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CROMATOGRAFIA DE GASES

La cromatografa de
gases es una
tcnica cromatografa en la
que la muestra se volatiliza
y se inyecta en la cabeza de
una columna cromatografa.
La elucin se produce por el
flujo de una fase mvil de
gas inerte. A diferencia de
los otros tipos de
cromatografa, la fase mvil
no interacta con las
molculas del analito; su
nica funcin es la de
transportar el analito a
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travs de la columna.
PRINCIPIOS DE LA CROMATOGRAFIA DE GASES
La instrumentacin requerida para cromatografa de gases tambin
es mucho ms sencilla y econmica. Sin embargo, en
cromatografa de gases, la influencia de la temperatura sobre la
distribucin del equilibrio es considerable, a diferencia de la
cromatografa lquida. Por ello, la cromatografa de gases
presenta limitaciones en tres casos:
compuestos poco voltiles, generalmente los de peso molecular
compuestos sensibles a una elevacin de la temperatura incluso
moderada (determinados compuestos de inters biolgico)
compuestos que se encuentran en forma inica (puesto que son e n
general poco voltiles)

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COLUMNAS DE GASES

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Columnas capilares
Son de dos tipos bsicos: las de pared recubirta WCOT y las de
soporte recubierto por SCOT

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INSTRUMENTACION BASICA

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ANLISIS CUALITATIVO
Un cromatograma proporciona solo una nica pieza de informacin cualitativa
acerca de cada especie en muestra. Su tiempo de relacin o su posicin en la
fase estacionaria despus de un cierto periodo de elucion

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APLICACIN DE CROMATOGRAFIA
Medioambientales: Anlisis de pesticidas y herbicidas, anlisis de hidrocarburos,
semivoltiles y voltiles, anlisis del aire...
Alimentos y aromas: fragancias y aromas, aceites, bebidas, cidos orgnicos,
azcares, FAMES, steres metlicos, triglicridos, alcoholes...
Qumica Industrial: alcoholes, cidos orgnicos, aminas, aldehdos y cetonas,
steres y glicoles, hidrocarburos, disolventes, anilinas, gases inorgnicos...
Biociencia: drogas, frmacos, alcoholes y contaminantes en sangre, disolventes
residuales...
Derivadas del petrleo: gas natural, gases permanentes, gas definera, gasolinas,
gasleos, parafinas...

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CROMATOGRAFIA LIQUIDA
La Cromatografa lquida, tambin conocida como Cromatografa de lquidos, es
una tcnica de separacin y no debe confundirse con una tcnica cuantitativa o
cualitativa de anlisis.
Es una de las tcnicas analticas ampliamente utilizadas, la cual permite separar
fsicamente los distintos componentes de una solucin por la adsorcin
selectiva de los constituyentes de una mezcla.
En toda cromatografa existe un contacto entre dos fases, una fija que suele
llamarse fase estacionaria, y una mvil (fase mvil) que fluye permanente
durante el anlisis, y que en este caso es un lquido o mezcla de varios
lquidos.
La fase estacionaria por su parte puede ser almina, slice o resinas de
intercambio inico que se encuentran disponibles en el mercado.

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OBJETIVO
Aprender y dar a conocer el proceso de una cromatografa lquida de alta
resolucin y sus diferentes tipos.
Conoceremos la funcionalidad de las diferentes partes del equipo.

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FUNDAMENTO
La cromatografa lquida (HPLC), es una tcnica utilizada para separar los
componentes de una mezcla. Consiste en una fase estacionaria no polar
(columna) y una fase mvil.
La fase estacionaria es slica que se ha tratado con RMe2SiCl . La fase mvil
acta de portador de la muestra. La muestra en solucin es inyectada en la
fase mvil.
Los componentes de la solucin emigran de acuerdo a las interacciones no-
covalentes de los compuestos con la columna.
Estas interacciones qumicas, determinan la separacin de los contenidos en la
muestra. La utilizacin de los diferentes detectores depender de la
naturaleza de los compuestos a determinar.

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CROMATOGRAFA LQUIDA DE ALTA
RESOLUCIN (HPLC)
La cromatografa engloba a un conjunto de tcnicas de anlisis basadas en la
separacin de componentes de una mezcla y su posterior deteccin.
Las tcnicas cromatografas son muy variadas, pero en todas ellas hay una fase
mvil que consiste en un fluido (gas, lquido, o fluido supercrtico) que arrastra
a la muestra con un flujo constante de presin proporcionado por una bomba.
Los componentes de la mezcla interaccionan de distinta forma con la fase
estacionaria y con la fase mvil.
De este modo, los componentes atraviesan la fase estacionaria a distintas
velocidades y se van separando.

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APLICACIONES
Campos de Aplicacin de HPLC
Frmacos: Antibiticos, sedantes esteroides, analgsicos
Bioqumica: Aminocidos, protenas, carbohidratos, lpidos
Productos de alimentacin: Edulcorantes artificiales, antioxidantes, aflatoxinas,
aditivos
Productos de la industria qumica: Aromticos condensados, tensoactivos,
propulsores, colorantes
Contaminantes: fenoles, Pesticidas, herbicidas, PCB
Qumica forense: Drogas, venenos, alcohol en sangre, narcticos
Medicina clnica: cidos biliares, metabolitos de drogas, extractos de orina,
estrgenos.

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APLICACIONES
.

Algunas aplicaciones importantes de la HPLC preparativa:

Separacin y purificacin de metabolitos


Separacin y purificacin de los metabolitos de las drogas procedentes de
muestras de orina
Purificacin y separacin de enantimeros
Purificacin de compuestos naturales
Purificacin y caracterizacin de enzimas y protenas

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INSTRUMENTACION PARA HPCL
Los componentes bsicos de un sistema para HPLC son:

A) Depsitos para la fase mvil (disolventes)


B) B) Sistema de bombeo para proporcionar presin a la fase mvil
C) C) Sistema de inyeccin de muestras
D) D) Columna cromatogrfica
E) E) Termostatos para las columnas
F) ) Detectores
G) G) Sistema para el tratamiento de datos y registrador

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INTRUMENTACION PARA HPCL

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Fase mvil

es la fase que se mueve en una direccin


definida. Puede ser un lquido (cromatografa de
lquidos o CEC). un gas (cromatografa de
gases) o un fluido supercrtico (cromatografa
de fluidos supercrticos). La muestra que est
siendo separada/analizada (formada de
analito/s y el disolvente) se inyecta en la fase
mvil que se mueve a travs de la columna. En
el caso de la cromatografa lquida de alta
resolucin, HPLC, la fase mvil es un
disolvente no-polar como el hexano (fase
normal) o bien algn disolvente polar
(cromatografa de fase reversa).

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