Está en la página 1de 8

DETERMINACIN DE CIDO RICO

CIDO RICO
En el catabolismo de los cidos nucleicos, las bases purnicas liberadas por
hidrlisis de sus nucletidos son parcialmente reutilizadas en el proceso de
sntesis metablica, pero sufren en parte un proceso de oxidacin a cido rico
pasando por la formacin de xantina (2,6-dioxipurina). En la mayora de los
mamferos el cido rico (sustancia muy poco hidrosoluble) prosigue su
degradacin catablica dando lugar a la alantona, compuesto de excelente
solubilidad que es rpidamente excretado por va renal. En el hombre y en los
antropoides falta la enzima necesaria para este ltimo paso catablico, la
uricasa, y en consecuencia se elimina el cido rico como producto final del
metabolismo de las purinas. La solubilidad mxima del cido rico en plasma
sera de unos 8.5 a 8.8 mg/dL, y a un pH de 7.4 aproximadamente el 98 por
ciento del cido rico total se encuentra bajo su forma de sal monoalcalina.
Tambin se encuentra presente en los hemates, y en condiciones de equilibrio
su concentracin eritrocitaria es aproximadamente la mitad de la plasmtica.
Debido a su muy mala solubilidad en los lquidos orgnicos, el cido rico es un
catabolito potencialmente peligroso capaz de conducir a la constitucin de
formaciones cristalinas. El adulto medio tiene un contenido total aproximado de
1.2 g de cido rico en el cuerpo, lo cual puede considerarse una reserva
miscible con un recambio alto. El cido rico de esta reserva procede de tres
orgenes: 1) catabolismo de purinas endgenas, 2) catabolismo de purinas
exgenas y 3) excrecin renal/intestinal. La mayor parte de la formacin de
cido rico tiene lugar en el hgado, por su gran actividad de xantino oxidasa;
el adulto medio excreta aproximadamente de 0.4 a 0.8 g de cido rico en
orina cada 24 horas. Los valores de referencia varan con el mtodo, edad,
factores raciales, sexo, factores sociales y factores geogrficos. Como un
metabolito del metabolismo de las purinas, cidos nucleicos y nucleoprotenas,
los niveles anormales de cido srico pueden indicar un desorden en el
metabolismo de estas sustancias. La metodologa para la determinacin de la
concentracin de cido rico se basa en la reaccin de Trinder, un mtodo
enimtico colorimtrico que involucra dos reacciones acopladas. En la primera,
la enzima uricasa cataliza la oxidacin del cido rico a alantoina, con la
produccin de perxido de hidrgeno (H2O2):
cido rico + O2 + H2O Alantoina + CO2 + H2O2
En la segunda reaccin, la enzima peroxidasa cataliza la reaccin del perxido
de hidrgeno con el 3,5- dicloro-2-hidroxibencilsulfonato (DHBS) y 4-amino
antipirina (4-AAP) para formar un compuesto coloreado (Quinoneimina) que
absorbe luz a 505 nm. 2H2O2 + DHBS + 4-AAP Quinoneimina + 4H2O La
cantidad de luz absorbida es directamente proporcional a la cantidad de
colorante formado y, por lo tanto, a la concentracin de cido rico en la
muestra.
MATERIALES

Suero para las determinacin de cido rico


Reactivos: o Reactivo enzimtico colorimtrico para la determinacin de
cido rico Soluciones estndar de: o cido rico
Cubetas fotomtricas
Micropipetas
Puntas para micropipetas
Fotmetro
Reloj
PROCEDIMIENTO
1) Marcar tres tubos de ensayo como B (Blanco), St (Standard) y M (Muestra
escribir el nmero de muestra).
2) Proseguir de acuerdo al siguiente esquema:
TUBOS Pipetear en los tubos marcados B St M Agua destilada 15 l ---- ---Solucin estndar de cido rico ---- 15 l ---- Suero del paciente ---- ---- 15 l
Reactivo de cido rico 750 l 750 l 750 l
3) Incubar por 30 minutos a temperatura ambiente (TA)
4) Leer las absorbancias del estndar (ASt) y la muestra (AM), poniendo el
aparato en cero con el blanco de reactivos (B), a una longitud de onda de 500
nm
5) Determinar la concentracin de cido rico utilizando la ecuacin de BeerLambert
NOTAS: 1) LA CONCENTRACIN DEL ESTNDAR TIENE UNA VALOR DE 10 mg/dl
2) LOS VALORES DE REFERENCIA SON: Mujeres: mg/dl Hombres: mg/dl 3) LA
LINEALIDAD DE LA PRUEBA ES DE HASTA 25.0 mg/dl RESULTADOS: Calcule las
concentracin de cido rico en las muestras ensayadas. DISCUSIN DE
RESULTADOS a) Compare los resultados obtenidos con los valores de referencia
correspondientes b) Profundice, en forma ordenada, sobre las condiciones
clnicas en las que se podran obtener valores fuera de lo normal de cada uno
de ellos, estableciendo las causas probables. c) Explique qu significado tiene
la linealidad de la prueba CONCLUSIONES: Saque sus propias conclusiones
sobre la prctica realizada. RECOMENDACIONES: De sus recomendaciones
pertinentes sobre la prctica TRABAJO ESPECIAL: Haga una revisin
bibliogrfica sobre los siguientes temas: a) Hiperuricemia a.Aumento de la
sntesis de cido rico b. Defecto de la excrecin renal del cido rico b)
Hipouricemia REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
DETERMINACIN DE CIDO RICO
CIDO RICO

En el catabolismo de los cidos nucleicos, las bases purnicas liberadas por


hidrlisis de sus nucletidos son parcialmente reutilizadas en el proceso de
sntesis metablica, pero sufren en parte un proceso de oxidacin a cido rico
pasando por la formacin de xantina (2,6-dioxipurina). En la mayora de los
mamferos el cido rico (sustancia muy poco hidrosoluble) prosigue su
degradacin catablica dando lugar a la alantona, compuesto de excelente
solubilidad que es rpidamente excretado por va renal. En el hombre y en los
antropoides falta la enzima necesaria para este ltimo paso catablico, la
uricasa, y en consecuencia se elimina el cido rico como producto final del
metabolismo de las purinas. La solubilidad mxima del cido rico en plasma
sera de unos 8.5 a 8.8 mg/dL, y a un pH de 7.4 aproximadamente el 98 por
ciento del cido rico total se encuentra bajo su forma de sal monoalcalina.
Tambin se encuentra presente en los hemates, y en condiciones de equilibrio
su concentracin eritrocitaria es aproximadamente la mitad de la plasmtica.
Debido a su muy mala solubilidad en los lquidos orgnicos, el cido rico es un
catabolito potencialmente peligroso capaz de conducir a la constitucin de
formaciones cristalinas. El adulto medio tiene un contenido total aproximado de
1.2 g de cido rico en el cuerpo, lo cual puede considerarse una reserva
miscible con un recambio alto. El cido rico de esta reserva procede de tres
orgenes: 1) catabolismo de purinas endgenas, 2) catabolismo de purinas
exgenas y 3) excrecin renal/intestinal. La mayor parte de la formacin de
cido rico tiene lugar en el hgado, por su gran actividad de xantino oxidasa;
el adulto medio excreta aproximadamente de 0.4 a 0.8 g de cido rico en
orina cada 24 horas. Los valores de referencia varan con el mtodo, edad,
factores raciales, sexo, factores sociales y factores geogrficos. Como un
metabolito del metabolismo de las purinas, cidos nucleicos y nucleoprotenas,
los niveles anormales de cido srico pueden indicar un desorden en el
metabolismo de estas sustancias. La metodologa para la determinacin de la
concentracin de cido rico se basa en la reaccin de Trinder, un mtodo
enimtico colorimtrico que involucra dos reacciones acopladas. En la primera,
la enzima uricasa cataliza la oxidacin del cido rico a alantoina, con la
produccin de perxido de hidrgeno (H2O2):
cido rico + O2 + H2O Alantoina + CO2 + H2O2
En la segunda reaccin, la enzima peroxidasa cataliza la reaccin del perxido
de hidrgeno con el 3,5- dicloro-2-hidroxibencilsulfonato (DHBS) y 4-amino
antipirina (4-AAP) para formar un compuesto coloreado (Quinoneimina) que
absorbe luz a 505 nm. 2H2O2 + DHBS + 4-AAP Quinoneimina + 4H2O La
cantidad de luz absorbida es directamente proporcional a la cantidad de
colorante formado y, por lo tanto, a la concentracin de cido rico en la
muestra.
MATERIALES
Suero para las determinacin de cido rico
Reactivos: o Reactivo enzimtico colorimtrico para la determinacin de
cido rico Soluciones estndar de: o cido rico

Cubetas fotomtricas
Micropipetas
Puntas para micropipetas
Fotmetro
Reloj
PROCEDIMIENTO
1) Marcar tres tubos de ensayo como B (Blanco), St (Standard) y M (Muestra
escribir el nmero de muestra).
2) Proseguir de acuerdo al siguiente esquema:
TUBOS Pipetear en los tubos marcados B St M Agua destilada 15 l ---- ---Solucin estndar de cido rico ---- 15 l ---- Suero del paciente ---- ---- 15 l
Reactivo de cido rico 750 l 750 l 750 l
3) Incubar por 30 minutos a temperatura ambiente (TA)
4) Leer las absorbancias del estndar (ASt) y la muestra (AM), poniendo el
aparato en cero con el blanco de reactivos (B), a una longitud de onda de 500
nm
5) Determinar la concentracin de cido rico utilizando la ecuacin de BeerLambert
NOTAS: 1) LA CONCENTRACIN DEL ESTNDAR TIENE UNA VALOR DE 10 mg/dl
2) LOS VALORES DE REFERENCIA SON: Mujeres: mg/dl Hombres: mg/dl 3) LA
LINEALIDAD DE LA PRUEBA ES DE HASTA 25.0 mg/dl RESULTADOS: Calcule las
concentracin de cido rico en las muestras ensayadas. DISCUSIN DE
RESULTADOS a) Compare los resultados obtenidos con los valores de referencia
correspondientes b) Profundice, en forma ordenada, sobre las condiciones
clnicas en las que se podran obtener valores fuera de lo normal de cada uno
de ellos, estableciendo las causas probables. c) Explique qu significado tiene
la linealidad de la prueba CONCLUSIONES: Saque sus propias conclusiones
sobre la prctica realizada. RECOMENDACIONES: De sus recomendaciones
pertinentes sobre la prctica TRABAJO ESPECIAL: Haga una revisin
bibliogrfica sobre los siguientes temas: a) Hiperuricemia a.Aumento de la
sntesis de cido rico b. Defecto de la excrecin renal del cido rico b)
Hipouricemia REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

DETERMINACIN DE CIDO RICO


CIDO RICO
En el catabolismo de los cidos nucleicos, las bases purnicas liberadas por
hidrlisis de sus nucletidos son parcialmente reutilizadas en el proceso de

sntesis metablica, pero sufren en parte un proceso de oxidacin a cido rico


pasando por la formacin de xantina (2,6-dioxipurina). En la mayora de los
mamferos el cido rico (sustancia muy poco hidrosoluble) prosigue su
degradacin catablica dando lugar a la alantona, compuesto de excelente
solubilidad que es rpidamente excretado por va renal. En el hombre y en los
antropoides falta la enzima necesaria para este ltimo paso catablico, la
uricasa, y en consecuencia se elimina el cido rico como producto final del
metabolismo de las purinas. La solubilidad mxima del cido rico en plasma
sera de unos 8.5 a 8.8 mg/dL, y a un pH de 7.4 aproximadamente el 98 por
ciento del cido rico total se encuentra bajo su forma de sal monoalcalina.
Tambin se encuentra presente en los hemates, y en condiciones de equilibrio
su concentracin eritrocitaria es aproximadamente la mitad de la plasmtica.
Debido a su muy mala solubilidad en los lquidos orgnicos, el cido rico es un
catabolito potencialmente peligroso capaz de conducir a la constitucin de
formaciones cristalinas. El adulto medio tiene un contenido total aproximado de
1.2 g de cido rico en el cuerpo, lo cual puede considerarse una reserva
miscible con un recambio alto. El cido rico de esta reserva procede de tres
orgenes: 1) catabolismo de purinas endgenas, 2) catabolismo de purinas
exgenas y 3) excrecin renal/intestinal. La mayor parte de la formacin de
cido rico tiene lugar en el hgado, por su gran actividad de xantino oxidasa;
el adulto medio excreta aproximadamente de 0.4 a 0.8 g de cido rico en
orina cada 24 horas. Los valores de referencia varan con el mtodo, edad,
factores raciales, sexo, factores sociales y factores geogrficos. Como un
metabolito del metabolismo de las purinas, cidos nucleicos y nucleoprotenas,
los niveles anormales de cido srico pueden indicar un desorden en el
metabolismo de estas sustancias. La metodologa para la determinacin de la
concentracin de cido rico se basa en la reaccin de Trinder, un mtodo
enimtico colorimtrico que involucra dos reacciones acopladas. En la primera,
la enzima uricasa cataliza la oxidacin del cido rico a alantoina, con la
produccin de perxido de hidrgeno (H2O2):
cido rico + O2 + H2O Alantoina + CO2 + H2O2
En la segunda reaccin, la enzima peroxidasa cataliza la reaccin del perxido
de hidrgeno con el 3,5- dicloro-2-hidroxibencilsulfonato (DHBS) y 4-amino
antipirina (4-AAP) para formar un compuesto coloreado (Quinoneimina) que
absorbe luz a 505 nm. 2H2O2 + DHBS + 4-AAP Quinoneimina + 4H2O La
cantidad de luz absorbida es directamente proporcional a la cantidad de
colorante formado y, por lo tanto, a la concentracin de cido rico en la
muestra.
MATERIALES
Suero para las determinacin de cido rico
Reactivos: o Reactivo enzimtico colorimtrico para la determinacin de
cido rico Soluciones estndar de: o cido rico
Cubetas fotomtricas

Micropipetas
Puntas para micropipetas
Fotmetro
Reloj
PROCEDIMIENTO
1) Marcar tres tubos de ensayo como B (Blanco), St (Standard) y M (Muestra
escribir el nmero de muestra).
2) Proseguir de acuerdo al siguiente esquema:
TUBOS Pipetear en los tubos marcados B St M Agua destilada 15 l ---- ---Solucin estndar de cido rico ---- 15 l ---- Suero del paciente ---- ---- 15 l
Reactivo de cido rico 750 l 750 l 750 l
3) Incubar por 30 minutos a temperatura ambiente (TA)
4) Leer las absorbancias del estndar (ASt) y la muestra (AM), poniendo el
aparato en cero con el blanco de reactivos (B), a una longitud de onda de 500
nm
5) Determinar la concentracin de cido rico utilizando la ecuacin de BeerLambert
NOTAS: 1) LA CONCENTRACIN DEL ESTNDAR TIENE UNA VALOR DE 10 mg/dl
2) LOS VALORES DE REFERENCIA SON: Mujeres: mg/dl Hombres: mg/dl 3) LA
LINEALIDAD DE LA PRUEBA ES DE HASTA 25.0 mg/dl RESULTADOS: Calcule las
concentracin de cido rico en las muestras ensayadas. DISCUSIN DE
RESULTADOS a) Compare los resultados obtenidos con los valores de referencia
correspondientes b) Profundice, en forma ordenada, sobre las condiciones
clnicas en las que se podran obtener valores fuera de lo normal de cada uno
de ellos, estableciendo las causas probables. c) Explique qu significado tiene
la linealidad de la prueba CONCLUSIONES: Saque sus propias conclusiones
sobre la prctica realizada. RECOMENDACIONES: De sus recomendaciones
pertinentes sobre la prctica TRABAJO ESPECIAL: Haga una revisin
bibliogrfica sobre los siguientes temas: a) Hiperuricemia a.Aumento de la
sntesis de cido rico b. Defecto de la excrecin renal del cido rico b)
Hipouricemia REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
DETERMINACIN DE CIDO RICO
CIDO RICO
En el catabolismo de los cidos nucleicos, las bases purnicas liberadas por
hidrlisis de sus nucletidos son parcialmente reutilizadas en el proceso de
sntesis metablica, pero sufren en parte un proceso de oxidacin a cido rico
pasando por la formacin de xantina (2,6-dioxipurina). En la mayora de los
mamferos el cido rico (sustancia muy poco hidrosoluble) prosigue su
degradacin catablica dando lugar a la alantona, compuesto de excelente

solubilidad que es rpidamente excretado por va renal. En el hombre y en los


antropoides falta la enzima necesaria para este ltimo paso catablico, la
uricasa, y en consecuencia se elimina el cido rico como producto final del
metabolismo de las purinas. La solubilidad mxima del cido rico en plasma
sera de unos 8.5 a 8.8 mg/dL, y a un pH de 7.4 aproximadamente el 98 por
ciento del cido rico total se encuentra bajo su forma de sal monoalcalina.
Tambin se encuentra presente en los hemates, y en condiciones de equilibrio
su concentracin eritrocitaria es aproximadamente la mitad de la plasmtica.
Debido a su muy mala solubilidad en los lquidos orgnicos, el cido rico es un
catabolito potencialmente peligroso capaz de conducir a la constitucin de
formaciones cristalinas. El adulto medio tiene un contenido total aproximado de
1.2 g de cido rico en el cuerpo, lo cual puede considerarse una reserva
miscible con un recambio alto. El cido rico de esta reserva procede de tres
orgenes: 1) catabolismo de purinas endgenas, 2) catabolismo de purinas
exgenas y 3) excrecin renal/intestinal. La mayor parte de la formacin de
cido rico tiene lugar en el hgado, por su gran actividad de xantino oxidasa;
el adulto medio excreta aproximadamente de 0.4 a 0.8 g de cido rico en
orina cada 24 horas. Los valores de referencia varan con el mtodo, edad,
factores raciales, sexo, factores sociales y factores geogrficos. Como un
metabolito del metabolismo de las purinas, cidos nucleicos y nucleoprotenas,
los niveles anormales de cido srico pueden indicar un desorden en el
metabolismo de estas sustancias. La metodologa para la determinacin de la
concentracin de cido rico se basa en la reaccin de Trinder, un mtodo
enimtico colorimtrico que involucra dos reacciones acopladas. En la primera,
la enzima uricasa cataliza la oxidacin del cido rico a alantoina, con la
produccin de perxido de hidrgeno (H2O2):
cido rico + O2 + H2O Alantoina + CO2 + H2O2
En la segunda reaccin, la enzima peroxidasa cataliza la reaccin del perxido
de hidrgeno con el 3,5- dicloro-2-hidroxibencilsulfonato (DHBS) y 4-amino
antipirina (4-AAP) para formar un compuesto coloreado (Quinoneimina) que
absorbe luz a 505 nm. 2H2O2 + DHBS + 4-AAP Quinoneimina + 4H2O La
cantidad de luz absorbida es directamente proporcional a la cantidad de
colorante formado y, por lo tanto, a la concentracin de cido rico en la
muestra.
MATERIALES
Suero para las determinacin de cido rico
Reactivos: o Reactivo enzimtico colorimtrico para la determinacin de
cido rico Soluciones estndar de: o cido rico
Cubetas fotomtricas
Micropipetas
Puntas para micropipetas

Fotmetro
Reloj
PROCEDIMIENTO
1) Marcar tres tubos de ensayo como B (Blanco), St (Standard) y M (Muestra
escribir el nmero de muestra).
2) Proseguir de acuerdo al siguiente esquema:
TUBOS Pipetear en los tubos marcados B St M Agua destilada 15 l ---- ---Solucin estndar de cido rico ---- 15 l ---- Suero del paciente ---- ---- 15 l
Reactivo de cido rico 750 l 750 l 750 l
3) Incubar por 30 minutos a temperatura ambiente (TA)
4) Leer las absorbancias del estndar (ASt) y la muestra (AM), poniendo el
aparato en cero con el blanco de reactivos (B), a una longitud de onda de 500
nm
5) Determinar la concentracin de cido rico utilizando la ecuacin de BeerLambert
NOTAS: 1) LA CONCENTRACIN DEL ESTNDAR TIENE UNA VALOR DE 10 mg/dl
2) LOS VALORES DE REFERENCIA SON: Mujeres: mg/dl Hombres: mg/dl 3) LA
LINEALIDAD DE LA PRUEBA ES DE HASTA 25.0 mg/dl RESULTADOS: Calcule las
concentracin de cido rico en las muestras ensayadas. DISCUSIN DE
RESULTADOS a) Compare los resultados obtenidos con los valores de referencia
correspondientes b) Profundice, en forma ordenada, sobre las condiciones
clnicas en las que se podran obtener valores fuera de lo normal de cada uno
de ellos, estableciendo las causas probables. c) Explique qu significado tiene
la linealidad de la prueba CONCLUSIONES: Saque sus propias conclusiones
sobre la prctica realizada. RECOMENDACIONES: De sus recomendaciones
pertinentes sobre la prctica TRABAJO ESPECIAL: Haga una revisin
bibliogrfica sobre los siguientes temas: a) Hiperuricemia a.Aumento de la
sntesis de cido rico b. Defecto de la excrecin renal del cido rico b)
Hipouricemia REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

También podría gustarte