PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATÓLICA DEL ECUADOR

Facultad de Medicina
Biología

Nombre: Alejandro Obando. Fecha: 11-03-2023.

Preguntas de Laboratorio:

1. ¿Para que se utilizan:

a. El microscopio de contraste de fases.

Con esta técnica de iluminación se aumenta el contraste de manera notoria entre las

partes claras y oscuras de las células transparentes. Los componentes celulares absorben

la luz de diferente manera y causan pequeñas variaciones de fase en las radiaciones

luminosas, es decir, las retrasan ligeramente al disminuir la velocidad a la cual viajan y

el retraso varía según el tipo de estructura. En las células y tejidos no coloreados, el

escaso contraste se mejora y acentúa al transformar las diferencias de fase (invisibles al

ojo humano) en diferencias de intensidad luminosa las cuales sí son detectables. Este

tipo de microscopio también se denomina de Fases o Contraste de Fases. (Pietrasanta,L.

2015. Pág 4).

b. El microscopio electrónico de barrido (SEM).

La microscopía de barrido tiene en la actualidad otras aplicaciones que resultan de

gran interés tanto en el campo biológico como en el de materiales. La primera

aplicación en importancia consiste en la posibilidad de hacer análisis cuantitativos de

los componentes de la muestra, lo que se realiza mediante el análisis de los rayos X

emitidos por la muestra tras su irradiación con el haz electrónico. Una segunda

aplicación en el campo biológico es el análisis inmunocitoquímico de los componentes

de la superficie de la muestra. Esta posibilidad de reciente desarrollo se basa en el

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mismo principio de la técnica inmunocitoquímica con oro coloidal. Es decir, las

muestras, fijadas o no, se incuban con un primer anticuerpo capaz de reconocer algún

tipo de antígeno de superficie, tras lo cual se procede a una segunda incubación con un

segundo anticuerpo conjugado con partículas de oro coloidal. Mediante las señales BE

se 89 puede visualizar las partículas de oro en los lugares de reacción y, mediante las

señales de SEl, se analiza la topografía de la superficie. Esta técnica se está utilizando

con bastante éxito para el análisis de los antígenos de superficie linfocitarios, así como

para los lugares de unión del virus del SIDA. Por último, existe la posibilidad de

congelar la muestra, fracturarla mecánicamente y, tras los procesos de preparación

habituales, examinar el interior de las células. Esta técnica, aunque difícil, permite el

examen tridimensional de los componentes intracelulares. (Renau-Piqueras, J., & Faura,

M. 1994.pág 89-90).

2. ¿Para qué se utiliza el aceite de cedro, cuando usamos el objetivo de inmersión?

La función del aceite de cedro es restringir el movimiento de la muestra, además de

evitar el rozamiento entre porta-objetos con muestra y el objetivo, generalmente se usa

cuando se va a observar con el objetivo 100x. Otra función es evitar que la luz se

desvíe. El índice de refracción del aceite de cedro y del vidrio es el mismo de la primera

lente objetivo del microscopio, consiguiendo así que los rayos pasen sin sufrir

refracción, eliminando de esta forma reflexiones totales y mejorando la luminosidad de

la imagen. (Mesa, N. 2010. Pág 14-15).

Referencias:

Mesa, N. (2010). INFORME N.

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Pietrasanta, L. S. L. Laboratorio de Física II (ByG) 1er cuat. 2015 Guía 3: Fenómeno de

Interferencia. Microscopía de contraste de Fases. Objetivos.

Renau-Piqueras, J., & Faura, M. (1994). Principios básicos del microscopio electrónico

de barrido.