Guíalab Bioquímica

UNIVERSIDAD JOSÉ ANTONIO PÁEZ
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA DE ODONTOLOGÍA
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
PRÁCTICA N° 1
DETERMINACIÓN DE pH
Objetivos:
- Demostrar el uso de la cinta reactiva de pH

- Demostrar la diferencia de pH de diversas sustancias
- Demostrar el pH salival y sus cambios frente a la presencia de ácidos y álcali.
Materiales:
- Cinta reactiva para medir pH

- Vidrio de reloj
- Frasco gotero
- Gradilla
- Agitador de vidrio
- Pinza
- Pipeta plástica desechable (para medir y manipular la saliva)
- Vaso plástico desechable
- Guantes desechables de latex (debe traerlos el alumno)
Reactivos:
- Vinagre
- Hidróxido de Sodio (NaOH) 10%p/v
- Alcohol
- Solución Buffer
- Ácido Nítrico (HNO3) 0,1N
- Hidróxido de Sodio (NaOH) 0,1N
Muestras:
- Saliva
- Agua destilada
PRÁCTICA N° 1
DETERMINACIÓN DE pH
Procedimiento:
Experimento 1
SUSTANCIA pH Observaciones
Vinagre
NaOH 10%p/v
Alcohol
Saliva
Agua Destilada
Solución Buffer
Observe. Reporte Resultados y Conclusiones.
Experimento 2
Muestra/Reactivo Vidrio de Vidrio de pH Observaciones

Reloj reloj
Saliva 1 gota -----------------
--
Solución Buffer ------------------ 1 gota
-
Ácido Nítrico(HNO3) 0,1N 2 gotas 2 gotas
Experimento 3
Muestra/Reactivo Vidrio de reloj Vidrio de reloj pH Observacione

s
Saliva 1 gota ------------------
--
Solución Buffer ------------------ 1 gota
-
Hidróxido de Sodio(NaOH) 2 gotas 2 gotas
0,1N
PRÁCTICA N° 2
AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS
Objetivos:
- Identificar la presencia de Aminoácidos que contengan grupos NH2 y COOH libres o potencialmente libres.
- Demostrar la presencia de Aminoácidos Aromáticos.
- Demostrar a presencia de Enlaces Peptídicos, mediante la Reacción de Biuret.
- Demostrar la Desnaturalización por Calor de las proteínas del huevo (ovo-albúmina).
- Demostrar la Desnaturalización por Alcohol de la ovo-albúmina.
Materiales:
- Gradilla
- Tubos de ensayo
- Pipetas Graduadas de 1,00ml
- Pro-pipeta
- Pinza para tubo de ensayo
- Frascos para reactivos
- Vaso de precipitado graduado de 50mls
- Frasco gotero
- Baño de María
- Pipeta Volumétrica de 5,00mls
- Pipeta Graduada de 10,00mls
- Pipeta plástica desechable (para medir la ovo-albúmina)
- Guantes de látex (debe traerlos el alumno)
Reactivos:
- Glicina 1% p/v
- Cisteína 1% p/v
- Triptófano 1% p/v
- Ninhidrina 0,2% p/v
- Ácido Nítrico 0,1N
- Hidróxido de Sodio (NaOH) 30% p/v
- Reactivo de Biuret
- Alcohol 70%
PRÁCTICA N° 2
Procedimiento:
Experimento 1 Reacción de Ninhidrina

Muestra/Reactivo Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4
Glicina 1% p/v 1 ml ------------- ------------- ------------
-- -- --
Cisteína 1% p/v -------------- 1 ml ------------- ------------
-- -- --
Triptófano 1% p/v -------------- ------------- 1 ml ------------
-- -- --
Agua Destilada -------------- ------------- ------------- 1 ml
-- -- --
Ninhidrina conc. 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml
0,2%
Mezclar bien,cada uno de los tubos de ensayo y llevarlos simultáneamente a baño de María a 75°C durante 7 minutos.
Retírelos del baño, déjelos enfriar. Observe. Reporte Resultados y Conclusiones.
Experimento 2 Reacción Xantoprotéica

Glicina 1%p/v 1ml --------------- -------------- ---------------
- - -
Cisteína 1%p/v ------------ 1 ml -------------- ---------------
- - -
Triptófano 1%p/v ------------ --------------- 1 ml ---------------
- - -
Agua Destilada ------------ --------------- -------------- 1 ml
- - -
Ácido Nítrico(HNO3) 18 gotas 18 gotas 18 gotas 18 gotas
0,1N
Mezclar bien,cada uno de los tubos de ensayo y llevarlos simultáneamente a baño de María a 80°C durante 2 minutos.
Déjelos enfriar a temperatura ambiente y agregue a cada tubo de ensayo 10 gotas de Hidróxido de Sodio(NaOH) 30%p/v
Experimento 3 Reacción de Biuret

Muestra/Reactivo Tubo 9 Tubo 10 Tubo 11 Tubo 12 Tubo 13
Ovo albúmina 1 ml ------------- ------------- ------------- -------------
-- - -- --
Glicina 1% p/v ------------ 1 ml ------------- ------------- -------------
-- - -- --
Cisteína 1% p/v ------------ ------------- 1 ml ------------- -------------
-- -- - --
Triptófano 1% ------------ ------------- ------------- 1 ml -------------
p/v -- -- - --
Agua Destilada ------------ ------------- ------------- ------------- 1 ml
-- -- - --
Reactivo de 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
Biuret
Mezclar bien, cada uno de los tubos de ensayo. Observe. Reporte Resultados y Conclusiones.

PRÁCTICA N° 2
Procedimiento:
Experimento 4
Desnaturalización por Calor
Muestra Tubo
14
Ovo albúmina 2 mls
Calentar en baño de María a 75°C por 3 minutos

Experimento 5
Desnaturalización por Alcohol
Muestra/Reactivo Tubo
15
Ovo albúmina 2 mls
Alcohol 70% p/v 5 mls
Agitar vigorosamente.
Experimento 6
Al tubo anterior añada 10 mls de agua destilada, agite vigorosamente.
PRÁCTICA N° 3
CARBOHIDRATOS
Objetivos:
- Comprender la Importancia del Reconocimiento de Carbohidratos.

- Describir el Uso de la Reacción de Benedict para Reconocer grupos Aldehídos y Cetónicos libres (poder reductor)
- Describir el uso de la Reacción de Selivanoff para Reconocer Cetosas.
- Describir el Uso de la Prueba de Lugol para Reconocer Polisacáridos.
Materiales:
- Gradilla
- Tubos de ensayo
- Frasco gotero
- Baño de María
Reactivos:
- Glucosa 10% p/v

- Fructosa 10% p/v
- Sacarosa 10% p/v
- Almidón 10% p/v
- Glucógeno 1% p/v
- Reactivo de Benedict
- Reactivo de Selivanoff
- Reactivo de Lugol
PRÁCTICA N° 3
CARBOHIDRATOS
Procedimiento:
Experimento 1 Reacción de Benedict

Muestra/Reactivo Tubo 1 Tubo 2 Tubo
3
Glucosa 10% p/v 18 gotas --------
--
Fructosa 10% p/v --------- 18 gotas
--
Sacarosa 10% p/v --------- -------- 18
-- -- gotas
Reactivo de Benedict 1 ml 1 ml 1 ml
Agitar suavemente cada uno de los tubos de ensayo y llevarlos simultáneamente a baño de María a 75°C durante 10
minutos. Retírelos del baño,déjelos enfriar. Observe. Reporte Resultados y Conclusiones.
Experimento 2 Reacción de Selivanoff

Muestra/Reactivo Tubo 4 Tubo 5 Tubo
6
Glucosa 10% p/v 18 gotas ---------- --------
-- --
Fructosa 10% p/v ------------ 18 --------
- gotas --
Sacarosa 10% p/v ------------ ---------- 18
- -- gotas
Reactivo de Selivanoff 1 ml 1 ml 1 ml
Agitar suavemente cada uno de los tubos de ensayo y llevarlos simultáneamente a baño de María a 60°C durante 2 minutos.
Retírelos del baño,déjelos enfriar. Observe. Reporte Resultados y Conclusiones.
Experimento 3 Reacción de Lugol

Muestra/Reactivo Tubo 7 Tubo 8 Tubo 9
Almidón 10% p/v 18 gotas ---------- ---------
--
Glucosa 10% p/v ----------- 18 gotas ---------
--
Glucógeno 1% p/v ----------- ---------- 18
-- -- gotas
Reactivo de Lugol 1 gota 1 gota 1 gota
Agitar suavemente cada uno de los tubos de ensayo.


PRÁCTICA N° 4
LÍPIDOS
Objetivos:
- Establecer la Solubilidad de las grasas en relación a diferentes Solventes.

- Describir el Proceso de Saponificación.
- Describir la Acción Batótona de los Jabones
Materiales:
- Gradilla
- Tubos de ensayo
- Pipeta Volumétrica de 2,0mls
- Pipeta Volumétrica de 5,00mls.
- Pipeta Graduada de 10,00mls
- Pipeta plástica desechable
- Vaso de precipitado graduado de 250mls.
- Vaso de precipitado graduado de 100mls.
- Agitador de vidrio
- Baño de María
- Cilindro Graduado de 50,00mls.
- Embudo para filtración por gravedad
- Papel de Filtro
- Soporte Universal
- Espátula
- Mechero
- Trípode
- Rejilla Metálica
- Nuez doble
- Anillo metálico
- Lentes de Seguridad
- Pinza para vaso de precipitado
- Fósforos

ESCUELA DE ODEONTOLOGÍA
PRÁCTICA N° 4
LÍPIDOS
Reactivos:
- Cloroformo
- Alcohol Absoluto
- Hidróxido de Sodio (NaOH) 10% p/v
- Azufre en polvo
Muestras:
- Agua destilada
- Aceite
Procedimiento:
Experimento 1 Solubilidad
Muestra/Reactivo Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3
Aceite 1 ml 1 ml 1 ml
Agua 2 mls ------------- ------------
-- --
Cloroformo ------------ 2 mls ------------
-- --
Alcohol ------------ ------------- 2 mls
-- --
Agitar vigorosamente cada tubo de ensayo. Anote sus Observaciones

El tubo 3 colóquelo en baño de María a 70°C durante 1 minuto. Reporte Resultados y Conclusiones.
PRÁCTICA N° 4
LÍPIDOS
Procedimiento:
Experimento 2 Saponificación
En un beaker(vaso de precipitado) de 250ml, añada 2mls.de aceite;luego agregue 10mls de alcohol. Agite con la varilla de
vidrio hasta mezclar bien. Agregue 10mls de NaOH (hidróxido de sodio) 10%p/v.
Caliente lentamente,agitando hasta que se evapore el líquido y se forme una pasta amarillenta, evitando que se queme.
Retire del fuego y deje enfriar. Seguidamente tome un tubo de ensayo y coloque 15mls de agua destilada, agregue a este
tubo toda la masa pastosa posible que pueda retirar del beaker con la ayuda de una espátula y luego agite vigorosamente .
Filtre la solución y toque su textura.Anote las Observaciones.
Experimento 3 Acción Batótona

Muestra/Reactivo Tubo 4 Tubo 5
Agua Destilada 10mls 10mls
Solución Filtrada del experimento 2 ------------------ 5mls
-
Azufre Espolvorear
Espolvorear
Anote sus Observaciones. Reporte Resultados y Conclusiones.
Experimento 4 Acción Batótona

Utilizando una pipeta plástica tipo gotero, mida 1ml de agua destilada, cuente lenta y cuidadosamente el número de gotas
Proceda de igual forma utilizando la misma pipeta plástica tipo gotero para 1ml de Solución Filtrada del experimento 2.
Reporte: 1ml de agua destilada numero de gotas ________

1ml de Solución Filtrada del experimento 2 numero de gotas ________
Explique el Resultado Obtenido

PRÁCTICA N° 5
ENZIMAS
Objetivos:
- Demostrar el Efecto Catalítico de la Amilasa Salival sobre el Almidón

- Demostrar el Efecto de la Temperatura
- Demostrar la Especificidad de las enzimas
- Demostrar el Efecto Catalítico de la Catalasa sobre el peróxido de hidrógeno (H 2O2)
- Demostrar el Efecto del pH
Materiales:
- Gradilla
- Tubos de ensayo
- Frasco gotero
- Pipeta plástica desechable tipo gotero
- Vaso plástico desechable
Reactivos:
- Almidón 0,5%
- Glucosa 200 mg/dl
- Maltosa 200mg/dl
- Reactivo de Lugol
- Peróxido de hidrógeno (H2O2)
Muestras:
- Saliva
- Sangre

PRÁCTICA N° 5
ENZIMAS
Procedimiento:
Experimento 1 Efecto Catalizador

Saliva 10 gotas 10 gotas 10 gotas 10 gotas
Almidón 0,5% 20 gotas 20 gotas ---------------- --------------
- --
Glucosa 200mg/dl --------------- ----------------- 20 gotas --------------
-- - --
Maltosa 200mg/dl --------------- ----------------- ---------------- 20 gotas
-- - -
Reactivo de Lugol 1 gota 1 gota 1 gota 1 gota
Agitar cada uno de los tubos de ensayo, llevar el tubo 1 a baño de agua a 50°C el resto de los tubos de ensayo déjelos en
reposo en la gradilla. Observar todos los tubos de ensayo a: 0minutos; 5minutos; 10minutos y 20minutos
Al finalizar el tiempo de observación, retirar el tubo 1 del baño de agua.
Reporte Resultados y Conclusiones.
Experimento 2 Efecto del pH
Muestra/Reactivo Tubo 5 (pH Tubo 6 (pH básico) Tubo 7 (pH
ácido) neutro)
Sangre 2 gotas 2 gotas 2 gotas
Peróxido de Hidrógeno(H2O2) 4 gotas 4 gotas 4 gotas
Anote sus Observaciones. Reporte Resultados y Conclusiones.

PRÁCTICA N° 6
METABOLISMO DE LOS CARBOHIDRATOS
Objetivos:
- Identificación de Glucosa en líquidos biológicos, utilizando Reactivo Enzimático.

- Comprobación de la Sensibilidad del Reactivo de Benedict en un líquido biológico.
- Utilizar Muestra Patrón
- Utilizar Muestras en general
- Comparar los resultados de la Muestra Patrón y las Muestras en general
Materiales:
- Gradilla
- Tubos de ensayo
- Frasco gotero
- Baño de María
- Campana extractora de gases
Reactivos:
- Glucosa 200mg/dl
- Fructosa 70mg/dl
- Sacarosa 100mg/dl
- Reactivo de God-trinder
- Glucosa 500mg/dl
- Glucosa 1000mg/dl
- Reactivo de Benedict

PRÁCTICA N° 6
Muestras:
- Muestra patrón
- Muestras en general
- Orina
Procedimiento:
Experimento 1 Identificación de Glucosa .Método Enzimático

Muestra/Reactivo Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5 Tubo 6
Glucosa 200mg/dl 1 gota ------------ ----------- ----------- ------------ -----------
-- -- -- - -
Fructosa 70mg/dl ------------ 1 gota ----------- ----------- ------------ -----------
-- -- -- - -
Sacarosa 100mg/dl ------------ ------------ 1 gota ----------- ------------ -----------
-- -- -- - -
Muestra Patrón ------------ ------------ ----------- 1 gota ------------ -----------
-- -- -- - -
Muestra 1 ------------ ------------ ----------- ----------- 1 gota -----------
-- -- -- -- -
Muestra 2 ------------ ------------ ----------- ----------- ------------ 1
- -- - -- - gota
Reactivo de God-trinder 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
Mezclar cada uno de los tubos y dejarlos en reposo por 10 minutos. Observe.

PRÁCTICA N° 6
Procedimiento:
Experimento 2 Sensibilidad del Reactivo de Benedict

Orina Normal 1ml 1ml 1ml 1ml
Glucosa 200mg/dl ------------- 18 gotas -------------- ------------
-- -- --
Glucosa 500mg/dl ------------- ------------ 18 gotas ------------
-- -- --
Glucosa 1000mg/dl ------------- ------------ -------------- 18 gotas
-- -- --
Reactivo de Benedict 1ml 1 ml 1 ml 1 ml
Mezclar cada uno de los tubos de ensayo y llevarlos a baño de María a 90°C durante 10 minutos. Observe.
PRÁCTICA N° 7
METABOLISMO DE LOS LÍPIDOS
Objetivos:
- Identificar los lípidos en muestra de agua destilada.

- Identificar los lípidos en muestras de Suero o Plasma.
- Identificar los lípidos en muestra de Suero Patrón
- Comprobar la Acción del Reactivo Enzimático.
- Comparar los resultados obtenidos en la muestra de Suero Patrón y las muestras de Suero.
Materiales:
- Gradilla
- Tubos de ensayo
- Pipeta graduada de 1,00ml
- Campana Extractora de Gases
Reactivos:
- Reactivo enzimático
Muestras:
- Agua destilada
- Suero o plasma

PRÁCTICA N° 7
METABOLISMO DE LOS LÍPIDOS
Procedimiento:
Experimento 1 Identificación de Lípidos. Método Enzimático

Agua Destilada 1ml ------------ ------------- --------------
-- -- --
Suero Patrón ------------ 1ml ------------- --------------
-- -- --
Suero A ------------ ------------ 1ml --------------
-- -- --
Suero B ------------ ------------ ------------- 1ml
-- -- -
Reactivo Enzimático 1ml 1ml 1ml 1ml
Mezclar cada uno de los tubos y dejarlos en reposo por 10 minutos. Observe
PRÁCTICA N° 8
METABOLISMO DE LA S PROTEÍNAS
Objetivos:
- Identificar la Presencia de Urea en las muestras de Suero o Plasma
- Comprobar la Acción del Reactivo Enzimático
- Establecer la importancia de la muestra identificada como patrón
Materiales:
- Gradilla
- Tubos de ensayo
- Pinza para tubos de ensayo
- Pipeta graduada de 1,00ml
- Pipeta desechable tipo gotero
- Pipeta volumétrica de 3,00mls
- Baño de María
Reactivos:
- Reactivo Enzimático
Muestras:
- Agua destilada
- Suero o plasma

PRÁCTICA N° 8
METABOLISMO DE LA S PROTEÍNAS
Procedimiento:
Reactivo/Muestra Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4

Reactivo de color 0,5ml 0,5ml 0,5ml 0,5ml
Ureasa #1 0,2ml 0,2ml 0,2ml 0,2ml
Agua destilada 0,1ml ----------- ------------ -----------
-- -- -
Muestra Patrón ----------- 0,1ml ------------ -----------
-- -- -
Muestra 1 ----------- ----------- 0,1ml -----------
-- -- -
Muestra 2 ----------- ----------- ------------ 0,1ml
-- -- --
Agite cada tubo
de ensayo e
incube(llevar a
baño de María) a
37°C durante 5
minutos. Agregue
reactivo base 3
Reactivo base 3 0,5ml 0,5ml 0,5ml 0,5ml
Agite cada tubo
de ensayo e
incube a 37°C
durante 5
minutos. Agregue
agua ( des-
ionizada, des-
mineralizada o
destilada)
Agua destilada 3,0mls 3,0mls 3,0mls 3,0mls

Guíalab Bioquímica

Cargado por

Información del documento

Descripción original:

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Guíalab Bioquímica

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

UNIVERSIDAD JOSÉ ANTONIO PÁEZ

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

- Demostrar el uso de la cinta reactiva de pH

- Cinta reactiva para medir pH

Muestra/Reactivo Vidrio de Vidrio de pH Observaciones

Muestra/Reactivo Vidrio de reloj Vidrio de reloj pH Observacione

Experimento 1 Reacción de Ninhidrina

Experimento 2 Reacción Xantoprotéica

Experimento 3 Reacción de Biuret

UNIVERSIDAD JOSÉ ANTONIO PÁEZ

Desnaturalización por Calor

Calentar en baño de María a 75°C por 3 minutos

- Comprender la Importancia del Reconocimiento de Carbohidratos.

- Glucosa 10% p/v

Experimento 1 Reacción de Benedict

Experimento 2 Reacción de Selivanoff

Experimento 3 Reacción de Lugol

Agitar suavemente cada uno de los tubos de ensayo.

UNIVERSIDAD JOSÉ ANTONIO PÁEZ

- Establecer la Solubilidad de las grasas en relación a diferentes Solventes.

UNIVERSIDAD JOSÉ ANTONIO PÁEZ

Agitar vigorosamente cada tubo de ensayo. Anote sus Observaciones

Experimento 3 Acción Batótona

Anote sus Observaciones. Reporte Resultados y Conclusiones.

Experimento 4 Acción Batótona

Reporte: 1ml de agua destilada numero de gotas ________

UNIVERSIDAD JOSÉ ANTONIO PÁEZ

- Demostrar el Efecto Catalítico de la Amilasa Salival sobre el Almidón

UNIVERSIDAD JOSÉ ANTONIO PÁEZ

Experimento 1 Efecto Catalizador

Anote sus Observaciones. Reporte Resultados y Conclusiones.

UNIVERSIDAD JOSÉ ANTONIO PÁEZ

METABOLISMO DE LOS CARBOHIDRATOS

- Identificación de Glucosa en líquidos biológicos, utilizando Reactivo Enzimático.

UNIVERSIDAD JOSÉ ANTONIO PÁEZ

METABOLISMO DE LOS CARBOHIDRATOS

Experimento 1 Identificación de Glucosa .Método Enzimático

UNIVERSIDAD JOSÉ ANTONIO PÁEZ

METABOLISMO DE LOS CARBOHIDRATOS

Experimento 2 Sensibilidad del Reactivo de Benedict

METABOLISMO DE LOS LÍPIDOS

- Identificar los lípidos en muestra de agua destilada.

UNIVERSIDAD JOSÉ ANTONIO PÁEZ

METABOLISMO DE LOS LÍPIDOS

Experimento 1 Identificación de Lípidos. Método Enzimático

UNIVERSIDAD JOSÉ ANTONIO PÁEZ

Reactivo/Muestra Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4

Observe. Reporte Resultados y Conclusiones.

También podría gustarte