Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann

Facultad de Ciencias
Práctica 6

Reconocimiento de Proteínas - Enzimas

Fundamento teórico

Materiales

Material biológico

Material de Laboratorio

Reactivos

Equipo

Procedimientos

Proteínas

Experiencia 1. Propiedades físicas y químicas de las proteínas

 Enumerar 4 tubos de ensayo

 Considere los componentes para los tubos I,II y III, según el cuadro que se muestra
 El tubo de ensayo IV se sumerge a baño María a temperatura superior de 70°C
 Observar ,graficar y explicar las reacciones en cada uno de los tubos de ensayo

Componentes I II III IV
Solución de ovoalbúmina 2 ml 2 ml 2 ml 2 ml
NaOH 40% 2 ml -------- -------- --------
HNO3 ------- 2 ml -------- --------
Acetato de plomo ------- -------- 2 ml --------
Calor a
mayor de
70°C

Experiencia 2. Reacción de Biuret -Inkiosa

 Considerar 2 ml de solución de ovoalbúmina en un tubo de ensayo . Adicionar 1 ml de

NaOH
 Mezclar bien los componentes y añadir gota a gota solución de sulfato de cobre al 1%
hasta la aparición de color violeta o púrpura
 Observar, graficar y explicar los resultados de la experiencia

Experiencia 3. Reacción Xantoproteica

 En un tubo de ensayo considerar 2 ml de solución de ovoalbúmina

 Adicionar 1 ml de ácido nítrico concentrado y llevar a baño María por 5 minutos. Observe
la reacción que se produce
 Añadir gota a gota NaOH hasta la aparición de color naranja
 Observar, graficar y explicar los resultados de la experiencia
Experiencia 4. Reacción de los grupos SH

 Considerar en un tubo de ensayo, 2 ml de solución de ovoalbúmina

 Agregar entre 5 a 10 gotas de acetato de plomo y observar la reacción de precipitación
de la proteína
 Añadir gota a gota solución saturada de NaOH hasta disolver el precipitado
 Llevar el tubo de ensayo a baño María hasta observar la aparición de un color pardo
oscuro
 Observar, graficar y explicar resultados de la experiencia

Enzimas

Experiencia 5. Reacción de la catalasa

 Considerar en un tubo de ensayo dos fragmentos pequeños de manzana. En un segundo

tubo de ensayo dos fragmentos pequeños de hígado de pollo
 Añadir 2 ml de peróxido de hidrógeno (agua oxigenada) a cada tubo de ensayo
 Observar y explicar resultados a través de sus gráficos respectivos

Experiencia 6. La enzima catalasa y su pH óptimo de actividad (Efecto del pH)

 Considerar dos fragmentos pequeños de hígado de pollo, en tres tubos de ensayo

 Agregar
1 ml de buffer pH 4 al tubo de ensayo 1
1 ml de buffer pH 7 al tubo 2
1 ml de buffer pH 10 al tubo 3
 Mezclar componentes por rotación , para que el tejido tenga buffer de pH determinado
 Dejar en reposo 10 minutos .Después de transcurrido los 10 minutos, agregar 1 ml de
peróxido de hidrógeno para ver la actividad de la catalasa.
 Observar, graficar y explicar los resultados de la experiencia

Experiencia 7. La catalasa a temperatura mayor de 70 grados (Efecto de la temperatura)

 Considerar dos pequeños fragmentos de hígado de pollo en un tubo de ensayo

 Llevar el tubo de ensayo a baño María a temperatura mayor de 90 grados
 Después de 10 minutos , agregar 1 ml de peróxido de hidrógeno
 Observar, graficar y explicar la experiencia

Resultados

Conclusiones

Referencias