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enzimas de restricción para formar fragmentos de
CONCEPTOS BASICOS ADN. En este caso son usadas para el reconocimiento
ADN BACTERIANO: consiste en presentar los genes de término de transcripción procariota.
ordenados en operones o en grupos de genes, cada
uno de estos con su secuencia de inicio y secuencia
de término. Todos los grupos de genes son regulados
por la misma secuencia reguladora (mismo operador,
promotor y regulador). Posee operador que es un
mecanismo EXCLUSIVAMENTE del reino
procarionte.

RIBONUCLEOTIDO TRIFOSFÁTO: (en procariontes


están ubicados en el citoplasma) nucleótido que
forma parte de los monómeros del ADN. Está Eucariontes Procariontes
conformado por un azúcar, una base nitrogenada y Dif. 1. Los genes se 1. Los genes se
tres grupos fosfatos. La ARN polimerasa cataliza la organizan en organizan en
unión de los ribonucleótidos mediante la formación de regiones grupos
enlaces fosfodiéster, para así formar la nueva hebra codificante y (operones).
de ARN. no 2. Los genes que
codificante. van a estar
2. Cada gen regulados,
codifica para están
una única regulados por
proteína. el mismo
3. En la región promotor y
regulatoria mismo
se encuentra operador.
la región 3. Cada grupo de
promotora y genes codifica
aparte la para más de
RÍO ARRIBA/ABAJO: porción previa/posterior a la
región una proteína.
región codificante, en esta se encuentra el promotor,
regulatoria 4. En su región
regulador y operador. Se utilizan números
(puede regulatoria se
negativos/positivos para marcar las regiones que se
potenciar la tiene un
ubican aquí.
expresión regulador
del gen o la (que va a
puede potenciar o
disminuir). inhibir al
4. En la región operador).
regulatoria 5. Proceso de
no transcripción
encontramos ocurre en el
le operador. citoplasma.
5. Proceso de 6. No hay
SECUENCIA PALINDRÓMICA: secuencias las cuales
transcripción modificaciones
presentan una disposición de nucleótidos de manera
ocurre en el posteriores a
similar pero de sentido inverso en las cadenas.
la
También son secuencias que son reconocidas por las
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núcleo de la transcripción en caso de no estar esta, se reconocerá una
célula. (slipincig). segunda región promotora que estará -35 (35
6. Si hay ribonucleótidos rio arriba).
cambios • La ARN polimerasa se ubica sobre la región y
post- avanza hasta llegar a la región de terminación.
traducción. Esta indica el término y que la ARN polimerasa
debe abandonar la hebra de ADN, se cierra el
Eucariontes Procariontes complejo y se obtiene el transcrito.
Posee tres tipos de ARN Sólo un tipo de ARN • Dentro de la estructura de la ARN polimerasa,
polimerasa (I, II y III) polimerasa hay una región específica que se encarga de
Necesita factores de Iniciación de la leer la región promotora, la subunidad sigma
transcripción para iniciar, transcripción gracias a la es la porción de esta enzima que se posiciona
estos de unen a proteína subunidad sigma sobre la región promotora (inicio).
TBP + Polimerasa (encargada de identificar
al promotor e iniciar el INICIACIÓN DE LA TRANSCRIPCIÓN
proceso), que se une al § IMPORTANTE: Los genes están en grupos u
promotor + polimerasa operones, van a estar reguladas por el
mismo operón, regulador y promotor.
§ Para la síntesis, solo hay un tipo de ARN pol.
La subunidad sigma permite el inicio del
ETAPAS DE LA TRANSCRIPCION §
proceso de transcripción.
DEL ADN § Va marcado por el posicionamiento de la
ARN pol sobre el promotor.
Eucariontes 1. Formación del complejo de § Se sintetiza un polímero de no más 2 a 3
pre-iniciación ribonucleótidos. Hay una apertura de la hebra
2. Iniciación para hacer la burbuja de replicación.
3. Elongación § ¿Cuándo se pasa a la siguiente etapa? Cuando
4. Terminación la subunidad sigma de la ARN pol
5. Procesamiento del ARN ABANDONA la enzima, para que así la enzima
Procariontes 1. Iniciación pueda separarse de la región promotora y
2. Elongación pueda avanzar sobre la región codificante para
3. Terminación sintetizar el polímero. Hasta que llegue a la
región de terminación para que la ARN pol
¿Qué marca el inicio de la transcripción del ADN ABANDONE la hebra de ADN, para que se libre
procarionte? el transcrito y quede disponible para la
La enzima ARN – polimerasa se posiciona sobre el siguiente etapa que sería traducción.
ADN, realiza la lectura de este en dirección 3’ a 5’.
Inicia el proceso en una región específica denominada
promotor, en esa zona hace una ruptura de los
puentes de hidrógeno, para así hacer el complejo
abierto, formando la burbuja de transcripción. Con
la apertura de la hebra se puede identificar la hebra
molde y con ello comenzar a añadir los primeros
ribonucleótidos trifosfato para sintetizar la molécula de
ARN. LA ARN POLIMERASA NO NECESITA DE
PRIMER O CEBADOR EN LA TRANSCRIPCIÓN PERO
SÍ EN LA REPLICACIÓN.
ELONGACIÓN
o Inicia con la liberación de la subunidad
sigma.
o La ARN pol avanza en dirección 3’ a 5’ sobre la
hebra molde, separando la hebra molde (rompe
los puentes de hidrógeno, tiene actividad de
helicasa).
o Ocurre este trayecto hasta que la ARN
polimerasa llegue a reconocer la señal de
término, que así libera a la enzima de la hebra.
• La zona de inicio se identifica con la marca +1, o Se libera el polímero recién sintetizado.
primer ribonucleótido que se incorpora a la
estructura de la proteína.
• Previo a la zona de inicio, está la zona
promotora que se encuentra en el -10 (10
ribonucleótidos rio arriba o previos al inicio) y

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TÉRMINO
No ocurre de una sola forma.
TRANSCRIPCION DE ARNm
La ARN – polimerasa hace reconocimiento de la señal
de término (secuencia palindrómica) y se realiza el
PROCARIONTE
desprendimiento de la hebra transcrita. > A partir de la primera etapa de la expresión
Terminación intrínseca(1): Formación del loop de génica, se obtiene un ARNm maduro que no es
terminación, la ARN pol lee la secuencia de término necesario procesar (ARN mensajero). Este es
que se ubica en el ADN, se transcribe la secuencia de policistrónico que posee la información de
término sobre el ARNm, esta secuencia permite que el varias proteínas, las cuales en la mayoría de
ARNm genere una complementariedad transitoria los casos se utilizan en la misma ruta
sobre sí mismo formando estructuras de asa o bucle metabólica.
(foto), al identificar estas secuencias de término + las > Por la traducción de este ARNm maduro se
estructuras de bucle la ARN pol reconoce el término van a obtener varias/distintas proteínas.
del proceso sale de la hebra de ADN y deja libre al > Los ARNm procariontes presentan secuencias
ARNm para ser traducido. codificantes de forma continua, ya que
carecen de intrones.
> No hay modificaciones posteriores a la
transcripción, el transcrito obtenido ya es
uno maduro (slipincig).
> El producto de la transcripción del gen es un
ARNm policistrónico con la información
genética para más de una proteína, que al
momento de la traducción se sintetiza cada
una de ellas por separado.

Terminación Rho dependiente (2): se requiere de


una proteína aparte para realizar la terminación.
PROTEÍNA RHO, es una proteína que se encuentra en
alta cantidad en tipos de bacterias, está muy REGULACIÓN DE LA EXPRESIÓN GÉNICA
conservada. Cuando esta proteína está disponible en
REGULACIÓN NEGATIVA: hace referencia a la
el citoplasma de la bacteria, reconoce al polímero (hebra inhibición de la expresión del gen, se
de ARNm recién sintetizada) en su región específica
inactiva/silencia el gen. NO SE SINTETIZA AL
llamada región RUT. Al reconocer a este polímero que
TRANSCRITO POR LO TANTO NO HAY PROTEÍNA.
está en síntesis, la proteína se ancla a este y avanza
Modulada por proteínas represoras, no se quiere la
sobre este desplazándose sobre la secuencia de ARNm
lectura del gen, se evita el encuentro de la ARN
hasta chocar con la ARN polimerasa, y esta polimerasa con el promotor.
interacción Rho + ARN polimerasa hace que esta
Þ PRIMER TIPO: ¿Cómo se puede inactivar el
enzima reconozca la señal de liberación y se libere
gen? Trabajando sobre la región reguladora. Si
para que el transcrito quede disponible para ser en la región reguladora sobre el operador se
traducido. posiciona una proteína represora, es imposible
También puede verse ejemplificado con la proteína
que la ARN pol reconozca a la región
NusA, que algunas literaturas describen que esta
reguladora y por lo tanto se habla de la
proteína beneficia en la actividad de Rho, de igual
inactivación del gen. ¿Cómo se puede
manera se dice que NusA al reconocer la hebra de eliminar la proteína represora que está
ARNm induce la formación de la estructura de loop o ubicada sobre el gen? Incorporando una
asa, y la formación de esto en conjunto con el
molécula extra o un ligando, este va a inducir
reconocimiento de la ARN polimerasa es un indicador de
que la proteína cambie su forma o
término del proceso. conformación, para que ahora sí la ARN pol
pueda hacer
lectura del
gen.

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Þ SEGUNDO TIPO: la proteína represora se ubica leer la región estructural del gen.
sobre la región regulatoria del gen, inhibiendo
su expresión. A diferencia del otro
mecanismo, esta proteína necesita una
molécula extra o ligando para trabajar.
¿Cómo se hace para que esta proteína
represora salga de la región regulatoria?
Se retira el cofactor/molécula
extra/ligando parta inactivar el represor y así
la polimerasa puede leer el promotor y hacer
lectura adecuada del gen.

Þ PROMOTORES REGULADOS POR


NITRÓGENO (positiva): se describe que la
región regulatoria del gen está lejana a la
región estructural o promotora. Por lo que
proteínas dependientes de nitrógeno (que se
localizan en la región regulatoria, en este caso
es región potenciadora y es de función
activadora) inducen a que el ADN se pliegue
sobre sí mismo formando un bucle, activa a la
ARN pol para que pueda avanzar y hacer
REGULACIÓN POSITIVA: se refiere a cuando se síntesis de la molécula de ARNm. ¿Cómo
induce la expresión génica, el gen se activa. Quiere induce la actividad de la polimerasa? El ADN
decir que se sintetiza el ADN, se lee el transcrito y se se pliega sobre sí mismo, la potenciadora toma
sintetiza la proteína. Dirigida por proteínas contacto con la polimerasa, la “empuja” para
activadoras que AYUDAN a la ARN polimerasa a activarla y así la ARN pol pueda leer la región
anclarse al promotor para obtener el transcrito. codificante e iniciar la transcripción.
Þ PRIMER TIPO: ¿Cómo se puede activar este
gen? Una proteína activadora favorece que la
ARN polimerasa lea al promotor y también
favorece su unión. ¿Cómo se revierte este
caso? La proteína activadora se inactiva si se
le adiciona un ligando, saliendo de la región
promotora y por consecuencia la ARN pol no es
capaz de leer la región promotora.

REGULACIÓN OPERÓN lacZ


Operón lacZ: hace referencia a los grupos de genes
que degradan la lactosa, se componen de 3 proteínas
necesarias para la degradación (B-galactosidasa –
permeasa – Transcetilasa).
• La región regulatoria tiene la información
necesaria para una proteína represora.
Þ SEGUNDO TIPO: Se activa el gen, se obtiene • Se ejemplifica con este operón los tipos de
un transcrito de ADN y se traduce este regulación negativa y positiva.
transcrito a una proteína. En este caso la
proteína activadora se ACTIVA mediante un
ligando/cofactor, se une a la región
reguladora, con esto la ARN polimerasa
puede anclarse al promotor y con ello puede

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sobre el promotor para
Preguntirijillas dirigirse a la región
¿Quién sintetiza el ARN? Enzima la cual se llama estructural o codificante
ARN polimerasa, lo que para sintetizar el ARNm.
hace es separar la doble ¿Qué componente del A) Regulador
hebra del ADN, adiciona gen debe encontrarse en B) Exón
ribonucleótido por óptimas condiciones para C) Intrón
ribonucleótido de que la subunidad sigma D) 3’ UTR
manera complementaria permita el inicio de la E) Promotor
a la hebra de ADN, para transcripción?
así sintetizar una nueva ¿A qué nivel actuaría un A) Este disacárido
molécula de ARN. disacárido que al ser actúa como un
Hace lectura de la agregado al medio de represor que se
molécula de ADN, más crecimiento de bacterias une al operador
específico lee la hebra produce la transcripción de los genes de
molde. de un ARN, ese ARNm
¿Qué nombre recibe la Hebra codificante o policistrónico? B) Este disacárido
otra hebra de ADN que hebra no molde. induce al
no está siendo silenciamiento de
transcrita? la ARN
Si solicitamos el Será idéntica a la hebra polimerasa
transcrito de una no molde. C) Este disacárido
molécula de ARN a partir se une al
de la hebra molde de represor y
ADN, ¿a qué provoca la
correspondería el liberación de
transcrito? este desde el
¿Qué caracteriza a la Las secuencias operador
región de término en palindrómicas D) Este disacárido
procariontes? impide la unión
Si se interviene la La terminación. del factor sigma
actividad de la proteína a la región
Rho, ¿qué etapa de la promotora
transcripción se verá E) Este disacárido
directamente afectada? se une a una
¿Dónde trabaja la Sobre el operador proteína
proteína represora? activadora
En un medio rico en No, si una bacteria está liberándola de la
glucosa, ¿será necesario en un medio rico en región prometa
que una bacteria glucosa y se alimenta de
produzca proteínas para glucosa, no hace falta
degradar la lactosa? que se activen estos
genes ni que se
sinteticen proteínas. Por
lo tanto la proteína
represora está unida al
operador, evitando que
la polimerasa lea la
región estructural,
inactivando el gen.
¿Qué pasa si una Se va a necesitar la
bacteria se encuentra en expresión de las
un medio pobre en proteínas para poder
glucosa pero rico en degradar la lactosa para
lactosa? aprovechar los
subproductos de esta
para nutrirse. En este
caso la lactosa actúa
como ligando de la
proteína represora. La
lactosa reprime al
represor y el represor no
se une al operador y la
polimerasa se desplaza
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