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PRÁCTICA DE LABORATORIO No. 7

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO
EN SUERO

1.1. INTRODUCCIÓN
El ácido úrico es un producto del metabolismo de las purinas, ácidos nucleicos y nucleoproteínas, valores
elevados indican patologías que afectan dichos metabolismos, algunas de estas son de origen genético.

Valores elevados se observan en pacientes con gota, falla renal, aterosclerosis, diabetes, hipotiroidismo,
etc. Su disminución se encuentra asociada a la enfermedad de Wilson.

1.2. FUNDAMENTO DEL MÉTODO

El ácido úrico es oxidado por la enzima uricasa generandose alantoína y H2O2, el cual mediante una
reacción mediada por la enzima POD reacciona con el AC. 3-5 – Dicloro – 2 – Hidroxi – Bencensulfónico y 4
AAP produciéndose un compuesto coloreado con un máximo de absorción a 520 nm en cantidad
proporcional de ácido úrico presente en la muestra.

Ácido Úrico --- UOD------- → Alantoína + H 2O 2 H 2O 2+ DMAB + 4-AAP -

------ POD ----→ H O + COMPLEJO COLOREADO

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1.3. MUESTRAS:
Las muestras a utilizar pueden ser tanto de suero como de plasma heparinizado u orina. En el caso de
las orinas precalentar la muestra a 60º para disolver los posibles uratos precipitados y diluir 1:10 en
agua destilada. El resultado en este caso se multiplica por 10.

1.4. MATERIALES Y EQUIPO:

▪ Tubos de ensayo (6 unidades)
▪ Pipetas (de 1ml)

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 ▪ Reactivo para ácido úrico
▪ Muestras de suero problema
▪ Espectrofotómetro.(rango de 520 a 550nm)

1.5. PROCEDIMIENTO:
Las pipetas a utilizar deben estar limpias y libres de residuos para no contaminar el reactivo. Llevar el
reactivo a la temperatura a la que se realizará el ensayo. Utilizar los volúmenes indicados en la siguiente
tabla:

Blanco Standard Muestra

Muestra ( -------- ---------- 0.025 ml
ml)
Standard -------- 0.025 ml -------
(ml)
Reactivo de 1.00 ml 1.00 ml 1.00 ml
Trabajo (ml)

Mezclar e incubar por 5 minutos a 37 º C. Leer las densidades ópticas llevando el espectrofotómetro con
el blanco de reactivo. El color del reactivo es estable por lo menos 30 minutos.

1.6. CALCULOS:

Acido úrico (mg/dL) = FACTOR X Absorbancia de la Muestra

FACTOR = 10/ Absorbancia del Standard

La reacción es lineal hasta 20 mg/dL

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 Discuta los resultados:

Informe de Laboratorio

Instrucciones:
Responda adecuadamente cada una de las preguntas que se presentan
a continuación

1. Fundamente la Reacción de la Prueba.

El ácido úrico presente en la muestra se origina, según las 2 reacciones:

Primero, el ácido úrico presente en la muestra problema es oxidado por acción de la enzima uricasa
esto da como producto de aversión peróxido de hidrógeno que a su vez entra una segunda reacción
oxido de reducción en la cual el peróxido oxida por acción de la enzima peroxidasa a un cromógeno
dando como resultado un producto de reacción donde este cromógeno en su forma oxidada absorbe
fuertemente a 520 nanómetros y se obtiene un color estable que puede medirse fotométricamente la
formación de este color resulta ser directamente proporcional a la cantidad de concentración de ácido
úrico originalmente presente en la muestra problema.

Nos da como resultado final:

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 2. ¿Cuáles son valores normales de ácido úrico en sangre (dar valores en mg/dL y mMol/L)?

El ácido úrico se crea cuando el cuerpo descompone sustancias llamadas purinas, estas purinas se
producen normalmente en el cuerpo también se encuentran en algunos alimentos y bebidas. La mayor
parte del ácido úrico se disuelve en la sangre y viaja a los riñones y desde ahí sale a través de la orina.

Los niveles altos de ácido úrico en la sangre se denominan hiperuricemia. Esto se da cuando el cuerpo
produce demasiado ácido úrico o no lo elimina en cantidades suficientes.

Ácido úrico Sangre Orina

Hombres 3,4 - 7,0 mg/dL (0,42 mmol/L) 0,75 g/día

Mujeres 2,4 - 6,0 mg/dL (0,36 mmol/L) 0,24 g/día

Los niveles por encima de lo normal se Los niveles por debajo de lo normal
deben a: pueden darse por:

● Consumo de fructosa ● Infección por VIH

● Leucemia ● Dieta baja en purinas
● Obesidad ● Enfermedad-metabólica
● Consumo de alcohol hereditaria, etc
● Acidosis, etc.

3. Explicar cómo se encuentran los niveles de ácido úrico en sangre en el contexto

de una anemia perniciosa.
Cuando se presenta una anemia perniciosa los niveles de ácido úrico se elevan en el torrente
sanguíneo y esto es debido a que el cuerpo empieza a descomponer las células con
demasiada rapidez o no expulsa correctamente el ácido úrico. Algunos niños que padecen

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 de leucemia y otros tipos de cáncer también pueden presentar hiperuricemia debido a la
destrucción de células sanguíneas propias de la enfermedad.
Anemia perniciosa:

El ácido úrico es un producto de desecho normal que se produce cuando el cuerpo descompone
sustancias químicas llamadas purinas. Las purinas son sustancias que se encuentran en las células
del cuerpo y también en algunos alimentos. Los alimentos con altos niveles de purinas incluyen
el hígado, las anchoas, las sardinas, los frijoles secos y la cerveza.

La mayoría del ácido úrico se disuelve en la sangre y luego va a los riñones. Desde ahí, sale del
cuerpo a través de la orina. Si el cuerpo produce demasiado ácido úrico o no libera suficiente en
la orina, puede formar cristales que se forman en las articulaciones. Las personas con insuficiencia
renal desarrollarán anemia. Los riñones producen una hormona importante llamada
eritropoyetina (EPO). Las hormonas son secreciones que su cuerpo produce para ayudar a que su
organismo funcione y mantenerlo sano. La EPO le dice a su cuerpo que produzca glóbulos rojos.
Cuando usted tiene insuficiencia renal sus riñones no pueden producir suficiente cantidad de
EPO, lo cual reduce la cantidad de glóbulos rojos y causa anemia.

En la mayoría de los pacientes con hiperuricemia por aumento de la síntesis del ácido úrico la
anomalía subyacente es un aumento del catabolismo de las purinas. También ocasionan un
aumento de la producción y excreción de ácido úrico en las anemias hemolíticas, anemia
perniciosa, hemoglobinopatías, policitemia vera y psoriasis extensa.

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BIBLIOGRAFÍA
 Devlin T. 2004. Bioquímica. 4ta edición. Editorial Reverte, S.A. México D.F.
 Nelson, D.L. y Cox, M.M. 2005. Lehninger Principios de Bioquímica. 4ª edición. Ed.
Omega. Barcelona.
 Villavicencio T.2004. Bioquímica. 42a edición. Editorial San Marcos, S.A

 Ácido úrico en la sangre [Internet]. Medlineplus.gov. [citado el 1 de julio de

2022]. Disponible en:
https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003476.htm
 Análisis de sangre: ácido úrico [Internet]. Kidshealth.org. [citado el 1 de julio
de 2022]. Disponible en: https://kidshealth.org/es/parents/test-uric.html

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