Universidad Francisco de Paula Santander

Facultad de Ciencias Agrarias

Ingeniería Biotecnológica
Biotecnología Vegetal – Grupo 2B

MANEJO DE CONTAMINACIONES EN EL TRABAJO CON CTV

Mallerlin Basto 1611360; Edinson Muñoz 1611373; Katty Ibáñez 1611036

Clara María Flórez 1611038

Docente: Alina Katil Sigarroa Rieche

INTRODUCCION
La contaminación microbiana es uno de los fenómenos que más pueden conspirar contra
el establecimiento exitoso de los cultivos de células y tejidos vegetales “in vitro” y, en
general, es quizás el problema más frecuente y preocupante en laboratorios de
propagación masiva de plantas por CTV, donde pueden ocasionar pérdidas económicas
importantes en los procesos productivos y afectaciones en el cumplimiento de los
pedidos y las proyecciones de ventas.
Cuando buscamos cultivar células y tejidos vegetales “in vitro” una de las condiciones
básicas es lograr un cultivo axénico, o sea, libre de microorganismos, para que los
tejidos vegetales puedan llevar a cabo todos sus procesos de crecimiento y desarrollo y
lograr obtener la morfogénesis deseada. Sin embargo, no siempre es sencillo conseguir
eliminar la presencia de organismos indeseables al interior del contenedor de cultivo.
Los microorganismos contaminantes pueden crecer sobre la superficie del tejido vegetal
o en los medios de cultivo y ocasionar daños directos a los tejidos vegetales por
colonización de sus células, pero también pueden competir por espacio, nutrientes o
expulsar metabolitos que pueden resultar fitotóxicos afectando así los tejidos vegetales
y la morfogénesis in vitro” Los organismos indeseables pueden introducirse por
múltiples factores, entre los que podemos resaltar una inadecuada desinfección de los
tejidos, malas prácticas de esterilización y siembra, así como ambientes de trabajo
inadecuados o mal funcionamiento de equipos, especialmente autoclaves, hornos y
cabinas de flujo laminar.
Cuando las contaminaciones son causadas por los tejidos vegetales (explantes) se le
conoce como contaminación endógena o latente, mientras que si los contaminantes se
introducen por otras causas se le denomina contaminación exógena. Conocer a
profundidad el fenómeno, sus causas y los factores involucrados permite diseñar
adecuadamente estrategias de prevención y manejo de las contaminaciones, así como
detectar a tiempo cuando se elevan los niveles por encima de los valores aceptables
haciendo necesario establecer planes de emergencia que minimicen las pérdidas.
OBJETIVOS

 Discutir acerca de las medidas más necesarias y efectivas para controlar

eficientemente problemas relacionados con la contaminación en laboratorios de
CTV, con especial énfasis en laboratorios comerciales de producción masiva de
vitroplantas.

METODOLOGIA
PLAN DE EMERGENCIA PARA CONTROL DE CONTAMINACIONES Y
PLAN DE MANEJO PREVENTIVO

 SITUACIÓN HIPOTÉTICA EN UN LABORATORIO DE PRODUCCIÓN

COMERCIAL DE VITROPLANTAS
Descripción de la situación: Usted se encuentra con la dirección técnica de un
laboratorio comercial de producción de vitroplantas con el siguiente personal a
cargo:

En la línea de micro propagación de bananos se le presenta la siguiente

situación:
En varios lotes diferentes de vitroplantas en fase de multiplicación (sub-cultivos
III y IV) usted encuentra gran cantidad de frascos de cultivo contaminados por
Rhizophus sp. Y Aspergillus sp.

a) Analice la situación presentada y discuta con su grupo de trabajo que

pudo haber ocurrido.
Al analizar y discutir la problemática planteada, se llegó a una conclusión
hipotética, la cual es que la contaminación se pudo producir al dejar los frascos
en el área no estéril donde probablemente pudieron cometer el error de no
esterilizar algunos frascos, los cuales llevaron a la propagación de dichos
hongos.
¿A qué fuente (s) atribuyen la contaminación? ´
A la fuente que se le atribuye la contaminación de los cultivos es a:
 Ambiente debido a que:
 El aire puede llegar a contaminar los frascos, sino se limpia
adecuadamente los filtros de ventilación.
 El agua puede llegar hacer otro factor, ya que si no se limpian o se
secan adecuadamente los frascos se pueden contaminar.
 No se realizó una adecuada desinfección del explante al utilizarlo lo cual
trae persecuciones como el crecimiento de ciertos hongos.
 Al momento de realizar el montaje el personal no utilizo adecuadamente
el tapabocas, lo cual al hablar o estornudar caen gotas de saliva y así
contaminar el montaje
 El personal manipuló los implementos a utilizar sin lavarse las manos y
sin guantes, lo cual lleva a la contaminación
 Otros componentes químicos persistentes en el medio

¿Como podrían comprobar esta suposición?

Se podría comprobar al:
 Revisar los filtros de ventilación, para poder saber si están limpios o
sucios, sí están sucios impiden una ventilación adecuada del aire,
esto lo que hace es contaminar el área de trabajo.
 Ingresar al laboratorio y supervisar que el personal este utilizando
adecuadamente el material de trabajo, que les dando una buena
esterilización, por último, que este utilizando adecuadamente su
uniforme de trabajo (bata, guantes, tapabocas y cofia).
 Observar la formación y responsabilidad del personal que trabaja en
esta área el cual contenga el conocimiento y medidas adecuadas
para su debido manejo.
 Momento de realizar el corte, la desinfección de los explantes, ya que
no los deja el tiempo necesario para que todos los microorganismos
mueran y la planta quede sin contaminantes.
Dado que estos pudieron haber sido algunos de los factores por los cuales se
pudo propagar la contaminación con los hongos y por tanto se debe tener en
cuenta como método de prevención para evitar dichos problemas.
Diseñe un plan de emergencia para controlar en el menor tiempo posible
la situación.
Una vez comprobado se plantea un plan para bajar niveles de contaminación
del ambiente como son:
 Limpieza, rotación de desinfectantes para no generar resistencia,
limpieza superficial con alcohol en cabinas, flujos de trabajo entrada y
salida de personal se abre y cierra constantemente las puertas en áreas
de siembra, si la contaminación está más en los aires revisar los filtros,
revisar las cabinas (presiones).
 Poder supervisar de una mejor manera los tiempos de desinfección para
los explantes, los materiales con los cuales se va a desinfectar y los
cuales se van a sacar para poder introducirlos en el frasco con el medio
de cultivo y así no poder dejar microorganismos en el explante y así
lograr que el explante crezca y se desarrolle sin contaminantes de
hongos
Por medio de esto, los explantes se llevarán a una solución de desinfección
por medio de hipoclorito de sodio a un tiempo determinado para poder
eliminar estas bacterias, hongos o microorganismos.
Diseñe planes de prevención hacia el futuro
Un plan consta de un objetivo general unos específicos, un alcance y la
descripción de cómo se va a hacer
OBJETIVO GENERAL
- Prevenir el acceso de factores contaminantes al proceso

OBJETIVOS ESPECIFICOS
- Realizar dos actividades de esterilización para erradicar o eliminar de
raíz cualquier tipo de foco contaminante en los materiales que se van a
realizar en el proceso

- Capacitar periódicamente al personal para que sea más competente a la

hora de realizar sus actividades

- Establecer los protocolos de bioseguridad para el personal

ACTIVIDAD RESPONSABLE TIEMPO DESCRIPCION

Cada vez que

entre el personal
al laboratorio se
debe cumplir
Capacitación Asistente o con todos los
del personal docente Cada 20 días implementos de
bioseguridad
para así evitar
cualquier foco
de
contaminación.

En la primera
etapa lo que se
realiza es lavado
Previo a la de los
Actividades de realización de materiales,
esterilización 1 Auxiliar cualquier equipos para
etapa y laboratorio que estén libres
segunda etapa de cualquier
factor
contaminante.

Segunda etapa
se realiza con
alcohol a un alto
porcentaje.
Se realizara
durante un corte
tiempo de
retroalimentación
de cómo se debe
realizar las
Capacitación Líder de Cada mes actividades de
de personal laboratorio esterilización
Docente para la
prevención de
agentes
contaminantes
en la línea de las
actividades que
se realizan en
los laboratorios
Disponer de
los elementos Al ingresar al
necesarios laboratorio de
para debe garantizar
contrarrestar que el personal
focos de que ingrese a
contaminación laboratorio
 cuente con toda
la indumentaria
Previamente a necesaria para
Auxiliar de cada practica contrarrestar
laboratorio de laboratorio cualquier foco de
contaminación,
como los es
guantes, cofia y
bata no se
permitirán el
ingreso de
elementos
ajenos a los
requerido para la
práctica de
laboratorio

BIBLIOGRAFIA

 Capítulo 5. Control de Contaminaciones del libro “Propagación y Mejora

Genética de plantas por Biotecnología.

 Diapositivas del tema suministradas por el docente y disponibles para descarga

en plataforma PLAD.