Bioquímica - Práctica

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

Semestre Académico: Ciclo 2021-II

Informe N° 3: "DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO EN

PLASMA"
Integrantes
I. OBJETIVOS

 Determinar la concentración de ácido úrico en plasma, mediante un método

espectrofotométrico.

 Comparar el valor obtenido de ácido úrico con los rangos de referencia.

II. INTRODUCCIÓN

El ácido úrico es un catabolismo proveniente de las purinas, las cuales

degradan las células muertas del cuerpo logrando este producto; de los ácidos nucleicos,
y así como de las nucleoproteínas; niveles anormales de ácido úrico en suero son
indicadores de desórdenes metabólicos de sustancias que lo originan, como de defectos
en su eliminación o posiblemente de estas dos ambas causas. Habitualmente la
concentración de ácido úrico en suero varía de un individuo a otro dependiendo de
diferentes factores como: la edad, sexo, peso, presión arterial tanto sistólica, como
diastólica, función renal, ingesta de una dieta con contenido alto
de purinas y consumo regular
de alcohol.

La hiperuricemia es
un disturbio metabólico que se
encuentra frecuentemente en
la población tanto en adultos
ambulatorios como en
pacientes hospitalizados. No existen muchas diferencias entre hiperuricemia primaria y
secundaria haciéndola difícil de distinguir, casi siempre, la hiperuricemia parece ser un
fenómeno secundario obtenido como consecuencia de enfermedades subyacentes o de
factores exógenos presentados en la vida de los individuos que incrementan la síntesis
de ácido úrico y/o reducen la excreción renal del ácido úrico, aunque raras veces la
hiperuricemia puede ser un factor primario.

Se reconoce que la hiperuricemia es el factor de riesgo más importante para el

desarrollo de gota además se ha descrito elevación de los niveles de ácido úrico en
sangre en pacientes con hipertensión, lo que lo asocia a un aumento en la morbilidad y
mortalidad por enfermedad cardiovascular y compromiso renal temprano (1).
III. MARCO TEÓRICO

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO EN SUERO

El ácido úrico es un compuesto orgánico formado por moléculas de carbono,

nitrógeno, oxígeno e hidrógeno. Su fórmula química es C5H4N4O3. Es el producto del
catabolismo de las purinas. Las dos purinas, adenina y guanina, son originarias del
organismo principalmente componentes de los ácidos nucleicos, ácido ribonucleico
(ARN) y ácido desoxirribonucleico (ADN). Existen dos fuentes de purinas, las que se
obtienen por la hidrólisis de los ácidos nucleicos ingeridos (exógenos) y los ácidos
endógenos (2).

Valores normales de Ácido Úrico en sangre: Ideal menor a 6 mg%.

• Mujeres: Hasta 5.5 mg/dL.

• Hombres: Hasta 6.5mg/dL.
 FUNDAMENTO DEL MÉTODO

Las siguientes reacciones enzimáticas determinan al ácido úrico:

Uricasa
Ácido úrico + 2 H2O +O2 Alantoína+ H2O2 + CO2

Peroxidasa
2H2O2 + 4-aminofenazona + 3,5-DHS quinonimina (color)

El ácido úrico (C5H4N4O3) junto con 2 moléculas de agua (H2O) y una de oxígeno (O2)
reaccionan ante la enzima uricasa para formar alantonina junto a una molécula de
peróxido de hidrógeno (H2O2) y otra de dióxido de carbono (CO 2). Cundo se unen dos
moléculas de peróxido de hidrógeno (H2O2) estas reaccionan junto con el ácido 3,5-
DHS (3-5-Dicloro-2-Hidroxi-Bencenosulfónico) y 4-AF (4- aminofenazona) ante la
enzima peroxidasa para obtener quinonimina, un compuesto colorado que se puede
cuantificar mediante la espectrofotometría.
 CUESTIONARIO

1) Realice un esquema acerca de la degradación de las purinas.

2) Realice una lista de causas primarias de la hiperuricemia.

Las causas de niveles altos de ácido úrico (hiperuricemia) pueden ser primarias (altos
niveles de purinas) y secundarias (alguna otra enfermedad). La hiperuricemia es la
elevación del ácido úrico en la sangre, en general por encima de 7 mg/dl. Las causas
primarias de la hiperuricemia se deben a (3):
a) Sobreproducción de ácido úrico: se caracteriza por una alta actividad
de Síntesis de Novo de las purinas.
o Síndrome de Lesch-Nyhan: mutaciones en el gen HPRT de la HGPRT.
o Síndrome de Kelly-Seegmiller: mutación en PRPP.
o Hiperactividad de la PRPP sintetasa.

b) Subexcreción de ácido úrico

o Subexcreción renal.
o Subexcreción extrarrenal.

3) Realice una lista de causas secundarias de la hiperuricemia.

o Condiciones endocrinológicas o metabólicas: ciertas formas de diabetes

o acidosis pueden causar niveles altos de ácido úrico en la sangre.
o Muerte celular por ciertos cánceres o agentes quimioterapéuticos. Esto por lo
general se debe a la quimioterapia, pero los niveles altos de ácido úrico
pueden aparecer antes de iniciar la quimioterapia.
o Enfermedad renal: esto sucede cuando el riñón no es capaz de eliminar el ácido
úrico del sistema, causando así hiperuricemia.
o Medicamentos: pueden causar niveles altos de ácido úrico en la sangre.
o Los niveles elevados de ácido úrico pueden producir problemas renales.

Algunas personas pueden vivir muchos años con niveles elevados de ácido úrico y sin
desarrollar gota o artritis gotosa. Sólo cerca del 20% de las personas con niveles altos de
ácido úrico desarrollan gota y algunas personas con gota no tienen niveles muy elevados
de ácido úrico en la sangre (4).

4) En que otra muestra biológica se puede determinar el ácido úrico.

La prueba de ácido úrico puede ser un análisis de orina o de
sangre. Sin embargo, también se puede realizar la prueba de
líquido sinovial, el cual es un líquido que se puede encontrar
en las articulaciones; en esta prueba podemos determinar la
presencia de cristales de urato en el líquido articular, esto
indicaría que el paciente padezca gota (5).

5) ¿Cuál es el mecanismo de acción del alopurinol?

El alopurinol es un inhibidor de la xantina oxidasa, que se utiliza

en el tratamiento de la gota se puede administrar por vía oral o
intravenosa. Este medicamento actúa sobre le el metabolismo de
las purinas sin modificar su biosíntesis, se encarga de reducir la
producción de ácido úrico al reaccionar inhibiendo en su
metabolismo de formación. El alopurinol es un análogo
estructural de la base purica hipoxantina y actúa inhibiendo la
xantina-oxidasa, enzima responsable de la conversión de
hipoxantina a xantina y
está a ácido úrico producto final del catabolismo de las purinas en el hombre (6).
IV. MÉTODO

Nuestra guía de prácticas menciona un método para calcular la

concentración de ácido úrico de nuestras muestras utilizando la densidad
óptica (DO).

Equipos:

 Espectrofotómetro
 Baño de agua
 Cronometro

Materiales:

 Tubos de vidrio 13 x 100

 Gradilla
 Micropipetas
 Tips de micropipetas
 Recipiente de bioseguridad
 Cubetas del espectrofotómetro

Reactivos:

 Kit para determinar ácido úrico.

 Contiene: Estándar: solución de ácido úrico 10 mg/dL.
 Reactivo A: sal sódica de 3,5 diclorohidroxibenceno sulfónico (DHS).
 Reactivo B: solución conteniendo buffer Good pH 7.8, 4- aminofenazona
(4-AF), uricasa (UOD), peroxidasa (POD), y ferrocianuro de potasio.
 PROCEDIMIENTO

A) En tres tubos de ensayo rotulados como B, ST y M, colocar:

Reactivos Blanco Estándar Muestra

(B) (ST) (M)

Reactivo A (µL) 800 800 800

Reactivo B (µL) 200 200 200

Estándar (µL) _ 20 _

Suero (uL) _ _ 20

B) Mezclar e incubar durante 5 minutos en baño de agua a 37ºC.

C) Retirar y colocar en una cubeta y realizar la lectura en el

espectrofotómetro a505 nm, llevando el equipo a cero con el blanco.

D) Anotar los resultados de densidad óptica (DO) de los tubos ST y M.

Tabla 1: Valores obtenidos de absorbancia (DO) en las muestras

Muestra(M) DO(abs) DO(st)

1 0.620 0.300

2 0.069 0.300

3 0.550 0.300

4 0.179 0.300

Fuente: elaboración propia

 CÁLCULO DE RESULTADOS

Se procesan las muestras de suero de 4 pacientes, los dos primeros del sexo masculino, y los resultados son
DO de la muestra (M)1: 0.620MASCULINO
DO de la muestra (M)2: 0.069MASCULINO
DO de la muestra (M)3: 0.550FEMENINO
DO de la muestra (M)4: 0.179FEMENINO

 Si la DO del estándar es 0.300

 La concentración del estándar es de 10 mg/ dL

Fuente: Elaboración propia

a) Calcule la concentración de ácido úrico de todos los pacientes.

Para calcular la concentración de ácido úrico se utilizó la siguiente formula:

Ácido úrico en suero (mg/dL) = DO muestra x Concentración estándar

DO estándar

 PACIENTES VARONES

1. DO de la muestra (M)1: 0.620

Ácido úrico en suero (mg/dL) = (0.620 ) x 10 mg / dL

0.300

Ácido úrico en suero = 20.666 mg/dL

 2. DO de la muestra (M)2: 0.069

Ácido úrico en suero (mg/dL) = (0.069 ) x 10 mg / dL

0.300

Ácido úrico en suero = 2.300 mg/dL

 PACIENTES MUJERES

1. DO de la muestra (M)3: 0.550

Ácido úrico en suero (mg/dL) = (0.550) x 10 mg / dL

0.300

Ácido úrico en suero = 18.333 mg/dL

2. DO de la muestra (M)4: 0.179

Ácido úrico en suero (mg/dL) = (0.179) x 10 mg / dL

0.300

Ácido úrico en suero = 5.966 mg/dL

b) Determine si estos valores se encuentran dentro del rango de referencia.

 PACIENTES VARONES

1. Ácido úrico en suero = 20.666 mg/dL

El valor del ácido úrico del paciente se encuentra muy elevado con
respecto al valor de referencia normal.
 2. Ácido úrico en suero = 2.300 mg/dL

El valor del ácido úrico del paciente está por debajo de los valores
referenciales.

 PACIENTES MUJERES

1. Ácido úrico en suero = 18.333 mg/dL

El valor del ácido úrico de la paciente se encuentra por encima de los valores
normales de referencia.

2. Ácido úrico en suero = 5.966 mg/dL

El valor del ácido úrico de la paciente se encuentra en el rango establecido con

respecto a los valores de referencia normales.

V. RESULTADOS

Fuente: Elaboración propia

Fuente: Elaboración propia

Fuente: Elaboración propia

VI. DISCUSIÓN

En los resultados que obtuvimos, observamos que en la muestra del primer paciente
varón se presentó un caso de hiperuricemia, ya que en la concentración de la muestra
sérica fue de 20,6 sobrepasando los valores normales que son de 3,5 a 7,0 mg/dL. Esto
se debe a dietas ricas en proteínas, por la ingesta alta de alcohol o de fructosa. Por lo
contrario, en la muestra del segundo paciente se obtuvo una concentración de 2,30, la
cual está por debajo de los niveles referenciales. Los niveles de ácido úrico son
ligeramente bajos, pero no preocupantes. Puede deberse a una alimentación no
equilibrada, por ejemplo; una dieta vegetariana con déficit de consumo de purinas.

En las muestras de las mujeres, se obtuvo en la tercera paciente una concentración de

18,3 la cual excede los valores referenciales (2,0 a 6,0 mg/dL),
tengamos en cuenta que a parte de la alimentación también se puede producir
hiperuricemia en diversas patologías como el síndrome de Lesch-Nyhan, la enfermedad
de Von Gierke, o por el tratamiento de leucemias y linfomas.

Finalmente, en la cuarta paciente sus niveles de ácido úrico se encontraban dentro de los
valores referenciales, ya que la concentración obtenida de esta fue de 5,9 mg/dL.

VII. CONCLUSIONES

 Al determinar la concertación de ácido úrico en las muestras se comprobó que este

varía de acuerdo algunos factores como dieta, sexo origen étnico y/o embarazo.
Entonces al encontrar algunas muestras analizadas con niveles anómalos de ácido
úrico en suero, entonces se concluye que existe algún desorden en el metabolismo
de las sustancias que lo originan o de una inadecuada eliminación.
 Al comparar con valores obtenidos en la práctica se determinó que los datos
analizados tanto de la primera muestra y de la tercera son anómalos es decir que lo
valores de ácido úrico se encuentran muy elevados de lo normal por lo que podemos
inferir que se deba a una sobreproducción de ácido úrico o a una ineficiencia de su
eliminación llevándonos así diagnosticar una posible hiperuricemia. Con respecto a
la muestra dos se observó que dichos valores obtenidos están por debajo de lo
normar y la muestra tres se observa que los valores están el rango normal.
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Carvajal Carvajal C, Carvajal Carvajal C. El ácido úrico: de la gota y otros males.

Medicina Legal de Costa Rica. marzo de 2016;33(1):182-9.
2. Contreras Roura J. Errores innatos del metabolismo de las purinas y otras
enfermedades relacionadas. Revista Cubana de Pediatría. junio de 2012;84(2):197-
200.
3. Villaran R, Quiroz J, Adrianzen E, Perez L, Saldias J, Mendoza J, et al. Niveles de
ácido úrico en la altura y a nivel del mar. Rev Med Hered [internet]. 2000 [citado 22
de agosto 2021]; 11(1). Disponible en:
http://www.scielo.org.pe/pdf/rmh/v11n1/v11n1ao2.pdf
4. Chemocare. Hiperuricemia (ácido úrico elevado). [Internet]. [consultado 20 de
agosto del 2021]. Disponible en:
https://chemocare.com/es/chemotherapy/side-effects/Hiperuricemia.aspx
5. American Kidney Fund. Pruebas para la gota. [Internet]. 22 de diciembre del 2020
[consultado 20 de agosto del 2021]. Disponible en:
https://www.kidneyfund.org/en-espanol/enfermedad-de-los-
rinones/complicaciones/gota/cuales-son-las-pruebas-para-la-gota/
6. Alopurinol en vademécum [internet]. [citado el 23 de agosto de 2021]. Disponible
en: https://www.iqb.es/cbasicas/farma/farma04/a038.htm