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Clase 5:

Biorreactores. Cinética de Biorreactores

Sé Íntegro, Sé Misionero, Sé Innovador


Oremos

Sé Íntegro, Sé Misionero, Sé Innovador


Cumpliendo la Misión
MISIÓN DE LA ESCUELA
PROFESIONAL DE INGENIERÍA
AMBIENTAL

“Somos una comunidad universitaria de la Iglesia


Adventista del Séptimo Día que modela personas a
fin de que sean Ingenieros Ambientales íntegros,
misioneros e innovadores basados en la cosmovisión
bíblica-cristiana para servir a Dios y a la humanidad.”
VISIÓN DE LA ESCUELA PROFESIONAL
DE INGENIERÍA AMBIENTAL

“Ser referentes en el mundo por el modelamiento


de Ingenieros Ambientales íntegros, misioneros e
innovadores con un estilo de vida saludable.”
Cinética
enzimática

Sé Íntegro, Sé Misionero, Sé Innovador


Enzimas

• Las enzimas son catalizadores


biológicos de naturaleza proteica, y que
participan de las reacciones químicas que
ocurren en las células vivas.
• Una diferencia con los catalizadores
químicos sintéticos es que tienen la
capacidad de catalizar reacciones en
condiciones suaves, soluciones acuosas,
temperaturas normales, además de que
reducen las necesidades energéticas y
efectos de corrosión de dichos procesos.
Enzimas

• La nomenclatura oficial de las enzimas es


estipulada por la “Enzyme Commision” e se
basa en el tipo de reacción en la que se
involucra, por ejemplo:
• Oxidorreductasas: Redacción de óxido-reducción
• Transferasas: Transferencia de grupos funcionales
• La nomenclatura más tradicional usa el
nombre del substrato que la enzima
descompone, por ejemplo:
• Proteasa: Cataliza la descomposición de proteínas
• Lipasa: Cataliza la descomposición de los lípidos
Cinética enzimática

Estudia los factores que influyen la velocidad de las reacciones catalizadas por
enzimas y las expresiones de velocidad que describen matemáticamente las
reacciones enzimáticas con el objeto de proyectar, simular y optimizar
reactores que utilizan enzimas, o simplemente para un mayor entendimiento
de una reacción entre uno o varios substratos y una enzima.
Modelos para reacciones simples

E + S ⇌ ES

Donde:
• E= Enzima
• S= Substrato
• ES= Complejo Formado
Modelo cinético de Henri

Los modelos para las reacciones simples en cinética enzimática comprenden


la conversión de un único substrato por una enzima. El primer modelo
matemático fue desarrollado por Henri en 1902. El cual observó a través de
experimentos que:
La velocidad de reacción es de primer orden en relación a un substrato a
bajas concentraciones.
A medida que aumenta la concentración de substrato, el orden de la
reacciones decrece continuamente de 1 a 0, para altas concentraciones de
substrato.
La velocidad de reacción es proporcional a la cantidad total de la enzima
presente
Modelo cinético de Henri

Con base en lo anterior, Henri propuso:


𝐶𝑆
𝑟 = 𝑟𝑚𝑎𝑥
𝑘𝐻 +𝐶𝑆

Donde:
• 𝑟𝑚𝑎𝑥 : velocidad máxima de reacción proporcional a la concentración total de la enzima
• 𝑘𝐻 : constante cinética de Henri
Modelo cinético de Michaelis y Menten

A comparación con Henri, Michaelis y Menten propusieron una explicación


teórica al mecanismo de reacción:
E + S ES
𝑘2
ES ՜ P + E

Donde:
• P= Producto
Modelo cinético de Michaelis y Menten

Michaelis y Menten consideran un equilibrio rápido de la enzima y el


substrato para formar el complejo ES. En este mecanismo propuesto, la
descomposición del complejo enzima es considerada irreversible y es la etapa
más lenta, es decir, es la etapa limitante de la velocidad global de reacción.
Si el producto 𝑘2 𝐶𝐸0 es una constante denominada velocidad máxima de
reacción enzimática o velocidad máxima de conversión de substrato (rmax) y la
constante de disociación (k-1/k1) es conocida como la constante de Michaelis-
Menten (KM). De esa forma, tenemos:
CS
r  rmax
K M  CS
Modelo cinético de Michaelis y Menten

El valor de KM corresponde a la
concentración de substrato que
provee la mitad de la velocidad
máxima de reacción. Así que cuanto
menor el valor de KM, la afinidad de la
enzima con el substrato será mayor.
Cuanto mayor KM, menor afinidad y
menos producto será formado o
menos substrato convertido

Representación gráfica de la expresión cinética


de Michaelis y Menten
Modelo cinético de Michaelis y Menten

Del análisis anterior en la expresión (11)


Si CS = KM  r = rmax/2
Si CS >>> KM  r = rmax (reacción de orden
zero)
Si CS <<< KM  r = (rmax/KM).CS ou r = k.CS
(reacción de primer orden)

Representación gráfica de la expresión cinética


de Michaelis y Menten
Evaluación de los parámetros cinéticos en
expresiones simples
Para estimar los parámetros cinéticos Lineweaver-
rmax y KM a partir de experimentos de
laboratorio, se pueden usar:
Burk
• Recursos computacionales
• Linearización de la expresión
Eadie-
cinética (3 tipos)
Hofstee

Hanes-
Woolf
Linearización de Lineweaver-Burk

1 1 K 1
  M
r rmax rmax CS

𝑌 =b+𝑚 𝑥

Este método resulta en una buena


estimación de rmax pero no
necesariamente de KM

Linearización de Lineweaver-Burk para obtener los


parámetros cinéticos de la expresión de Michaelis-Menten
Linearización de Eadie-Hofstee

r
r  rmax  K M
CS

𝑌 =b+𝑚 𝑥

Este método está sujeto a errores


grandes por el hecho de que la
velocidad queda en los dos ejes

Linearización de Eadie-Hofstee para obtener los parámetros


cinéticos de la expresión de Michaelis-Menten
Linearización de Hanes-Woolf

CS K M 1
  CS
r rmax rmax

𝑌 =b+𝑚 𝑥

Este método permite la


estimación de rmax con mayor
exactitud.

Linearización de Hanes-Woolf para obtener los parámetros


cinéticos de la expresión de Michaelis-Menten
Cumpliendo la Misión
¿Qué función tiene el modelamiento
cinético en los biorreactores?
Actividad
autónoma

Sé Íntegro, Sé Misionero, Sé Innovador


Cumpliendo la Misión

Trabajo para casa:


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