Cromatografía de fluidos (líquidos)

Concepto
La cromatografía líquida es una técnica utilizada para separar los componentes de
una mezcla. Consiste en una fase estacionaria no polar (columna) y una fase
móvil. La Cromatografía de líquidos se basa principalmente en los mecanismos de
adsorción, distribución, interacción hidrofóbica y formación de complejos entre
otros.
La Cromatografía de líquidos, es una técnica de análisis químico ampliamente
utilizada, la cual permite separar físicamente y cuantitativamente los distintos
componentes de una solución por la absorción selectiva de los constituyentes de
una mezcla, consta de dos fases, una fija que suele llamarse fase estacionaria, y
una móvil (fase móvil) que fluye permanente durante el análisis, y que en este
caso es un líquido.
La CL es una técnica de separación analítica ampliamente utilizada. Las razones
de su popularidad son su sensibilidad, su fácil adaptación a las determinaciones
cuantitativas exactas, su idoneidad para automatizarla, su capacidad para separar
sustancias no volátiles o termolábiles, pero, sobre todo, su amplia aplicabilidad a
sustancias que son importantes en la industria, muchos campos de la ciencia y
para la sociedad en general.

Fundamento
La cromatografía de líquidos (CL) es un mecanismo de separación basado en la
diferencia de distribución de las especies químicas entre dos fases no miscibles,
en la cual, la fase móvil es un líquido que se filtra a través de una fase estacionaria
contenida en una columna.
La fase móvil es un solvente o mezcla de solventes y la fase estacionaria un sólido
que interactúa con las sustancias que se desea separar (cromatografía líquido-
sólido), o bien un líquido inmiscible con la fase móvil, depositado en la superficie
de un sólido (cromatografía líquido-líquido). Esta forma de cromatografía puede
realizarse con diferentes arreglos experimentales: en columna, en capa delgada o
en papel y HPLC. En el primer caso, la fase estacionaria se encuentra rellenando
un tubo; en el segundo, se dispersa sobre una lámina de vidrio o aluminio
formando un lecho de espesor uniforme; en la cromatografía en papel, la fase
estacionaria es la solución acuosa contenida en el interior de las celdas formadas
por las fibras de la celulosa, y es por tanto una forma de cromatografía líquido-
líquido.
Equipo
Un cromatógrafo de líquidos de alta resolución (CLAR), también conocido como
cromatógrafo de líquidos de alta presión, se compone básicamente de:  Fase
móvil  Bomba de alta presión  Inyector y loop  Columnas  Detector  Sistema
de registro de datos.

Aplicaciones
 Análisis y cuantificación de sustancias químicas.
 Productos farmacéuticos.
 Bioquímica: hormonas, nutrientes, aminoácidos, lípidos, carbohidratos,
antioxidantes.
 Alimentación: contaminantes, aditivos, nutrientes.
 Contaminantes medioambientales: plaguicidas, herbicidas, fenoles.
 Purificación de proteínas.
 Análisis proteómico.
Referencias bibliográficas
 Skoog, D.A, West, D.M, Holler, J. & Crouch, S.R. (2015). Fundamentos de
química analítica. Cengage Learning Editores (9ª edición), pp. 861-863.
 Pedro Pássaro-Carvalho, C, Rivera Narváez, C.M, Román Páez, M.A,
Cardona Bermúdez, L.M, Muñoz Echeverri, L.M, David Goméz, D, Quiceno
Rico, J.M, & Rojas Bedoya, L.C. (2016). Guía sobre principios básicos de
cromatografía y sus aplicaciones. Rionegro-Antioquina. Sennova (1ª
edición), pp. 14-34.
 Lopez Murillo, O.F. (2018). Propuesta de un método para el análisis de
nimesulida por cromatografía de líquidos de alta resolución. Universidad
Nacional Autónoma de México.