se enfoca mediante un lente a través de un orificio, esta es
guiada por medio de un conector que selecciona y separa la luz de la
longitud de onda, para luego pasar por una muestra.
 La intensidad de la luz que sale de esa muestra es captada y se compara con la
intensidad de la luz que incidió en esa muestra, con esa información se puede
calcular la cantidad de luz que es absorbida, transmitida o reflejada, la cual
dependerá de la concentración de la sustancia.
La diferencia fundamental entre un espectrofotómetro y un fotómetro o
fotocolorímetro, consiste en que el fotocolorímetro trabaja únicamente en el
espectro de luz visible y selecciona una longitud de onda determinada mediante
filtros fijos.

Espectro de luz, tanto en el rango visible como no visible, con sus respectivas longitudes de
onda.
 El instrumento puede ser usado para medir la absorbancia o concentración.

 Lee y calcula los resultados de los ensayos clínicos colorimétricos de punto final y
cinéticos.
 METODO CINETICO:
Método que determina la diferencia de la absorbancia entre dos puntos de la
progresión de una reacción, para ello, es necesario usar un periodo de tiempo
especifico para su determinación.
Es una medición continua a diferencia de la de punto final, tiene la capacidad de
medir la cantidad de sustrato NO transformado o la cantidad de producto formado.
La concentración de enzimas en suero es muy baja, sin embargo, dada su elevada
capacidad catalítica, es posible determinar su actividad y presuponer que ésta es
proporcional a su concentración. Por tanto, el estudio de las enzimas en el laboratorio
se basa en la demostración “in vitro” de la actividad catalítica que será determinada
por este método/técnica.
En una reacción enzimática podemos
diferenciar 3 fases:
• Fase de retardo.
• Fase lineal.
• Fase de agotamiento de sustrato.

Por otro lado existen dos tipos de

reacciones:

1) De tipo creciente: La reacción

transcurre en positivo, aquí la
absorbancia inicial será siempre un
valor menor a la absorbancia final.

2) De tipo decreciente: La reacción

transcurre en negativo. La
absorbancia inicial será un valor mas
alto que la absorbancia final.
 METODO DE PUNTO FINAL:
Método que determina la concentración total de los diferentes analitos consumidos
durante la progresión de una reacción. Se basa en la medición de un compuesto de
color medido fotométricamente en una reacción de punto final.
Una reacción de punto final se da en un tiempo aproximado de 5 a 15 minutos a 37ºC.
Por lo general esta reacción da como resultado un producto coloreado y alcanza un
valor estable que no cambiará mas con el tiempo; por lo tanto ese es el punto final de
la reacción.
Este método se fundamenta en la medida de la interacción de la luz de una
determinada longitud de onda con un compuesto de interés (analito) presente en la
muestra. Sigue la ley de Lamber y Beer donde la absorbancia es proporcional a la
concentración de la muestra.
 La Colorimetría es la ciencia que estudia la medida de los colores y que desarrolla métodos
para la cuantificación de la percepción del color.

Las pruebas colorimétricas generalmente son de punto final; estas a su vez se

clasifican en:

 Colorimétricas enzimáticas: mediado por enzimas que catalizan la reacción hasta

obtener como resultado un complejo coloreado denominado Quinoneimina ó
REACCIÓN DE TRINDER.
Sin embargo, no todos los “analitos” forman la misma reacción, pero es necesaria la
presencia de enzimas especificas para la obtención del producto final.

 Colorimétricas: para la reacción final, no es necesaria la presencia de una enzima.

La absorbancia será directamente proporcional a la concentración del color,
obteniendo así un valor cuantificable.
Es muy importante conocer el principio de reacción de cada TÉCNICA ANALÍTICA, para entender
que procesos químicos se están llevando a cabo en el análisis de las muestras sanguíneas.

Por otro lado, las reacciones cinéticas, también se subdividen en:

Cinético enzimático: Donde se evalúa principalmente la actividad enzimática, más

allá del producto obtenido. Es importante recordar que los reactivos de método
cinético, se componen:
 Reactivo 1: Que generalmente es el buffer o tampón (medio en el que se da la
reacción).
 Reactivo 2: Contiene el sustrato específico para evaluar la actividad catalítica de
cada analito que esté empleado por esta técnica.

Cinético: Evalúa el producto obtenido.

 STAT FAX 4500
AWARENESS 1904 EQUIPO C/PANTALLA TOUCH
EQUIPO MANUAL MANUAL
CON MICROTECNICA ADAPTABLE
 ERBA MANNHEIM
MINDRAY BS-240 Pro
EQUIPO SEMIAUTOMATICO CON
EQUIPO AUTOMATIZADO CON SOFTWARE
MICROTECNICA INCORPORADA
INCORPORADO
MICROTECNICA INCORPORADA
 PAPEL DE
CELDAS DE IMPRESIÓN
INCUBACIÓN

CELDA
DE
LECTURA
IMPRESORA

PANTALLA DE
LECTURA

TECLADO DACTIL
 Baño María de las celdas de incubación,
SIEMPRE DEBE ESTAR ATEMPERADA, antes
de empezar cualquier proceso ya que
TODAS las reacciones suceden a 37ºC,
suponiendo la temperatura corporal.
 SELECCIONE: AUX 186

Cuando el voltaje no se encuentra entre 3.000

y 8.000 se pierde precisión.
 REPRODUCIBILIDAD: Que tanto de la variabilidad
de la medición es causada por las diferencias
entre los operadores

REPETIBILIDAD: Que tanto de la variabilidad de la

medición es causada por el equipo de medición
MODO ABSORBANCIA: EL INSTRUMENTO LEE E
IMPRIME ABSORVANCIAS DIFERENCIALES
USANDO FILTROS SELECCIONADOS POR EL
OPERADOR
MODO FACTOR: LAS ABSORBANCIAS SE MULTIPLICAN
POR EL FACTOR INGRESADO Y LUEGO SE REPORTAN
COMO CONCENTRACIONES.
MODO STANDART: CALCULA LAS
CONCENTRACIONES DE ACUERDO CON LA LEY
DE LAMBER Y BEER BASÁNDOSE EN UNA UNICA
LECTURA STANDART
 Además de las 6 opciones de filtro principal, el operador puede seleccionar una
longitud de onda diferencial para la lectura bicromática en cualquier modo de
funcionamiento. Esto corrige las imperfecciones en los tubos de ensayo y a menudo,
elimina los efectos de la turbidez no deseada.

MANUAL DE USO EQUIPO AWARENESS 1904

NO RECOMENDADO
PRESIONE: “AUX 99”
 Es la capacidad del método analítico para
obtener resultados directamente
proporcionales a la concentración o cantidad
del analito en un rango definido.
Se trata de la propiedad del resultado de una medición o del valor de un calibrador, de
tal manera que pueda ser relacionada con referencias determinadas, generalmente
patrones nacionales o internacionales, por medio de una cadena ininterrumpida de
comparaciones, teniendo todas las incertidumbres determinadas.
 Según el Vocabulario Internacional de Metrología, VIM (2012) por calibración se
entiende “el conjunto de operaciones que establecen, en condiciones especificas, la
relación entre los valores de una magnitud indicados por un instrumento de medida
o sistema de medida, o los valores representados por una medida materializada o
por un material de referencia, y los valores correspondientes de esa magnitud
realizados por patrones”.
 Esta definición de calibración es la comúnmente aceptada, pero existe otra según la
cual la calibración también se puede considerar como la caracterización de la
respuesta de un instrumento en función de las propiedades de un analito. Establece
la relación entre una magnitud y la concentración de la sustancia medida (Valcárcel,
1999). Se puede hablar por lo tanto de dos tipos de calibración. En el Tabla 1, se
esquematizan las principales diferencias que existen entre los dos tipos de
calibración que existen.
En la calibración analítica o indirecta, la respuesta del instrumento o sistema de medida se
expresa en magnitud distinta a la del patrón o patrones de calibración. Será necesaria en algunos
procedimientos junto a la calibración instrumental.
Al calibrar, el usuario reduce costos, cumple con los requisitos de certificación y
acreditación.

“La calibración del instrumento

garantiza la calidad en los procesos”.
 CADA INSTRUMENTO SE CALIBRA DURANTE LA FABRICACIÓN, UTILIZANDO ESTANDARES
TRAZABLES. EL OPERADOR NO PUEDE ACCEDER A NINGÚN AJUSTE DE CALIBRACIÓN
YA QUE LA CALIBRACIÓN PREESTABLECIDA ES MUY ESTABLE. SIN EMBARGO LA
CABIBRACIÓN ABSOLUTA SE PUEDE VERIFICAR CON EL USO DE FILTROS Y
CONFIRMARSE CON SUEROS CONTROL QUE PUEDE OBTENER DE SU DISTRIBUIDOR.
 DADO QUE LA MAYORIA DE LOS RESULTADOS DE LAS PRUEBAS DE LABORATORIO SE
BASAN EN ESTÁNDARES Y NO EN ABSORBANCIAS ABSOLUTAS, LA LINEALIDAD DEL
INSTRUMENTO ES EL INDICADOR MÁS CRÍTICO DEL RENDIMIENTO DEL INSTRUMENTO.
 UNA ALTERACIÓN EN LA LINEALIDAD CON LA EDAD PUEDE SER EL INDICATIVO DE
DETERIORO DEL FILTRO. EN ESTE CASO “SI” SE REQUIERE DEL REEMPLAZO DE FILTRO
PARA UNA OPERACIÓN CONTINUA Y CONFIABLE.
 LA MEJOR MANERA DE GARANTIZAR UN RENDIMIENTO DE CALIDAD DEL INSTRUMENTO
ES INCLUIR UNA CANTIDAD SUFICIENTE DE CONTROLES EN CADA ENSAYO PARA CUBRIR
TODO EL RANDO OPERATIVO.
CREATINA ÁCIDO PÍCRICO PICRATO DE CREATININA
 Verificar un espacio libre de vibración para establecer como lugar fijo del
analizador.
 Después de conectar el estabilizador de energía, espere 15 minutos antes de
encender el equipo. Recuerde que es importante una buena conexión.
 Inspección externa (Carcaza, pantalla, impresora, etc.).
 Limpieza (elimine la suciedad con alcohol al 70% e Hipoclorito de sodio).
 En caso de usar mosquito, desinfecte con Hipoclorito de sodio al 0.1%.
 Verificación de pruebas: Control de calidad químico (Standart, Calibrador).
 Tubo roto en el equipo: Recomendable apagar el equipo e introducir un paño
absorbente en forma de cono sin hacer mucha presión.
 Impresión de filtros: Aux 186 (voltaje menor a 3.000, llevar a mantenimiento).
 Llamado de pruebas: Aux 99
 Unidades: Aux 90
 Recuperar pruebas: Aux 101
 ¿Qué hacer cuando se sale de la linealidad?