TITULO: PREPARADOS ANTIMICROBIANOS A BASE DE L-CISTEÍNA,

ACETATO DE PLATA Y PHMG-HC PARA IMPREGNACIÓN DE FIBRAS

QUÍMICAS Y TEXTILES

Investigadores participantes:
 AN Adamyan,
 AK Kuchurova,
 AI Ivanova
 MD Malyshev,
 VA Gerasin,
 VM Chervinets,
 SD Khiznyak,
 PM Pakhomov

PALABRAS CLAVE:
 PHMG-HC: clorhidrato de polihexametilenguanidina
 Ag: plata
 CSS: solución de cisteína-plata
 Sales AG; (nitrato, nitrito y acetato
 OH: Hidroxido.
 AgON3: nitrato de plata
 CH3COOAg: acetato de plata
 Cys – C: L-Cisteina (Aminoacido)
 Na2ENTONCES4: sulfato de sodio decaidrato
 NaCl: cloruro de sodio
REVIEW:
Los hidrogeles preparados a partir de L-cisteína, acetato de plata y clorhidrato de
polihexametilenguanidina (PHMG-HC) se utilizaron en estudios reológicos,
estructurales y antibacterianos. Se encontró que las soluciones acuosas de
Lcisteína y acetato de plata eran muy miscibles con soluciones acuosas de
PHMG-HC para formar hidrogeles transparentes. Se propuso un modelo para la
estructura tridimensional de la red degel. El hidrogel exhibió una alta actividad
antimicrobiana contra cultivos de prueba de microorganismos patógenos y
condicionalmente patógenos
 Tabla 1. Muestras estudiadas y sus concentraciones
La creación de desinfectantes altamente efectivos es un problema muy desafiante
debido al aumento significativo en el número de infecciones microbianas
(bacterianas, fúngicas, virales, etc.). Además, varios microorganismos tienden a
mostrar resistencia a los antibióticos y desinfectantes. Se sabe que la plata (Ag)
posee potentes propiedades bactericidas. La plata se puede usar en medicina
como una solución coloidal de nano y micropartículas de Ag metálica o agua de
plata en la que Ag existe en forma iónica (Ag+). Soluciones acuosas deL-cisteína y
sales de Ag (nitrato, nitrito y acetato), es decir, solución de cisteína-plata (CSS) e
hidrogeles supramoleculares basados en CSS, exhiben potentes propiedades
bactericidas a niveles bajos de Ag+concentraciones (~0.01%).
La formación de gel en dichos sistemas normalmente ocurre en dos pasos. El
primer paso es la producción de CSS; la segunda, formación de gel añadiendo a
CSS una
sal iniciadora de formación de gel. Los hidrogeles se forman en un solo paso sin
agregar un electrolito al sistema si las soluciones acuosas deL-cisteína y nitrito de
Ag se utilizan. Las cadenas supramoleculares de moléculas de Ag mercaptide se
forman al mezclar soluciones acuosas deL-cisteína y una sal de Ag. La adición de
un electrolito, por ejemplo, clorhidrato de polihexametilenguanidina (PHMG-HC),
induce la formación de gel en CSS, es decir, la formación de una red
tridimensional.

El CSS y los hidrogeles basados en él son sistemas interesantes para su uso

como preparados bactericidas (soluciones, geles, ungüentos, sprays, etc.) y para
la formulación de materiales bactericidas (fibras y paños impregnados con CSS).
El uso de CSS e hidrogeles para empapar telas utilizadas como máscaras es
especialmente oportuno debido a la propagación de infecciones por coronavirus.
Las pruebas preliminares mostraron potentes propiedades bactericidas de fibras y
telas impregnadas con CSS¿’4 y geles. Por otro lado, PHMG-HC (CHN Cl) es un
polielectrolito catiónico que posee una combinación única de
propiedades fisicoquímicas y biocidas y permite que este CSS se utilice como
desinfectante. PHMG-HC es muy soluble en HO y se usa ampliamente para
preparar varias preparaciones bactericidas con propiedades antibacterianas,
desinfectantes, antimicóticas y antivirales
Las siguientes preguntas me parecieron interesantes. ¿Son compatibles CSS y
una solución acuosa de PHMG-HC? ¿Hacer forman hidrogeles y en qué medida
los geles manifiestan propiedades antibacterianas? El objetivo del presente trabajo
fue dar respuesta a estas preguntas.
Hidrogeles a base de L-cisteína y AgOAc se prepararon utilizando soluciones
acuosas (0,01 M) de los componentes de partida. CSS (2 ml) se obtuvo vertiendo
L-solución de cisteína (0,6 ml) en HO (0,65 ml), agitación y adición de solución de
AgOAc (0,75 ml). Esto produjo una solución opalescente de color amarillo pálido
que se volvió transparente y amarilla al reposar durante 6-12 h a temperatura
ambiente en la oscuridad. Este fue el primer paso de la etapa de maduración de
CSS. Se añadieron una solución de una sal iniciadora,
cloruro o sulfato de sodio y una solución de PHMG-HC para producir un hidrogel.
La concentración de iniciador en las muestras varió en
el rango de 0.05-0.375 M.
El tiempo de formación del gel y su fuerza dependieron del tipo de electrolito y su
concentración y la temperatura. Se produjeron hidrogeles con PHMG-HC mediante
la preparación de soluciones con concentraciones iniciales de 0,1, 0,5,
1,0, 1,5 y 2,0 % con un volumen de polímero que variaba de 0,01 a 0,05 ml. La
concentración final de PHMG-HC en el CSS varió de 0,001 a
0,1%. Todas las soluciones se prepararon en HO destilada a 25ºC. Los hidrogeles
resultantes se observaron durante 15 días. La fuerza de los geles se evaluó en
una escala de cinco bolas. Su viscosidad se midió en un viscosímetro de vibración
SV-10 (A&D Co., Japón) en el que las placas sensoras vibraron a 30 Hz y una
amplitud constante de ~1 mm.
La fuerza de gel y las viscosidades de solución y gel se midieron a 25ºC. Los
espectros electrónicos de las muestras estudiadas se registraron en un
espectrofotómetro UV Evolution Array (Thermo Scientific) en una cubeta de cuarzo
de 1 mm. La morfología de las muestras se estudió en un microscopio electrónico
de barrido (SEM) JEOL JSM-6610LV (Japón). La actividad antibacteriana del
material se determinó por el método de difusión en agar en una placa de cultivo de
prueba. Bacilo sutilis6633, es un microbio saprofito con una gran célula bacteriana
que da una tinción Gram-positiva y crece y se multiplica en presencia de O
estafilococo aureusP209 ATCC 25923 es una bacteria condicionalmente patógena
que habita en varios objetos ambientales y regiones del cuerpo humano.
Los microbios colonizan la piel y las membranas de los órganos internos.E. coli
ATCC 25922 es un representante de la microflora bacteriana normal del tracto
gastrointestinal humano. Un aumento o disminución en el número de E. coli de la
norma se considera disbacteriosis de primer grado. Shigella sonnei IIINo. 1908 es
una bacteria gramnegativa, anaeróbica facultativa, inmóvil, no productora de
esporas que causa la shigelosis disentérica. Salmonella typhimurium5715 es una
bacteria Gram- negativa en forma de bastón con flagelos que le proporcionan un
modo de motilidad. Esta bacteria es la principal causa de intoxicación alimentaria
(salmonelosis) en las personas.Pseudomonas aeruginosaATCC 27853 es una
bacteria Gram-negativa móvil (monotric) con forma de bastón. Habita en el agua y
el suelo y es condicionalmente patógeno para los humanos y vector de infecciones
nosocomiales en las personas.Candida albicansATCC 885-653 es un hongo
diploide (blanco, una forma de hongo parecido a una levadura). Es capaz de
aparearse, pero no en forma de meiosis y causa infecciones oportunistas en
humanos.

Las muestras analizadas se colocaron con una pipeta de 20 μL sobre la superficie

del medio de crecimiento óptimo inoculado con un cultivo de prueba de
microorganismos y se cultivaron a 37 °C durante 1 día. La actividad antibacteriana
y fungicida del material se expresó en el diámetro (mm) de la zona de inhibición
del crecimiento.

El problema de mayor prioridad de la investigación fue responder a la pregunta

sobre la compatibilidad del CSS con la solución acuosa de PHMG-HC. Resultó
que el CSS y el PHMG-HC acuoso eran muy miscibles entre sí y formaban una
solución
transparente. También es digno de mención que la adición al CSS de la solución
acuosa de PHMG-HC a una determinada proporción de concentración de las
soluciones iniciales podría formar hidrogeles bastante fuertes. Anteriormente, se
añadía un iniciador electrolítico al CSS para iniciar el proceso de gelificación. Sin
embargo, la gelificación ocurrió en el CSS
Los hidrogeles más persistentes y fuertes se obtuvieron mediante la adición de
PHMG-HC (0,5 %, 0,025 ml). La concentración final de PHMG-HC en el CSS fue
0,0125%. En otros casos, no se observó gelificación debido a una deficiencia del
polímero a concentraciones de 0,001-0,01% o se produjo gelificación pero se
destruyeron los hidrogeles. Se formó un precipitado con un exceso de polímero a
concentraciones de PHMG-HC de 0,02-0,10%. La viscosidad de las muestras se
midió 30 min después de preparar las soluciones. Se encontró que las soluciones
con varias concentraciones de PHMG-HC tenían diferentes viscosidades.
Se preparó un hidrogel utilizando PHMG-HC acuoso (0,025 mL) a una
concentración de 0,5 %. Sin embargo, incluso a esta concentración, la viscosidad
cambió después de 30 minutos en solo 1 unidad en comparación con la viscosidad
del CSS inicial (curva 1). La viscosidad aumentó bruscamente cuatro veces (curva
3) al duplicar la concentración de PHMG-HC (1,0%). El efecto observado fue
indicativo de una rápida formación de gel tras la adición de PHMG-HC al 1,0%. Sin
embargo, el aumento adicional de la concentración de PHMG-HC en la solución al
1,5 % no proporcionó una viscosidad aún mayor. La viscosidad medida para estas
muestras después de mostró que la viscosidad aumentó notablemente durante el
almacenamiento de la muestra con PHMG-HC al 0,5%. Esto indicó que se formó
un gel. Por el contrario, la viscosidad disminuyó considerablemente para muestras
con 1.0-1.5% (curvas 3 y 4) durante su almacenamiento y pruebas reológicas.
Esto indicó que el gel se destruyó. Por lo tanto, la concentración óptima de PHMG-
HC para la formación de gel fue 0,5-1,0%
Los espectros electrónicos de las soluciones cambiaron considerablemente al
agregar una pequeña cantidad de PHMG-HC al CSS. Por ejemplo, las bandas de
absorción a 314 y 394 nm desaparecieron al agregar 0.1% (0.0375 mL) de PHMG-
HC al CSS. Aparecieron nuevas bandas a 260 y 375 nm (espectro 4) al agregar
0.1% (0.05 mL). La solución de PHMG-HC en sí misma no mostró bandas de
absorción. Los estudios cinéticos del cambio en las bandas de absorción en la
solución CSS + PHMG-HC inmediatamente después de la mezcla mostraron que
las bandas de absorción a 314 y 394 nm desaparecieron y aparecieron nuevas
bandas a 260 y 375 nm ya 10 minutos después de la mezcla. El inicio de la
gelificación mediante la adición de NaCl a la solución de CSS produjo un efecto
análogo. Adición de PHMG-HC, como NaCl,
Las propiedades antibacterianas de los hidrogeles fueron un problema importante
además de los estudios estructurales. (Tabla 2). Estos estudios encontraron que
las muestras Nos. 1 y 2 (soluciones acuosas de sales de Ag) tenían las mayores
propiedades antimicrobianas para todas las cepas de bacterias y hongos. Sin
embargo, estas soluciones también exhibieron una alta toxicidad para las células
vivas. Por el contrario, la muestra No. 3, que contenía agua L-solución de cisteína,
no poseía propiedades antimicrobianas debido a la falta de Ag. Soluciones y geles
que contienen Ag iónico+(muestras Nos. 4-6) poseía buenas propiedades
antimicrobianas.
La solución CSS (No. 4) no tuvo actividad antimicrobiana contra las cepas S.
aureusATCC 25923 y S. sonnei IIINo. 1908. El hidrogel a base de CSS + Na SO
(No. 5) no tenía propiedades antimicrobianas solo contra S. aureusATCC 25923.
El hidrogel CSS + NaCl (No. 6) fue inactivo contra dos cepas, es decir, S.
aureusATCC 25923 y S. sonnei III No. 1908. La solución acuosa de PHMG-HC
(No. 7) también tenía buenas propiedades antimicrobianas excepto para las cuatro
cepas E. coliATCC 25922, S. typhimurium5715, S. sonnei IIINº 1908, y P.
aeruginosaATCC 27853. Finalmente, el hidrogel CSS + PHMG-HC tuvo
propiedades antimicrobianas y antifúngicas contra todas las cepas de bacterias.
Fig. 1 Imágenes SEM de hidrogel basadas en CSS con NaCl (a, b) y basadas en
CSS con PHMG-HC (c, d) con varios
aumentos

Tabla 2. Actividad antagonista de las muestras estudiadas frente a cultivos de

prueba de microorganismos patógenos y condicionalmente patógenos
CONCLUSION
Por lo tanto, se evidencio que la muestra 8 (CSS Y PHMG-HC) se formó un
hidrogel en un solo paso (sin agregar una sal iniciadora) y se logró un efecto
sinérgico que logro el aumentó las propiedades antimicrobianas contra las cepas
de bacterias y hongos estudiadas al mezclar soluciones acuosas de CSS y
PHMG-HC demostrando que son compatibles y pueden formar hidrogeles y a su
vez tener propiedades antibacterianas.
REFERENCIA BIBLIOGRAFICA
Adamyan, A. N., Kuchurova, A. K., Ivanova, A. I., Malyshev, M. D., Gerasin, V. A.,
Chervinets, V. M., ... & Pakhomov, P. M. (2022). Antimicrobial Preparations Based
on L-Cysteine, Silver Acetate, and PHMG-HC for Impregnation of Chemical Fibers
and Textiles. Fibre Chemistry, 53(5), 300-304.